摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
主要符号表 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 Ca~(2+)的功能 | 第15页 |
1.2 CBLs的结构和功能 | 第15-16页 |
1.3 水稻的矮化基因简介和赤霉素(GA)信号转导途径 | 第16-19页 |
1.3.1 水稻矮化基因 | 第16-17页 |
1.3.2 赤霉素的合成途径 | 第17-19页 |
1.4 赤霉素的信号转导通路 | 第19-20页 |
1.5 本实验中用到的主要核心技术 | 第20-22页 |
1.5.1 传统的方法构建植物表达载体 | 第20页 |
1.5.2 基于gateway法构建植物的表达载体 | 第20-21页 |
1.5.3 QRT-PCR技术 | 第21-22页 |
1.6 植物基因功能的研究方法 | 第22-23页 |
1.6.1 基因功能的研究现状 | 第22-23页 |
1.6.2 RNAi技术 | 第23页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第2章 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 实验材料 | 第25-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌种及载体 | 第25页 |
2.1.3 分子实验相关及其它试剂 | 第25页 |
2.1.4 培养基 | 第25-26页 |
2.1.5 实验室溶液和试剂的配制 | 第26-28页 |
2.1.6 主要仪器和设备 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-37页 |
2.2.1 水稻的种植 | 第28-29页 |
2.2.2 三引物法鉴定突变体 | 第29页 |
2.2.3 细菌培养法 | 第29-30页 |
2.2.4 大肠杆菌的转化 | 第30页 |
2.2.5 农杆菌转化 | 第30页 |
2.2.6 CTAB法抽提取植物基因组DNA | 第30-31页 |
2.2.7 总RNA的提取 | 第31页 |
2.2.8 CDNA文库的构建 | 第31-32页 |
2.2.9 恢复载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.10 水稻转基因方法与步骤 | 第33-34页 |
2.2.11 转基因植株的检测 | 第34-35页 |
2.2.12 gateway法构建亚细胞载体 | 第35页 |
2.2.13 农杆菌转化烟草 | 第35页 |
2.2.14 α-淀粉酶活性检测 | 第35-36页 |
2.2.15 相关引物的信息 | 第36-37页 |
第3章 实验结果与分析 | 第37-51页 |
3.1 农艺性状分析 | 第37-38页 |
3.2 花粉育性分析 | 第38-39页 |
3.3 萌发率结果分析 | 第39-40页 |
3.4 oscbl5恢复载体的构建 | 第40-42页 |
3.4.1 oscbl5Promoter-CDS验证 | 第40-41页 |
3.4.2 pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体的构建 | 第41-42页 |
3.5 农杆菌介导pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体转化水稻及其验证分析 | 第42-45页 |
3.5.1 pCMBIA1301-oscbl5Promoter-CDS载体转化水稻 | 第42-43页 |
3.5.2 T0代转基因植株的检测 | 第43-45页 |
3.6 F0代转化植株的部分农艺性状的分析 | 第45-46页 |
3.7 F1代转化植株种子初步筛选 | 第46页 |
3.8 亚细胞定位结构分析 | 第46-47页 |
3.9 赤霉素内源含量的检测 | 第47-48页 |
3.10 赤霉素信号通路中关键酶基因表达量的检测 | 第48-49页 |
3.11 赤霉素转导途径中关键基因的检测 | 第49-50页 |
3.12 互作基因CIPK的表达量分析 | 第50-51页 |
第4章 讨论与展望 | 第51-53页 |
4.1 讨论 | 第51-52页 |
4.1.1 CBL5对多倍体水稻花粉育性及矮化的调控 | 第51-52页 |
4.2 展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |