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麦长管蚜气味结合蛋白的结合特性及组织定位

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 前言第15-47页
   ·麦长管蚜的研究概况第16-19页
     ·麦长管蚜的生物习性第16-17页
     ·麦长管蚜的生态习性及种群动态第17-19页
     ·麦长管蚜的化学防治研究第19页
   ·寄主小麦的研究概况第19-22页
     ·寄主小麦抗性研究第19-20页
     ·寄主小麦挥发物的研究第20-22页
   ·昆虫的嗅觉行为第22-29页
     ·触角电位技术与蚜虫嗅觉第23-25页
     ·蚜虫的寄主选择行为第25-27页
     ·蚜虫的嗅觉感器研究第27-29页
   ·昆虫在发现寄主过程中的策略第29-33页
     ·蚜虫视觉识别与发现寄主策略第29-30页
     ·昆虫嗅觉识别与发现寄主策略第30-31页
     ·蚜虫天敌嗅觉识别与发现寄主策略第31页
     ·蚜虫告警信息素研究第31-33页
   ·昆虫嗅觉的化学感受研究第33-44页
     ·气味结合蛋白的一般特征第34页
     ·气味结合蛋白的生理功能第34-35页
     ·气味结合蛋白与化学感受蛋白第35-36页
     ·气味结合蛋白的最新结构研究第36-39页
     ·气味结合蛋白基因功能的新发现第39页
     ·半翅目昆虫的气味结合蛋白研究第39-41页
     ·荧光结合实验与实时荧光定量 PCR 研究第41-42页
     ·昆虫受体及信号转导第42-44页
   ·研究依据及目的和意义第44-47页
     ·研究依据第45页
     ·研究目的第45-46页
     ·研究意义第46-47页
第二章 麦长管蚜 9 种气味结合蛋白基因的克隆与序列分析第47-78页
   ·材料和方法第47-53页
     ·试验样本第47页
     ·所用试剂第47-48页
     ·仪器第48页
     ·样本 RNA 提取第48-49页
     ·反转录合成 1st 链第49页
     ·简并引物的设计与合成第49-50页
     ·预扩增基因的片段序列扩增及测序第50页
     ·特异引物设计合成第50页
     ·3′RACE 及测序第50-51页
     ·5′RACE 及测序第51-52页
     ·序列拼接及扩增验证第52-53页
   ·结果及分析第53-75页
     ·所提 RNA 的质量第53-54页
     ·分析基因片段序列第54-65页
     ·3′RACE 的序列第65页
     ·5′RACE 的序列第65-66页
     ·功能编码区序列分析第66-75页
   ·小结与讨论第75-78页
     ·发散的基因序列第75-76页
     ·触角组织中的基因表达第76页
     ·典型蛋白结构域的预测第76-77页
     ·进化树分析第77-78页
第三章 麦长管蚜 6 种气味结合蛋白的表达质粒构建、原核表达及纯化第78-97页
   ·材料和方法第78-86页
     ·试验样本第78页
     ·所用试剂第78-79页
     ·仪器第79页
     ·触角 RNA 提取第79-80页
     ·反转录合成 1st 链第80页
     ·引物设计及合成第80-81页
     ·全编码序列基因扩增第81页
     ·回收 PCR 产物第81页
     ·载体连接及转化第81-82页
     ·阳性克隆验证第82页
     ·质粒提取第82页
     ·表达质粒构建第82-83页
     ·密码子分析及表达验证第83页
     ·调控蛋白表达第83-84页
     ·SDS-PAGE 电泳检测第84页
     ·Western blot 验证第84-85页
     ·纯化策略及步骤第85页
     ·后期蛋白处理及浓度测定第85-86页
   ·结果与分析第86-95页
     ·新建质粒的效果评价第86-89页
     ·前期表达策略选择及表达效果评价第89-90页
     ·纯化策略选择及蛋白特性分析第90-91页
     ·标签肽切除效果评价第91-95页
     ·浓度评价第95页
   ·小结与讨论第95-97页
第四章 麦长管蚜 6 种气味结合蛋白的结合特性研究第97-110页
   ·材料和方法第97-100页
     ·蛋白样品第97页
     ·所用试剂第97-99页
     ·仪器第99页
     ·蛋白样品的荧光结合实验第99页
     ·测试气味的选择第99-100页
     ·竞争气味的结合实验第100页
   ·结果与分析第100-107页
     ·气味结合蛋白的饱和荧光效应第100-101页
     ·结合实验测定第101-103页
     ·竞争结合实验测定第103-107页
   ·小结与讨论第107-110页
第五章 麦长管蚜 3 种气味结合蛋白基因组织表达定位分析第110-118页
   ·材料和方法第110-113页
     ·各组织样品第110页
     ·所用试剂第110页
     ·仪器第110-111页
     ·RNA 提取第111页
     ·反转录合成 cDNA 第 1st 链第111页
     ·扩增引物及 Taqman 荧光探针引物设计合成第111-112页
     ·荧光定量 PCR 扩增第112页
     ·荧光定量 PCR 的优化第112-113页
     ·数据分析第113页
   ·结果与分析第113-117页
     ·RNA 的提取与 cDNA 的合成第113页
     ·荧光探针及其配套引物的优化第113页
     ·3种气味结合蛋白的组织分布及相对表达含量第113-115页
     ·3种气味结合蛋白在不同发育期蚜虫中的相对表达含量第115-117页
   ·小结与讨论第117-118页
第六章 全文结论第118-119页
参考文献第119-136页
致谢第136-138页
作者简历第138页

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