| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写表 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 植物的农杆菌介导转化法 | 第14-15页 |
| 1.3 关于甘蔗SoSUT5基因的研究背景 | 第15-16页 |
| 1.4 甘蔗转基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的、意义及技术路线 | 第17-19页 |
| 1.5.1 本研究的目的、意义 | 第17-18页 |
| 1.5.2 本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 2 烟草的遗传转化 | 第19-41页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.5 培养基及溶液的配制 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 目的基因获得 | 第20-23页 |
| 2.2.2 构建重组载体pRI 101-ON-SoSUT5 | 第23-26页 |
| 2.2.3 农杆菌感受态细胞EHA105的转化 | 第26页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的烟草叶盘法转化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 转化植株的检测及可溶性糖含量测定 | 第27-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 2.3.1 目的基因的获得 | 第29页 |
| 2.3.2 子叶表达载体的构建 | 第29-33页 |
| 2.3.3 农杆菌感受态细胞EHA 105的转化 | 第33-34页 |
| 2.3.4 农杆菌介导的烟草叶盘法转化 | 第34-36页 |
| 2.3.5 转化植株的检测及可溶性糖含量测定 | 第36-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 3 RNAi表达载体的构建 | 第41-53页 |
| 3.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 3.1.2 菌种及质粒 | 第41页 |
| 3.1.3 试剂 | 第41页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第41页 |
| 3.1.5 培养基及溶液的配置 | 第41-42页 |
| 3.2 pTCK 303干扰载体构建 | 第42-45页 |
| 3.2.1 干扰片段的获得 | 第42-43页 |
| 3.2.2 构建单向片段插入的重组质粒 | 第43-44页 |
| 3.2.3 构建双向片段插入的重组载体 | 第44-45页 |
| 3.2.4 转化农杆菌EHA105感受态 | 第45页 |
| 3.3 抗性筛选试验 | 第45-46页 |
| 3.4 结果与分析 | 第46-51页 |
| 3.4.1 RNAi载体的构建 | 第46-49页 |
| 3.4.2 抗性筛选试验 | 第49-51页 |
| 3.5 讨论 | 第51页 |
| 3.6 小结 | 第51-53页 |
| 4 甘蔗的遗传转化 | 第53-64页 |
| 4.1 材料 | 第53页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 4.1.2 菌种及质粒 | 第53页 |
| 4.1.3 试剂 | 第53页 |
| 4.1.4 仪器设备 | 第53页 |
| 4.1.5 培养基及溶液的配置 | 第53页 |
| 4.2 pUBTC真核表达载体构建 | 第53-55页 |
| 4.2.1 目的基因获得 | 第54页 |
| 4.2.2 构建重组载体 | 第54页 |
| 4.2.3 转化农杆菌EHA105感受态 | 第54-55页 |
| 4.3 农杆菌介导的甘蔗转化 | 第55-56页 |
| 4.3.1 农杆菌侵染液的制备 | 第55页 |
| 4.3.2 甘蔗愈伤的获得 | 第55页 |
| 4.3.3 甘蔗愈伤侵染转化 | 第55-56页 |
| 4.3.4 甘蔗愈伤转化后的培养 | 第56页 |
| 4.4 阳性植株的检测 | 第56-57页 |
| 4.4.1 甘蔗基因组DNA的提取 | 第56页 |
| 4.4.2 PCR检测 | 第56-57页 |
| 4.5 结果与分析 | 第57-61页 |
| 4.5.1 目的基因的获得 | 第57页 |
| 4.5.2 载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.5.3 转化农杆菌 | 第58-59页 |
| 4.5.4 转基因甘蔗植株再生 | 第59-60页 |
| 4.5.5 阳性植株的检测 | 第60-61页 |
| 4.6 讨论 | 第61-63页 |
| 4.7 小结 | 第63-64页 |
| 5 全文总结与展望 | 第64-66页 |
| 5.1 全文总结 | 第64-65页 |
| 5.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 A | 第73-75页 |
| 附录 B | 第75-76页 |
| 附录 C | 第76页 |