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杂环芳香化合物降解菌群与降解基因克隆方法研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第13-29页
    1.1 微生物分子生态学概述第13-21页
        1.1.1 微生物分子生态学研究策略第13-14页
        1.1.2 微生物生态学主要研究技术第14-21页
            1.1.2.1 克隆文库技术第14-17页
            1.1.2.2 遗传指纹图谱第17-19页
            1.1.2.3 分子杂交技术第19-20页
            1.1.2.4 实时定量PCR第20-21页
    1.2 杂环芳香化合物降解菌群研究概况第21-28页
        1.2.1 工业废水中的主要杂环芳香化合物第21-22页
        1.2.2 杂环芳香化合物生物降解第22-24页
            1.2.2.1 芳香族化合物生物降解第22-23页
            1.2.2.2 含氮杂环化合物生物降解机理第23-24页
        1.2.3 杂环芳香族化合物降解菌群研究第24-28页
            1.2.3.1 微生物群落结构的研究第24-25页
            1.2.3.2 杂环芳香化合物降解主要功能菌群的研究第25-26页
            1.2.3.3 杂环芳香化合物降解相关基因的研究第26-28页
    1.3 研究目的第28-29页
第二章 吲哚驯化的反硝化及厌氧反应器的微生物群落第29-49页
    2.1 引言第29-30页
    2.2 材料与方法第30-34页
        2.2.1 反应装置及样品采集第30页
        2.2.2 样品预处理和DNA 提取第30-31页
            2.2.2.1 样品预处理第30-31页
            2.2.2.2 DNA 的提取第31页
        2.2.3 16S rDNA 全长扩增和克隆文库构建第31-32页
        2.2.4 测序及序列分析第32页
        2.2.5 核酸序列登录号(Accession number)第32-33页
        2.2.6 16S rRNA 基因 V3 区PCR 扩增及变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第33页
        2.2.7 文库中的克隆回对DGGE 条带第33-34页
    2.3 实验结果第34-44页
        2.3.1 反应器运行状况第34页
        2.3.2 16S rDNA 基因文库的有效性第34-35页
        2.3.3 三个克隆文库的差异度第35-36页
        2.3.4 克隆文库的序列分析第36-40页
            2.3.4.1 三个文库的在纲水平的系统发育学分析第36-37页
            2.3.4.2 反硝化反应器16S rDNA 基因克隆文库的组成分析第37-39页
            2.3.4.3 厌氧反应器16S rDNA 基因克隆文库的组成分析第39-40页
        2.3.5 PCR-DGGE 指纹图谱分析第40-42页
        2.3.6 喹啉与吲哚驯化的反硝化反应器文库的比较第42-44页
    2.4 讨论第44-49页
第三章 启动子捕获质粒系统的构建第49-66页
    3.1 引言第49页
    3.2 实验原理第49-51页
    3.3 实验材料第51-52页
    3.4 实验思路第52-53页
    3.5 实验方法及结果第53-65页
        3.5.1 基本实验操作第53-55页
            3.5.1.1 DNA 提取第53页
            3.5.1.2 PCR第53-54页
            3.5.1.3 限制性内切酶酶切第54页
            3.5.1.4 连接第54页
            3.5.1.5 去磷酸化第54-55页
        3.5.2 实验流程及结果第55-65页
            3.5.2.1 替换质粒pZ524-LG 的复制起始区及去除自带启动子第55-59页
            3.5.2.2 p15A-LG 质粒加上BamHI 酶切识别位点第59-62页
            3.5.2.3 致死率测定第62-63页
            3.5.2.4 插入环境微生物DNA 片段第63-65页
            3.5.2.5 筛选含可诱导启动子的克隆第65页
    3.6 小结第65-66页
参考文献第66-89页
附录1 溶液试剂及培养基的配制第89-94页
附录2 实验中所用的仪器设备第94-95页
致谢第95-96页
研究生阶段发表的论文第96页

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