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曼氏无针乌贼神经肽LFRFamide和GnRH的基因克隆及表达定位分析

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 文献综述第15-25页
    1.1 前言第15页
    1.2 头足类神经肽研究进展第15-21页
        1.2.1 GnRH第15-17页
        1.2.2 FMRFamide类第17-19页
        1.2.3 LFRFamide类第19页
        1.2.4 APGWamide类第19-20页
        1.2.5 VYSAPYG第20-21页
        1.2.6 sCAP第21页
        1.2.7 Tachykinins第21页
    1.3 头足类神经肽GnRH和FMRFamide受体相关研究进展第21-23页
        1.3.1 GnRH受体第22页
        1.3.2 FMRFamide受体第22-23页
    1.4 本研究的目的与意义第23-25页
        1.4.1 目的与意义第23-24页
        1.4.2 展望第24-25页
第二章 曼氏无针乌贼神经肽LFRFamide基因克隆和表达分析第25-51页
    第一节 曼氏无针乌贼神经肽LFRFamide基因克隆和序列分析第25-40页
        2.1.1 材料方法第25-34页
            2.1.1.1 实验材料第25-27页
            2.1.1.2 脑组织总RNA的提取第27页
            2.1.1.3 cDNA第一条链合成第27-28页
            2.1.1.4 引物设计第28-29页
            2.1.1.5 LFRFamide基因核心片段PCR扩增第29-30页
            2.1.1.6 LFRFamide基因 3’端RACE扩增第30-31页
            2.1.1.7 LFRFamide基因 5’端RACE扩增第31-34页
        2.1.2 结果与分析第34-39页
            2.1.2.1 RNA提取结果第34页
            2.1.2.2 PCR扩增结果第34页
            2.1.2.3 LFRFamide基因cDNA全长序列的分析第34-36页
            2.1.2.4 LFRFamide基因氨基酸序列同源比对及系统进化分析第36-39页
        2.1.3 讨论第39-40页
    第二节 曼氏无针乌贼神经肽LFRFamide表达组织特异性分析第40-43页
        2.2.1 材料方法第40-42页
            2.2.1.1 实验材料第40页
            2.2.1.2 不同组织总RNA提取第40页
            2.2.1.3 cDNA模板合成第40-41页
            2.2.1.4 引物设计第41页
            2.2.1.5 荧光定量PCR第41-42页
            2.2.1.6 数据处理第42页
        2.2.2 结果与分析第42-43页
        2.2.3 讨论第43页
    第三节 曼氏无针乌贼神经肽LFRFamide脑组织表达定位分析第43-51页
        2.3.1 材料方法第43-48页
            2.3.1.1 实验材料第43-45页
            2.3.1.2 引物设计第45页
            2.3.1.3 脑组织切片第45页
            2.3.1.4 原位杂交第45-48页
        2.3.2 结果与分析第48-50页
        2.3.3 讨论第50-51页
第三章 曼氏无针乌贼神经肽GnRH基因克隆和表达分析第51-65页
    第一节 曼氏无针乌贼神经肽GnRH基因克隆和序列分析第51-59页
        3.1.1 材料方法第51-55页
            3.1.1.1 材料第51页
            3.1.1.2 引物设计第51-52页
            3.1.1.3 GnRH基因核心片段PCR扩增第52页
            3.1.1.4 GnRH基因 3’端RACE扩增第52-53页
            3.1.1.5 GnRH的 5’RACE扩增第53-54页
            3.1.1.6 GnRH cDNA序列分析第54-55页
        3.1.2 结果与分析第55-58页
            3.1.2.1 PCR扩增结果第55页
            3.1.2.2 曼氏无针乌贼GnRH基因全长序列的分析第55-56页
            3.1.2.3 曼氏无针乌贼GnRH基因序列比对及同源建树第56-58页
        3.1.3 讨论第58-59页
    第二节 曼氏无针乌贼神经肽GnRH表达组织特异性分析第59-62页
        3.2.1 材料方法第59-60页
            3.2.1.1 实验材料第59页
            3.2.1.2 引物设计第59页
            3.2.1.3 荧光定量PCR第59-60页
            3.2.1.4 数据处理第60页
        3.2.2 结果与分析第60-61页
        3.2.3 讨论第61-62页
    第三节 曼氏无针乌贼神经肽GnRH脑组织表达定位分析第62-65页
        3.3.1 材料方法第62-63页
            3.3.1.1 实验材料第62页
            3.3.1.2 引物设计第62页
            3.3.1.3 原位杂交第62-63页
        3.3.2 结果与分析第63页
        3.3.3 讨论第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-73页
致谢第73-74页
在读期间发表的学术论文及研究成果第74页

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