中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
引言 | 第11-14页 |
第一部分 FAM45A的亚细胞定位 | 第14-28页 |
1 实验材料 | 第14-17页 |
1.1 细胞株 | 第14页 |
1.2 实验仪器 | 第14-15页 |
1.3 主要试剂 | 第15-17页 |
1.4 溶液配制 | 第17页 |
2 实验方法 | 第17-19页 |
2.1 细胞培养 | 第17-18页 |
2.2 分子克隆 | 第18页 |
2.3 细胞转染 | 第18-19页 |
2.4 免疫荧光IF | 第19页 |
3 结果 | 第19-26页 |
3.1 Citrine-FAM45A的亚细胞定位 | 第20-23页 |
3.2 内源性FAM45A的亚细胞定位 | 第23-24页 |
3.3 囊泡变大后FAM45A的定位 | 第24-26页 |
4 结论 | 第26-27页 |
讨论 | 第27-28页 |
第二部分 FAM45A在细胞内囊泡转运通路中的功能 | 第28-40页 |
1 实验材料 | 第28-30页 |
1.1 细胞株 | 第28页 |
1.2 实验仪器 | 第28页 |
1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
1.4 试剂配制 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-34页 |
2.1 细胞培养 | 第30页 |
2.2 构建稳转FAM45A基因沉默细胞系 | 第30-31页 |
2.3 q-PCR | 第31-32页 |
2.4 Western blotting | 第32-34页 |
2.5 Lysotracker染料观察溶酶体变化 | 第34页 |
3 结果 | 第34-38页 |
3.1 稳转FAM45A基因沉默细胞系鉴定 | 第34-35页 |
3.2 FAM45A基因沉默细胞系的细胞器形态 | 第35-37页 |
3.3 FAM45A基因沉默细胞系中的EGFR降解速度 | 第37-38页 |
4 结论 | 第38页 |
讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
综述 | 第43-53页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录 英文缩略词表 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |