| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 生物素AP-tag技术概述 | 第10-11页 |
| 1.2 生物素连接酶BirA的简介 | 第11-13页 |
| 1.2.1 生物素简介 | 第11-12页 |
| 1.2.2 生物素连接酶BirA概述 | 第12页 |
| 1.2.3 BirA酶的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.4 BirA酶的功能 | 第13页 |
| 1.3 链霉亲和素简介 | 第13-14页 |
| 1.4 转录因子FOXM1的概述 | 第14-17页 |
| 1.4.1 转录因子FOXM1的结构 | 第14页 |
| 1.4.2 转录因子FOXM1的功能 | 第14-17页 |
| 1.5 β-catenin的概述 | 第17页 |
| 1.6 FOXM1蛋白互作概述 | 第17-18页 |
| 1.7 研究目的、内容与意义 | 第18-21页 |
| 第2章 生物素化FOXM1真核表达体系的构建 | 第21-36页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第21-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.3.1 BirA酶重组表达质粒的构建 | 第23-29页 |
| 2.3.2 生物素化FOXM1重组表达质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.4 结果与分析 | 第32-35页 |
| 2.4.1 pcDNA-BirA重组表达载体的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| 2.4.2 pcDNA-AP-FOXM1重组表达载体的构建及鉴定 | 第33-35页 |
| 2.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 第3章 AP-FOXM1的生物素化和纯化 | 第36-47页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第36-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-43页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第38-39页 |
| 3.3.2 质粒共转染实验 | 第39页 |
| 3.3.3 蛋白免疫印迹法(Western Blot) | 第39-42页 |
| 3.3.4 蛋白纯化 | 第42页 |
| 3.3.5 硝酸银染色 | 第42-43页 |
| 3.4 结果与分析 | 第43-46页 |
| 3.4.1 重组质粒在真核细胞中的表达及生物素化 | 第43-44页 |
| 3.4.2 生物素化的AP-FOXM1一步纯化 | 第44-45页 |
| 3.4.3 生物素化的FOXM1硝酸银染色分析 | 第45-46页 |
| 3.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 生物素AP-tagged-FOXM1的蛋白互作初步研究 | 第47-57页 |
| 4.1 前言 | 第47-48页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第48-50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-54页 |
| 4.3.1 pcDNA3.1-AP-FOXM1不同片段长度重组质粒的构建与鉴定 | 第50-53页 |
| 4.3.2 质粒共转染实验 | 第53页 |
| 4.3.3 蛋白免疫印迹法(Western Blot) | 第53-54页 |
| 4.3.4 蛋白纯化 | 第54页 |
| 4.4 结果与分析 | 第54-56页 |
| 4.4.1 pcDNA-AP-FOXM1不同片段长度重组表达载体的构建及鉴定 | 第54页 |
| 4.4.2 基于生物素AP-tag技术的FOXM1的互作蛋白检测 | 第54-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 总结与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录A 英文缩写 | 第65-66页 |
| 附录B 常用缓冲液和试剂配方 | 第66-67页 |
| 附录C 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
