摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略词 | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第9-27页 |
1.1 细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生及生理作用 | 第9-12页 |
1.1.1 细胞内活性氧的产生 | 第9页 |
1.1.2 细胞中ROS的生理作用 | 第9-12页 |
1.2 生物体内ROS的清除机制 | 第12-13页 |
1.3 过氧化氢酶是生物体内极其重要的ROS清除剂 | 第13-14页 |
1.4 动植物细胞中catalase基因的转录调控机制 | 第14-16页 |
1.5 粗糙脉孢菌中过氧化氢酶的生理功能及基因表达调控机制研究 | 第16-19页 |
1.6 染色质结构状态与基因转录密切相关 | 第19-25页 |
1.6.1 染色质的组成和结构 | 第19-20页 |
1.6.2 组蛋白修饰可调控染色质结构及基因表达 | 第20-23页 |
1.6.3 组蛋白修饰可被特定作用因子识别 | 第23-25页 |
1.7 异染色质调控基因表达 | 第25-26页 |
1.8 本论文的研究内容与意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-41页 |
2.1 培养基及抗体 | 第27-28页 |
2.1.1 50×Vogel's盐 | 第27页 |
2.1.2 Trace element | 第27页 |
2.1.3 0.5M QA | 第27页 |
2.1.4 10×Fig's溶液 | 第27页 |
2.1.5 Bottom and Top Agar | 第27页 |
2.1.6 0.1%葡萄糖Glucose液体培养基 | 第27页 |
2.1.7 2%葡萄糖Glucose液体培养基 | 第27-28页 |
2.1.8 基本斜面培养基 | 第28页 |
2.1.9 Race tube(竞争性生长管)培养基 | 第28页 |
2.1.10 LB液体培养基 | 第28页 |
2.1.11 LB固体培养基 | 第28页 |
2.1.12 抗体 | 第28页 |
2.2 大肠杆菌菌株 | 第28页 |
2.3 载体构建 | 第28-29页 |
2.4 可融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第29-30页 |
2.5 多克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
2.6 菌株 | 第31-32页 |
2.7 突变载体构建 | 第32页 |
2.8 粗糙脉孢菌基因缺失突变株的构建 | 第32-33页 |
2.9 用race tube检测菌株菌丝的生长速率及H202抗性 | 第33页 |
2.10 粗糙脉孢菌可溶性蛋白的提取 | 第33页 |
2.11 Western blot | 第33-34页 |
2.12 Northern blot | 第34-36页 |
2.13 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第36-39页 |
2.14 过氧化氢酶活性胶内分析法 | 第39-41页 |
第三章 粗糙脉孢菌H3K9甲基化修饰调控cat-3基因表达的机制 | 第41-58页 |
3.1 背景 | 第41-42页 |
3.2 实验结果 | 第42-54页 |
3.2.1 dim-5~(KO)突变菌株对H_2O_2处理具有较强抗性 | 第42-43页 |
3.2.2 dim-5~(KO)突变菌株中过氧化氢酶的活性增加 | 第43页 |
3.2.3 dim-5~(KO)突变菌株中cat-1、cat-2和cat-3的表达水平升高 | 第43-45页 |
3.2.4 cat-3基因上游分布H3K9me3修饰 | 第45-46页 |
3.2.5 cat-3基因激活表达的分子机制 | 第46-47页 |
3.2.6 正确组装的异染色质可有效抑制cat-3基因的表达 | 第47-49页 |
3.2.7 cul4~(KO)、dcaf26~(KO)、dim-7~(KO)突变菌株中cat-3的表达升高 | 第49-50页 |
3.2.8 全局性异染色质形成缺陷可在转录及转录后水平调控catalase活性 | 第50-53页 |
3.2.9 异染色质缺陷突变体对于H_2O_2处理耐受性来源于高水平表达的Cat-3 | 第53-54页 |
3.3 小结与讨论 | 第54-58页 |
3.3.1 上游异染色质区域抑制cat-3基因转录 | 第55-56页 |
3.3.2 H3乙酰化修饰参与cat-3基因转录激活过程 | 第56页 |
3.3.3 在异染色质缺陷突变体中Cat-3蛋白修饰可能发生了变化 | 第56-58页 |
第四章 上游基因间区调控cat-3基因转录的机制 | 第58-67页 |
4.1 实验结果 | 第58-63页 |
4.1.1 上游基因间区抑制cat-3基因表达 | 第58-61页 |
4.1.2 上游基因间区调控cat-3基因表达的机制探究 | 第61-62页 |
4.1.3 全局性异染色质修饰及cat-3上游基因间区协同调控Cat-3转录和蛋白翻译后修饰 | 第62-63页 |
4.2 小结与讨论 | 第63-67页 |
4.2.1 cat-3上游基因间区调控cat-3基因表达 | 第64页 |
4.2.2 全局性异染色质修饰及cat-3上游基因间区协同调控Cat-3转录和蛋白翻译后修饰 | 第64-65页 |
4.2.3 cat-3基因上游区域与组蛋白H3乙酰化修饰以相互平行的方式调控cat-3基因表达 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-76页 |
个人简历 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |