| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 地理分布 | 第13页 |
| 1.2 病原学 | 第13-15页 |
| 1.2.1 N基因 | 第13-14页 |
| 1.2.2 P基因 | 第14页 |
| 1.2.3 M基因 | 第14页 |
| 1.2.4 F基因 | 第14页 |
| 1.2.5 H基因 | 第14页 |
| 1.2.6 L基因 | 第14-15页 |
| 1.3 细胞膜受体 | 第15页 |
| 1.3.1 淋巴细胞信号活化因子 | 第15页 |
| 1.3.2 粘连蛋白-4 | 第15页 |
| 1.3.3 其他麻疹病毒属病毒的受体 | 第15页 |
| 1.4 病毒复制 | 第15-16页 |
| 1.5 基因过表达技术 | 第16-17页 |
| 1.5.1 基因过表达技术的简介 | 第16-17页 |
| 1.5.2 基因过表达技术的应用 | 第17页 |
| 1.6 提高疫苗病毒产量的方法 | 第17-18页 |
| 1.6.1 用某些药物处理细胞后可以刺激病毒繁殖 | 第17-18页 |
| 1.6.2 在维持液中补充某些物质也有利于某些病毒的复制 | 第18页 |
| 1.6.3 毒种的选择：经过空斑挑选产量高的大空斑毒株，精制毒种可提高病毒产量。 | 第18页 |
| 1.6.4 病毒液的浓缩、纯化 | 第18页 |
| 1.7 提高PPRV疫苗病毒产量的方法 | 第18-19页 |
| 1.7.1 在维持液中添加某些物质 | 第18页 |
| 1.7.2 利用细胞的自噬机制 | 第18页 |
| 1.7.3 RNA干扰技术（RNAi）的应用 | 第18-19页 |
| 1.7.4 利用PPRV的细胞膜受体 | 第19页 |
| 1.8 H基因对PPRV增殖的影响 | 第19-20页 |
| 1.8.1 H蛋白的重要作用 | 第19页 |
| 1.8.2 PPRV中其他基因对病毒增殖的影响 | 第19-20页 |
| 第二章 PPRV实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第20-31页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 病毒、菌株、载体和细胞来源 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.4 主要培养基的配制 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第21页 |
| 2.2.2 PPRV病毒增殖 | 第21-22页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.4 PCR产物胶回收纯化 | 第23页 |
| 2.2.5 目的片段与克隆载体连接、转化 | 第23页 |
| 2.2.6 重组质粒鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第24-25页 |
| 2.3 结果 | 第25-29页 |
| 2.3.1 N基因的RT-PCR扩增结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 荧光定量PCR标准品重组质粒鉴定结果 | 第26页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第26-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 PPRV H基因真核表达载体的构建与细胞转染和鉴定 | 第31-43页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 病毒、菌株、载体和细胞来源 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 主要培养基的配制 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-38页 |
| 3.2.1 真核表达载体pEGFP C3-PPRV H的构建 | 第32-35页 |
| 3.2.2 重组质粒的细胞转染与检测 | 第35-38页 |
| 3.3 结果 | 第38-41页 |
| 3.3.1 RT-PCR扩增PPRV H基因 | 第38页 |
| 3.3.2 重组质粒的PCR结果 | 第38-39页 |
| 3.3.3 重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.4 重组质粒测序结果 | 第40页 |
| 3.3.5 RT-PCR检测转染效果 | 第40页 |
| 3.3.6 荧光检测转染效果 | 第40-41页 |
| 3.3.7 Western blot检测转染效果 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 PPRV H基因瞬时转染对病毒增殖的影响 | 第43-48页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 细胞、病毒和重组质粒 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第43页 |
| 4.1.4 主要培养基的配制 | 第43-44页 |
| 4.2 方法 | 第44-45页 |
| 4.2.1 β-Actin实时荧光定量PCR方法的建立 | 第44页 |
| 4.2.2 重组质粒瞬时转染 | 第44页 |
| 4.2.3 病毒接种 | 第44-45页 |
| 4.2.4 提取RNA | 第45页 |
| 4.2.5 相对荧光定量RT-PCR检测病毒增殖量的变化 | 第45页 |
| 4.3 结果 | 第45-47页 |
| 4.3.1 β-Actin实时荧光定量PCR方法的建立 | 第45-46页 |
| 4.3.2 荧光定量RT-PCR检测病毒增殖量的变化 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56页 |
