摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 IBDV流行病学 | 第13-14页 |
1.2 IBD临床症状和病变 | 第14页 |
1.3 IBDV病原学 | 第14-16页 |
1.3.1 IBDV形态结构 | 第14页 |
1.3.2 IBDV的基因组 | 第14-15页 |
1.3.3 IBDV的编码蛋白 | 第15-16页 |
1.4 IBDV强弱毒的细胞嗜性 | 第16-18页 |
1.4.1 IBDV的靶细胞 | 第16-17页 |
1.4.2 IBDV强弱毒间细胞嗜性的差异 | 第17-18页 |
1.5 IBDV与细胞凋亡 | 第18页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 传染性法氏囊病强弱毒体内的感染性差异 | 第19-27页 |
2.1 材料和方法 | 第19-21页 |
2.1.1 毒株和细胞 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第19页 |
2.1.3 SPF鸡感染实验 | 第19页 |
2.1.4 SPF鸡致死率的测定 | 第19-20页 |
2.1.5 强弱毒感染的组织病理分析 | 第20页 |
2.1.6 强弱毒感染的组织电镜分析 | 第20页 |
2.1.7 强弱毒感染后靶细胞的活性分析 | 第20-21页 |
2.1.7.1 鸡B细胞分离 | 第20页 |
2.1.7.2 鸡B细胞活性检测 | 第20-21页 |
2.1.8 强弱毒感染后靶细胞的凋亡及坏死检测 | 第21页 |
2.2 实验结果 | 第21-25页 |
2.2.1 感染强弱毒SPF鸡死亡曲线 | 第21-22页 |
2.2.2 感染强弱毒SPF鸡免疫器官病理变化 | 第22页 |
2.2.3 感染强弱毒SPF鸡电镜分析结果 | 第22-23页 |
2.2.4 强弱毒感染后靶细胞的细胞活性检测结果 | 第23-24页 |
2.2.5 强弱毒感染后靶细胞的凋亡及坏死检测结果 | 第24-25页 |
2.3 讨论 | 第25-27页 |
第三章 鸡源CD154分子功能区的分泌表达 | 第27-32页 |
3.1 材料与方法 | 第27-29页 |
3.1.1 鸡和小鼠组织细胞RNA的提取及CDNA的合成 | 第27页 |
3.1.2 鸡CD154 ORF的扩增及不同种属CD154的遗传演化分析 | 第27页 |
3.1.3 融合蛋白表达载体的构建 | 第27-28页 |
3.1.4 融合蛋白表达载体的鉴定 | 第28页 |
3.1.5 融合蛋白表达载体的转染 | 第28页 |
3.1.6 间接免疫荧光试验(IFA)鉴定融合蛋白的表达 | 第28-29页 |
3.1.7 WESTERN BLOT (WB) 鉴定融合蛋白的表达 | 第29页 |
3.2 实验结果 | 第29-31页 |
3.2.1 不同种属CD154遗传演化分析 | 第29页 |
3.2.2 融合蛋白的构建模式、克隆与鉴定 | 第29-30页 |
3.2.3 IFA分析融合蛋白的表达 | 第30-31页 |
3.2.4 融合蛋白分泌表达的情况 | 第31页 |
3.3 讨论 | 第31-32页 |
第四章 传染性法氏囊病强弱毒在体外原代B细胞上的复制差异分析 | 第32-38页 |
4.1 材料和方法 | 第32-34页 |
4.1.1 毒株,SPF鸡胚及SPF鸡 | 第32页 |
4.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第32-33页 |
4.1.3 鸡原代B细胞的培养 | 第33页 |
4.1.4 TCID_(50)的滴定 | 第33页 |
4.1.5 ELD_(50)的滴定 | 第33页 |
4.1.6 荧光定量分析 | 第33-34页 |
4.1.7 WESTERN BLOT分析 | 第34页 |
4.2 结果 | 第34-37页 |
4.2.1 IBDV GT株感染B细胞后不同时间点TCID_(50_ | 第34-35页 |
4.2.2 IBDV GX株感染B细胞后不同时间点ELD_(50) | 第35页 |
4.2.3 WESTERN BLOT结果 | 第35-36页 |
4.2.4 IBDV强弱毒在B细胞上的复制曲线 | 第36-37页 |
4.3 讨论 | 第37-38页 |
第五章 全文结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简历 | 第46页 |