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传染性法氏囊病强弱毒感染诱导B淋巴细胞凋亡差异的研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 引言第13-19页
    1.1 IBDV流行病学第13-14页
    1.2 IBD临床症状和病变第14页
    1.3 IBDV病原学第14-16页
        1.3.1 IBDV形态结构第14页
        1.3.2 IBDV的基因组第14-15页
        1.3.3 IBDV的编码蛋白第15-16页
    1.4 IBDV强弱毒的细胞嗜性第16-18页
        1.4.1 IBDV的靶细胞第16-17页
        1.4.2 IBDV强弱毒间细胞嗜性的差异第17-18页
    1.5 IBDV与细胞凋亡第18页
    1.6 本研究的目的及意义第18-19页
第二章 传染性法氏囊病强弱毒体内的感染性差异第19-27页
    2.1 材料和方法第19-21页
        2.1.1 毒株和细胞第19页
        2.1.2 主要试剂、耗材和仪器第19页
        2.1.3 SPF鸡感染实验第19页
        2.1.4 SPF鸡致死率的测定第19-20页
        2.1.5 强弱毒感染的组织病理分析第20页
        2.1.6 强弱毒感染的组织电镜分析第20页
        2.1.7 强弱毒感染后靶细胞的活性分析第20-21页
            2.1.7.1 鸡B细胞分离第20页
            2.1.7.2 鸡B细胞活性检测第20-21页
        2.1.8 强弱毒感染后靶细胞的凋亡及坏死检测第21页
    2.2 实验结果第21-25页
        2.2.1 感染强弱毒SPF鸡死亡曲线第21-22页
        2.2.2 感染强弱毒SPF鸡免疫器官病理变化第22页
        2.2.3 感染强弱毒SPF鸡电镜分析结果第22-23页
        2.2.4 强弱毒感染后靶细胞的细胞活性检测结果第23-24页
        2.2.5 强弱毒感染后靶细胞的凋亡及坏死检测结果第24-25页
    2.3 讨论第25-27页
第三章 鸡源CD154分子功能区的分泌表达第27-32页
    3.1 材料与方法第27-29页
        3.1.1 鸡和小鼠组织细胞RNA的提取及CDNA的合成第27页
        3.1.2 鸡CD154 ORF的扩增及不同种属CD154的遗传演化分析第27页
        3.1.3 融合蛋白表达载体的构建第27-28页
        3.1.4 融合蛋白表达载体的鉴定第28页
        3.1.5 融合蛋白表达载体的转染第28页
        3.1.6 间接免疫荧光试验(IFA)鉴定融合蛋白的表达第28-29页
        3.1.7 WESTERN BLOT (WB) 鉴定融合蛋白的表达第29页
    3.2 实验结果第29-31页
        3.2.1 不同种属CD154遗传演化分析第29页
        3.2.2 融合蛋白的构建模式、克隆与鉴定第29-30页
        3.2.3 IFA分析融合蛋白的表达第30-31页
        3.2.4 融合蛋白分泌表达的情况第31页
    3.3 讨论第31-32页
第四章 传染性法氏囊病强弱毒在体外原代B细胞上的复制差异分析第32-38页
    4.1 材料和方法第32-34页
        4.1.1 毒株,SPF鸡胚及SPF鸡第32页
        4.1.2 主要试剂、耗材和仪器第32-33页
        4.1.3 鸡原代B细胞的培养第33页
        4.1.4 TCID_(50)的滴定第33页
        4.1.5 ELD_(50)的滴定第33页
        4.1.6 荧光定量分析第33-34页
        4.1.7 WESTERN BLOT分析第34页
    4.2 结果第34-37页
        4.2.1 IBDV GT株感染B细胞后不同时间点TCID_(50_第34-35页
        4.2.2 IBDV GX株感染B细胞后不同时间点ELD_(50)第35页
        4.2.3 WESTERN BLOT结果第35-36页
        4.2.4 IBDV强弱毒在B细胞上的复制曲线第36-37页
    4.3 讨论第37-38页
第五章 全文结论第38-39页
参考文献第39-45页
致谢第45-46页
作者简历第46页

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