| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一章 探讨NSCLC放射敏感性与EGFR基因突变的相关性及可能的机制 | 第20-58页 |
| 1.引言 | 第20-21页 |
| 2.实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1 细胞株 | 第21-22页 |
| 2.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.3 主要试剂与药品 | 第23-25页 |
| 2.4 培养基和相关溶液配制 | 第25-26页 |
| 3.实验方法 | 第26-37页 |
| 3.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 3.2 细胞复苏 | 第27页 |
| 3.3 细胞传代 | 第27-28页 |
| 3.4 细胞计数 | 第28页 |
| 3.5 细胞冻存 | 第28页 |
| 3.6 细胞克隆形成实验检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞个体增殖能力 | 第28-30页 |
| 3.7 绘制细胞生长曲线检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞群体增殖能力 | 第30-31页 |
| 3.8 流式细胞术检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞细胞周期分布情况 | 第31-32页 |
| 3.9 流式细胞术检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞细胞凋亡率 | 第32-33页 |
| 3.10 免疫突光法γ-H2AX焦点形成实验检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞DSBs形成及修复情况 | 第33-34页 |
| 3.11 蛋白免疫印迹法检测检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞蛋白表达 | 第34-36页 |
| 3.12 统计学处理 | 第36-37页 |
| 4.实验结果 | 第37-53页 |
| 4.1 克隆成型实验显示EGFR突变型细胞比EGFR野生型细胞对放射线敏感 | 第37-40页 |
| 4.2 绘制细胞生长曲线显示EGFR突变型细胞的放射线照射后群体增殖能力低 | 第40-43页 |
| 4.3 流式细胞术检测细胞周期分布情况显示EGFR野生型细胞放射线照射后出现G0/G1期增加 | 第43-46页 |
| 4.4 流式细胞术检测细胞凋亡情况显示EGFR突变型细胞放射线照射后出现凋亡率增加 | 第46-47页 |
| 4.5 免疫荧光法检测γ-H2AX焦点形成显示EGFR突变型细胞在放射线照射后修复能力减弱 | 第47-49页 |
| 4.6 Western-Blot法检测放射线照射后凋亡以及修复蛋白表达显示EGFR突变型细胞在放射线照射后凋亡蛋白表达增加，抗凋亡蛋白、修复蛋白表达减少。 | 第49-53页 |
| 5.小结 | 第53页 |
| 6.讨论 | 第53-58页 |
| 第二章 探讨放射线对EGFR-TKIs获得性耐药NSCLC细胞药物敏感性的作用 | 第58-78页 |
| 1.引言 | 第58-59页 |
| 2.实验材料 | 第59-63页 |
| 2.1 细胞株 | 第59页 |
| 2.2 实验仪器 | 第59-60页 |
| 2.3 主要试剂与药品 | 第60-61页 |
| 2.4 培养基和相关溶液配制 | 第61-63页 |
| 3 实验方法 | 第63-69页 |
| 3.1 细胞培养 | 第63页 |
| 3.2 细胞复苏 | 第63页 |
| 3.3 细胞传代 | 第63-64页 |
| 3.4 细胞计数 | 第64页 |
| 3.5 细胞冻存 | 第64-65页 |
| 3.6 培养放射线照射后细胞株PC-9/AB IR和PC-9/ZD IR | 第65页 |
| 3.7 CCK8法测细胞株对于gefitinib的药物敏感性 | 第65-66页 |
| 3.8 NGS法测细胞株基因突变情况 | 第66-67页 |
| 3.9 蛋白免疫印迹法检测检测放射线照射后不同EGFR基因突变状态NSCLC细胞蛋白表达 | 第67-69页 |
| 3.10 统计学处理 | 第69页 |
| 4 实验结果 | 第69-73页 |
| 4.1 PC-9/AB、PC-9/ZD、PC-9/AB IR、PC-9/ZD IR形态观察 | 第69-70页 |
| 4.2 CCK8法检测PC-9、PC-9/AB、PC-9/ZD、PC-9/AB IR、PC-9/ZD IR对gefitinib的药物敏感性 | 第70-71页 |
| 4.3 NGS法检测PC-9/AB、PC-9/ZD、PC-9/AB IR、PC-9/ZD IR基因突变情况 | 第71-73页 |
| 4.4 western-blot法检测PC-9/AB、PC-9/ZD、PC-9/AB IR、PC-9/ZD IR基因突变情况 | 第73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 6 讨论 | 第74-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 本课题不足之处 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 综述 | 第90-103页 |
| 参考文献 | 第96-103页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
