| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 第一章 肠出血性大肠杆菌O157:H7的研究进展 | 第11-25页 |
| 1 大肠埃希菌 | 第11页 |
| 2 肠出血性大肠杆菌O157:H7 | 第11-18页 |
| 2.1 起源与演变 | 第11页 |
| 2.2 主要毒力因子 | 第11-16页 |
| 2.3 O157:H7的流行病学研究 | 第16-17页 |
| 2.4 EHEC O157:H7的分离与检测方法 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-25页 |
| 第二章 Z3276蛋白的原核表达及鉴定 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 1.1 材料 | 第25-26页 |
| 1.2 细菌培养 | 第26页 |
| 1.3 细菌基因组DNA提取 | 第26页 |
| 1.4 PCR | 第26-27页 |
| 1.5 O157:H7 z3276基因原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 1.6 重组菌BL21(pCold I-z3276)的诱导表达 | 第29页 |
| 1.7 Western Blot检测 | 第29页 |
| 2 结果 | 第29-32页 |
| 2.1 z3276核苷酸和氨基酸序列BLAST分析 | 第29-30页 |
| 2.2 z3276编码蛋白功能分析 | 第30页 |
| 2.3 PCR扩增及重组质粒构建 | 第30-31页 |
| 2.4 重组BL21(DE3)(pCold I-z3276)蛋白的表达 | 第31页 |
| 2.5 Western blot结果 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-35页 |
| 第三章 EHEC O157:H7 z3276基因缺失株的构建及其生物学特性的研究 | 第35-59页 |
| 1 材料与方法 | 第36-47页 |
| 1.1 材料 | 第36页 |
| 1.2 O157:H7 23276基因缺失株的构建 | 第36-41页 |
| 1.3 O157:H7 23276基因缺失株互补株的构建 | 第41-44页 |
| 1.4 亲本株O157:H7、O157:H7(△z3276)和C△z3276部分生物学特性比较 | 第44-47页 |
| 2 结果 | 第47-56页 |
| 2.1 基因缺失株的构建 | 第47-50页 |
| 2.2 O157:H7 C△z3276的构建 | 第50-51页 |
| 2.2.1 互补质粒pMD19-T-Com-3276的构建 | 第50页 |
| 2.2.2 O157:H7 C△z3276的鉴定 | 第50-51页 |
| 2.3 O157:H7亲本株、O157:H7(△z3276)和C△z3276部分生物学特性比较 | 第51-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 以z3276为靶基因PCR检测EHEC O157:H7方法的建立 | 第59-71页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 1.1 菌株 | 第59-60页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第60页 |
| 1.3 引物设计及合成 | 第60页 |
| 1.4 PCR反应 | 第60页 |
| 1.5 特异性试验 | 第60-61页 |
| 1.6 敏感性实验 | 第61-62页 |
| 1.7 临床样本检测 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-66页 |
| 2.1 PCR反应体系及条件的确定 | 第62-63页 |
| 2.2 特异性试验 | 第63-64页 |
| 2.3 敏感性试验 | 第64-65页 |
| 2.4 牛肛拭子检测和细菌分离 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 全文总结 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 硕士期间论文发表 | 第75页 |
