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乌克兰鱗鲤PK、PEPCK基因的克隆及其对不同糖水平的应答

中文摘要第11-12页
英文摘要第12-13页
第一章 文献综述第14-24页
    第一节 研究背景第14-23页
        1 鱼类对饲料糖的利用能力第14-15页
        2 鱼类体内糖代谢的调节第15-20页
            2.1 胰岛素的调节第15页
            2.2 糖代谢酶的调节第15-20页
        3 乌克兰鳞鲤研究进展第20-21页
        4 RACE技术简介第21-22页
            4.1 3’RACE技术原理第21页
            4.2 5’RACE技术原理第21-22页
            4.3 RACE技术在水产动物研究中的应用第22页
        5 降落PCR技术简介第22-23页
    第二节 研究的目的与意义第23页
    第三节 主要试验内容第23-24页
第二章 乌克兰鳞鲤PK基因的克隆及序列分析第24-44页
    第一节 材料和方法第24-36页
        1 试验鱼的暂养第24页
        2 克隆载体与宿主细菌第24页
        3 主要试剂和试剂盒第24-25页
        4 主要试验仪器第25页
        5 引物设计第25-26页
        6 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备第26-27页
        7 第一链cDNA的合成第27页
        8 PCR扩增PK基因中间片段第27-28页
        9 3’RACE PCR第28-29页
        10 5’RACE PCR第29-31页
        11 琼脂糖电泳检测PCR扩增结果第31页
        12 回收纯化PCR产物第31-32页
        13 感受态细胞的制备第32页
        14 T-A克隆第32页
        15 感受态细胞的转化第32-33页
        16 菌液PCR方法筛选阳性克隆第33-35页
        17 序列分析第35-36页
    第二节 结果与分析第36-42页
        1 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备第36页
        2 乌克兰鳞鲤 PK 基因的克隆与测序结果第36-42页
    第三节 讨论第42-44页
        1 PCR方法的选择第42页
        2 乌克兰鳞鲤 PK 基因序列的分析第42-44页
第三章 乌克兰鳞鲤PEPCK基因的克隆及序列分析第44-59页
    第一节 材料和方法第44-52页
        1 试验鱼的暂养第44页
        2 克隆载体与宿主细菌第44页
        3 主要试剂和试剂盒第44页
        4 主要试验仪器第44-45页
        5 引物设计第45页
        6 制备乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA第45页
        7 合成第一链 cDNA第45页
        8 PCR扩增PEPCK基因中间片段第45-46页
        9 3’RACE PCR第46-47页
        10 5’RACE PCR第47-48页
        11 琼脂糖电泳检测PCR扩增结果第48页
        12 回收纯化PCR产物、T-A克隆、转化感受态细胞第48页
        13 菌液PCR方法筛选阳性克隆第48-50页
        14 序列分析第50-52页
    第二节 结果与分析第52-57页
        1 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备第52页
        2 乌克兰鳞鲤 PEPCK 基因的克隆与测序结果第52-57页
    第三节 讨论第57-59页
        1 PCR方法的选择第57页
        2 乌克兰鳞鲤 PEPCK 基因序列的分析第57-59页
第四章 不同营养水平下乌克兰鳞鲤各组织PK、PEPCK基因的差异性表达的分析第59-65页
    第一节 材料和方法第59-63页
        1 试验鱼的暂养第59页
        2 主要试剂和试剂盒第59页
        3 主要试验仪器第59页
        4 引物设计第59-60页
        5 饲养和取样第60页
        6 制备乌克兰鳞鲤各组织总 RNA第60页
        7 合成乌克兰鳞鲤各组织第一链 cDNA第60页
        8 PCR 确定低糖组、高糖组和禁食组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达第60-63页
    第二节 结果与分析第63-64页
        1 禁食组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平第63页
        2 低糖组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平第63页
        3 高糖组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平第63-64页
    第三节 讨论第64-65页
第五章 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
攻读硕士学位期间发表文章情况第75页

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