英文缩略词表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1 前言 | 第17-19页 |
2 实验材料 | 第19-23页 |
2.1 实验动物 | 第19页 |
2.2 细胞株 | 第19页 |
2.3 试剂 | 第19-21页 |
2.4 仪器与设备 | 第21-23页 |
3 实验方法 | 第23-31页 |
3.1 大鼠肝纤维化模型的制备以及肝组织中蛋白的检测 | 第23-27页 |
3.1.1 猪血清诱导的大鼠肝纤维化模型的制备 | 第23页 |
3.1.2 肝脏组织病理学检查 | 第23-24页 |
3.1.3 Western blot法检测肝组织中β-arrestin2、TGF-β1及其受体和胶原的表达 | 第24-27页 |
3.2 TGF-β1刺激的HSC不同时间点相关蛋白表达 | 第27页 |
3.2.1 大鼠HSC-T6细胞的培养 | 第27页 |
3.2.2 HSC总蛋白的提取和定量 | 第27页 |
3.2.3 Western blot法检测β-arrestin2、TβRⅢ、胶原的表达及Smad2、Smad3、Akt信号通路的激活 | 第27页 |
3.3 TβRⅢ siRNA转染HSC对胶原生成及相关通路的影响 | 第27-28页 |
3.3.1 实验分组 | 第27页 |
3.3.2 转染方法 | 第27-28页 |
3.3.3 Western blot法检测HSC中TβRⅢ、Collagen Ⅰ、CollagenⅢ的表达及Smad2、Smad3、Akt的激活 | 第28页 |
3.4 β-arrestin2 siRNA转染HSC对胶原生成及相关通路的影响 | 第28-29页 |
3.4.1 实验分组 | 第28页 |
3.4.2 转染方法 | 第28页 |
3.4.3 Western blot法检测HSC中β-arrestin2、Collagen Ⅰ和CollagenⅢ的表达及Smad2、Smad3及Akt的激活 | 第28-29页 |
3.5 β-arrestin2与TβRⅢ相互作用的检测 | 第29-30页 |
3.5.1 激光共聚焦检测β-arrestin2和TβRⅢ的共定位 | 第29页 |
3.5.2 免疫共沉淀法检测β-arrestin2和TβRⅢ的相互作用 | 第29-30页 |
3.6 统计学处理 | 第30-31页 |
4 结果 | 第31-47页 |
4.1 猪血清诱导的肝纤维化大鼠肝脏病理变化 | 第31-32页 |
4.2 猪血清诱导的大鼠肝纤维化模型肝脏组织中β-arrestin2蛋白表达变化 | 第32页 |
4.3 猪血清诱导的大鼠肝纤维化模型肝脏组织中Collagen Ⅰ、CollagenⅢ蛋白表达变化及与β-arrestin2的相关性 | 第32-34页 |
4.4 猪血清诱导的肝纤维化大鼠肝脏中TGF-β1、TβRⅡ、TβRⅢ蛋白表达变化 | 第34-35页 |
4.5 TGF-β1刺激HSC对β-arrestin2、TβRⅢ、胶原产生及相关信号通路的影响 | 第35-38页 |
4.5.1 TGF-β1刺激对HSC中β-arrestin2和TβRⅢ表达的影响 | 第35-36页 |
4.5.2 TGF-β 1刺激对HSC中CollagenⅠ、CollagenⅢ表达的影响 | 第36页 |
4.5.3 TGF-β1刺激对HSC中Smad2、Smad3、Akt通路激活的影响 | 第36-38页 |
4.6 转染针对TβRⅢ siRNA对HSC胶原产生、相关信号通路的影响 | 第38-41页 |
4.6.1 不同浓度TβRⅢ siRNA对HSC中TβRⅢ表达的影响 | 第38页 |
4.6.2 转染针对TβRⅢ siRNA对TGF-β1刺激的HSC中Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ表达的影响 | 第38-39页 |
4.6.3 转染TβRⅢ siRNA对TGF-β1刺激的HSC中Smad2、Smad3、Akt通路激活的影响 | 第39-41页 |
4.7 干扰β-arrestin2的表达对TGF-β1刺激HSC胶原产生、相关通路的影响 | 第41-44页 |
4.7.1 不同浓度β-arrestin2 siRNA对HSC中β-arrestin2表达的影响 | 第41页 |
4.7.2 转染β-arrestin2 siRNA对TGF-β1刺激的HSC Collagen Ⅰ、Ⅲ表达的影响 | 第41-42页 |
4.7.3 β-arrestin2 siRNA转染HSC对TGF-β1诱导的Smad2、Smad3、Akt通路激活的影响 | 第42-44页 |
4.8 β-arrestin2与TβRⅢ在HSC中的相互作用 | 第44-47页 |
4.8.1 激光共聚焦检测HSC中β-arrestin2与TβRⅢ的共定位 | 第44-45页 |
4.8.2 转染针对β-arrestin2-siRNA对HSC中TβRⅢ表达的影响 | 第45页 |
4.8.3 免疫共沉淀检测TGF-β1刺激的HSC中β-arrestin2与TβRⅢ的相互作用 | 第45-47页 |
5 讨论 | 第47-52页 |
5.1 β-arrestin2可能在肝纤维化HSC胶原生成中起重要作用 | 第47-49页 |
5.2 β-arrestin2促进胶原生成的作用可能与下调了TβRⅢ对TGF-β1信号通路的抑制作用有关 | 第49-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
综述:β-arrestins与纤维化疾病的研究进展 | 第64-76页 |
参考文献 | 第73-76页 |