| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1 “滁菊”简介 | 第15-16页 |
| 1.1 '滁菊'的由来 | 第15页 |
| 1.2 '滁菊'的主要功效 | 第15页 |
| 1.3 '滁菊'的生产现状 | 第15-16页 |
| 2 植物病毒侵染机制及病毒病的症状 | 第16页 |
| 3 植物病毒的检测方法 | 第16-21页 |
| 3.1 生物学植物病毒检测方法 | 第16-17页 |
| 3.2 电镜观察检测法 | 第17页 |
| 3.3 血清学检查法 | 第17页 |
| 3.4 分子生物学检测方法 | 第17-21页 |
| 3.4.1 核酸分子杂交技术 | 第18页 |
| 3.4.2 双链RNA (dsRNA)电泳技术 | 第18页 |
| 3.4.3 多聚酶链式反应技术 | 第18-21页 |
| 4 植物脱毒方法的研究进展 | 第21-25页 |
| 4.1 药物喷施 | 第21-22页 |
| 4.2 抗病毒基因工程 | 第22-23页 |
| 4.3 植物组织培养脱毒方法 | 第23-25页 |
| 4.3.1 茎尖分生组织培养法 | 第23页 |
| 4.3.2 热处理及热处理结合茎尖分生组织培养法 | 第23-24页 |
| 4.3.3 化学试剂结合茎尖分生组织培养法 | 第24-25页 |
| 4.3.4 低温结合茎尖分生组织培养法 | 第25页 |
| 5 脱毒对生理代谢的影响 | 第25-26页 |
| 6 菊科植物主要病毒 | 第26-29页 |
| 6.1 菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB) | 第27页 |
| 6.2 番茄不孕病毒病(Tomato aspermy virus,TAV) | 第27页 |
| 6.3 烟草花叶病毒病(Tobacco mosaic virus,TMV) | 第27-28页 |
| 6.4 马铃薯X病毒(Potato virus X, PVX) | 第28页 |
| 6.5 马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY) | 第28页 |
| 6.6 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV) | 第28页 |
| 6.7 类病毒——菊花矮化类病毒(Chrysanthemum stunt viroid, CSVd) | 第28-29页 |
| 6.8 菊花褪绿斑驳类病毒(Chrysanthemum Chlorotic Mottle viroid,CChmvd) | 第29页 |
| 7 菊花的脱毒研究 | 第29-30页 |
| 8 本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 '滁菊'的病毒检测 | 第31-43页 |
| 1 材料 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.1 材料采集与记录 | 第31页 |
| 2.2 '滁菊'病毒电镜诊断 | 第31-32页 |
| 2.2.1 病毒提纯 | 第31-32页 |
| 2.2.2 电镜观察 | 第32页 |
| 2.3 巢式RT-PCR病毒检测 | 第32-33页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第32页 |
| 2.3.2 '滁菊'总RNA的提取及第一链cDNA合成、检测 | 第32-33页 |
| 2.3.3 PCR扩增及电泳 | 第33页 |
| 2.3.4 测序结果比对与分析 | 第33页 |
| 2.4 高灵敏度菊花B病毒检测体系的建立 | 第33-34页 |
| 2.5 疑似菊花B病毒样品的实际检测 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 3.1 '滁菊'病毒病统计观察 | 第34-35页 |
| 3.2 '滁菊'病毒电镜观察检测 | 第35-36页 |
| 3.3 巢式RT-PCR检测结果 | 第36-38页 |
| 3.3.1 RNA的提取 | 第36页 |
| 3.3.2 cDNA链的合成 | 第36-37页 |
| 3.3.3 巢式PCR扩增结果 | 第37-38页 |
| 3.4 高灵敏度菊花B病毒检测体系的建立 | 第38-39页 |
| 3.4.1 巢式PCR灵敏度检测 | 第38-39页 |
| 3.4.2 荧光定量灵敏度检测 | 第39页 |
| 3.5 高灵敏度菊花B病毒检测体系田间应用 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 '滁菊'脱毒方法的研究 | 第43-53页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-45页 |
| 2.1 '滁菊'无菌苗再生体系的建立 | 第43-44页 |
| 2.2 茎尖培养适宜培养基的筛选 | 第44页 |
| 2.3 茎尖分生组织培养法 | 第44页 |
| 2.4 热处理结合茎尖分生组织培养法 | 第44页 |
| 2.5 化学试剂结合茎尖分生组织培养法 | 第44页 |
| 2.6 脱毒苗脱毒效果检测及扩繁和生根 | 第44页 |
| 2.7 脱毒苗移栽 | 第44-45页 |
| 2.8 数据统计与分析 | 第45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.1 '滁菊'茎尖分生组织培养适宜培养条件的确定 | 第45-46页 |
| 3.2 化学试剂结合茎尖分生组织培养法诱导成活率 | 第46页 |
| 3.3 3种不同脱毒方法的茎尖存活率比较 | 第46-47页 |
| 3.4 3种脱毒方法脱毒效果的检测与比较 | 第47-48页 |
| 3.5 '滁菊'脱毒苗的增殖和生根 | 第48-49页 |
| 3.6 3种脱毒苗炼苗移栽 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 '滁菊'脱毒苗遗传稳定性和活性成分含量鉴定 | 第53-61页 |
| 1 材料 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-56页 |
| 2.1 脱毒苗遗传稳定性分析 | 第53-54页 |
| 2.2 '滁菊'叶片活性成分含量分析 | 第54-56页 |
| 2.2.1 '滁菊'总黄酮测定 | 第54-55页 |
| 2.2.2 '滁菊'绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A测定 | 第55-56页 |
| 2.3 数据统计与分析 | 第56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-59页 |
| 3.1 '滁菊'遗传稳定性分析 | 第56-57页 |
| 3.2 脱毒苗'滁菊'叶片活性成分含量分析 | 第57-59页 |
| 3.2.1 '滁菊'总黄酮测定 | 第57-58页 |
| 3.2.2 '滁菊'绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A测定 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 全文结论 | 第61-63页 |
| 创新之处 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录 | 第75-83页 |
| 攻读学位期间发表论文、申请专利 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
