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oscbl5调控水稻赤霉素信号影响花粉育性的研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
主要符号表第14-15页
第1章 绪论第15-25页
    1.1 Ca~(2+)的功能第15页
    1.2 CBLs的结构和功能第15-16页
    1.3 水稻的矮化基因简介和赤霉素(GA)信号转导途径第16-19页
        1.3.1 水稻矮化基因第16-17页
        1.3.2 赤霉素的合成途径第17-19页
    1.4 赤霉素的信号转导通路第19-20页
    1.5 本实验中用到的主要核心技术第20-22页
        1.5.1 传统的方法构建植物表达载体第20页
        1.5.2 基于gateway法构建植物的表达载体第20-21页
        1.5.3 QRT-PCR技术第21-22页
    1.6 植物基因功能的研究方法第22-23页
        1.6.1 基因功能的研究现状第22-23页
        1.6.2 RNAi技术第23页
    1.7 本研究的目的和意义第23-25页
第2章 材料与方法第25-37页
    2.1 实验材料第25-28页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 菌种及载体第25页
        2.1.3 分子实验相关及其它试剂第25页
        2.1.4 培养基第25-26页
        2.1.5 实验室溶液和试剂的配制第26-28页
        2.1.6 主要仪器和设备第28页
    2.2 实验方法第28-37页
        2.2.1 水稻的种植第28-29页
        2.2.2 三引物法鉴定突变体第29页
        2.2.3 细菌培养法第29-30页
        2.2.4 大肠杆菌的转化第30页
        2.2.5 农杆菌转化第30页
        2.2.6 CTAB法抽提取植物基因组DNA第30-31页
        2.2.7 总RNA的提取第31页
        2.2.8 CDNA文库的构建第31-32页
        2.2.9 恢复载体的构建第32-33页
        2.2.10 水稻转基因方法与步骤第33-34页
        2.2.11 转基因植株的检测第34-35页
        2.2.12 gateway法构建亚细胞载体第35页
        2.2.13 农杆菌转化烟草第35页
        2.2.14 α-淀粉酶活性检测第35-36页
        2.2.15 相关引物的信息第36-37页
第3章 实验结果与分析第37-51页
    3.1 农艺性状分析第37-38页
    3.2 花粉育性分析第38-39页
    3.3 萌发率结果分析第39-40页
    3.4 oscbl5恢复载体的构建第40-42页
        3.4.1 oscbl5Promoter-CDS验证第40-41页
        3.4.2 pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体的构建第41-42页
    3.5 农杆菌介导pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体转化水稻及其验证分析第42-45页
        3.5.1 pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体转化水稻第42-43页
        3.5.2 T0代转基因植株的检测第43-45页
    3.6 F0代转化植株的部分农艺性状的分析第45-46页
    3.7 F1代转化植株种子初步筛选第46页
    3.8 亚细胞定位结构分析第46-47页
    3.9 赤霉素内源含量的检测第47-48页
    3.10 赤霉素信号通路中关键酶基因表达量的检测第48-49页
    3.11 赤霉素转导途径中关键基因的检测第49-50页
    3.12 互作基因CIPK的表达量分析第50-51页
第4章 讨论与展望第51-53页
    4.1 讨论第51-52页
        4.1.1 CBL5对多倍体水稻花粉育性及矮化的调控第51-52页
    4.2 展望第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59页

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