中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第12-16页 |
第一章 NRP2 mAb的制备、纯化及鉴定 | 第16-26页 |
一、材料和方法 | 第16-24页 |
1 材料 | 第16-21页 |
1.1 细胞株和实验动物 | 第16页 |
1.2 主要试剂和耗材 | 第16-17页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第17页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第17-21页 |
2 方法 | 第21-24页 |
2.1 杂交瘤细胞的培养 | 第21页 |
2.2 抗体的生产 | 第21页 |
2.3 抗体的纯化 | 第21-22页 |
2.4 抗体的透析和冻干 | 第22-23页 |
2.5 抗体纯度和浓度的鉴定 | 第23页 |
2.6 抗体滴度的鉴定 | 第23-24页 |
二、结果与分析 | 第24-25页 |
1 抗体纯度及浓度的测定 | 第24页 |
2 抗体滴度的测定 | 第24-25页 |
三、讨论 | 第25-26页 |
第二章 NRP2在结肠癌中的表达 | 第26-38页 |
一、材料和方法 | 第26-33页 |
1 材料 | 第26-29页 |
1.1 细胞株 | 第26页 |
1.2 组织样本资料 | 第26页 |
1.3 主要试剂和耗材 | 第26-27页 |
1.4 主要仪器和设备 | 第27页 |
1.5 主要溶液的配制 | 第27-29页 |
2 方法 | 第29-33页 |
2.1 流式细胞术 | 第29页 |
2.2 Western Blotting | 第29-31页 |
2.3 细胞免疫荧光染色 | 第31-32页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第32-33页 |
二、结果与分析 | 第33-37页 |
1 流式细胞术 | 第33页 |
2 Western blotting | 第33-34页 |
3 细胞免疫荧光染色 | 第34-35页 |
4 免疫组织化学染色 | 第35-37页 |
三、讨论 | 第37-38页 |
第三章 抗NRP-2 mAb对结肠癌细胞的抗肿瘤活性 | 第38-47页 |
一、材料和方法 | 第38-40页 |
1 材料 | 第38-39页 |
1.1 细胞株 | 第38页 |
1.2 主要试剂 | 第38页 |
1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第39页 |
2 方法 | 第39-40页 |
2.1 流式细胞术测凋亡 | 第39页 |
2.2 CCK-8实验 | 第39-40页 |
2.3 Transwell检测 | 第40页 |
二、结果与分析 | 第40-46页 |
1 NRP-2 mAb抑制细胞增殖 | 第40-42页 |
1.1 细胞形态变化 | 第40-41页 |
1.2 CCK8法 | 第41-42页 |
2 NRP-2 mAb促进细胞凋亡 | 第42-43页 |
2.1 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
3 NRP-2 mAb抑制细胞迁移、侵袭 | 第43-46页 |
3.1 Transwell检测NRP-2 mAb对细胞迁移的影响 | 第43-44页 |
3.2 Transwell检测NRP-2 mAb对细胞侵袭的影响 | 第44-46页 |
三、讨论 | 第46-47页 |
第四章 NRP-2 mAb对结肠癌细胞的抗肿瘤机制 | 第47-52页 |
一、材料和方法 | 第47-48页 |
1 材料 | 第47页 |
1.1 细胞株 | 第47页 |
1.2 主要试剂和耗材 | 第47页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第47页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第47页 |
2 方法 | 第47-48页 |
二、结果与分析 | 第48-49页 |
1 凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3、Bax的表达 | 第48页 |
2 增殖相关蛋白PI3K、p-Akt、p-ERK的表达 | 第48-49页 |
三、讨论 | 第49-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
综述 Neuropilin-2在结肠癌中的研究进展 | 第56-62页 |
参考文献 | 第58-62页 |
致谢 | 第62页 |