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丹参SmSnRK2s基因和SmAREB1基因的克隆及功能分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第14-25页
    1.1 丹参概述第14页
        1.1.1 丹参的形态特征第14页
        1.1.2 丹参的化学成分第14页
        1.1.3 丹参的药理作用研究第14页
    1.2 丹参酚酸类成分生源途径与调控研究第14-18页
        1.2.1 酚酸类成分生源途径研究进展第14-16页
        1.2.2 丹参酚酸类成分合成调控的研究进展第16-18页
    1.3 逆境对丹参生长发育及酚酸类物质积累的影响第18-19页
    1.4 ABA在生物胁迫中所起作用第19-23页
        1.4.1 SnRK2s蛋白激酶的研究进展第20-22页
        1.4.2 AREB/ABFs转录因子的研究进展第22-23页
    1.5 本研究的目的意义第23-25页
第二章 丹参SmSnRK2.4 基因的克隆和分析第25-46页
    2.1 材料第25-30页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 菌株和载体第25页
        2.1.3 工具酶及主要试剂盒第25页
        2.1.4 主要仪器第25-26页
        2.1.5 主要试剂和培养基的配制第26-29页
        2.1.6 引物第29-30页
    2.2 方法第30-36页
        2.2.1 植物材料获得方法第30页
        2.2.2 核酸分子操作方法第30-33页
        2.2.3 生物信息学分析第33页
        2.2.4 原核表达分析第33-36页
        2.2.5 基因启动子序列分析第36页
    2.3 结果与分析第36-44页
        2.3.1 SmSnRK2.4 基因全长cDNA和基因组DNA序列的获得第36-37页
        2.3.2 SmSnRK2.4 基因的生物信息学分析第37-42页
        2.3.3 SmSnRK2.4 蛋白的原核表达第42页
        2.3.4 SmSnRK2.4 启动子分析第42-43页
        2.3.5 SmSnRK2.4 的表达分析第43-44页
    2.4 讨论和小结第44-46页
第三章 丹参SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的克隆和功能分析第46-82页
    3.1 材料第46-50页
        3.1.1 植物材料第46页
        3.1.2 菌株和载体第46-47页
        3.1.3 主要仪器第47页
        3.1.4 常用酶和试剂第47-50页
        3.1.5 引物第50页
    3.2 方法第50-62页
        3.2.1 植物材料获得方法第50-51页
        3.2.2 核酸分子操作方法第51页
        3.2.3 生物信息学分析第51-52页
        3.2.4 亚细胞定位分析第52-54页
        3.2.5 原核表达分析第54-57页
        3.2.6 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的LC-MS/MS分析第57页
        3.2.7 基因启动子的克隆及分析第57-60页
        3.2.8 基因过表达分析第60-62页
    3.3 结果与分析第62-79页
        3.3.1 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因cDNA和DNA序列的获得第62-63页
        3.3.2 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的生物信息学分析第63-70页
        3.3.3 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因在丹参中的表达特性第70-72页
        3.3.4 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的亚细胞定位第72页
        3.3.5 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的原核表达分析第72-75页
        3.3.6 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的LC-MS/MS分析第75页
        3.3.7 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的启动子分析第75-77页
        3.3.8 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的过表达分析第77-79页
    3.4 讨论与小结第79-82页
        3.4.1 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 属于第III亚族SnRK2s蛋白激酶第79-80页
        3.4.2 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 的亚细胞定位分析第80页
        3.4.3 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 参与ABA和渗透胁迫响应第80-81页
        3.4.4 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 对丹参酚酸类物质积累的影响第81-82页
第四章 丹参SmAREB1基因的克隆和功能分析第82-98页
    4.1 材料第82-83页
        4.1.1 植物材料第82页
        4.1.2 菌株和载体第82页
        4.1.3 主要仪器第82页
        4.1.4 常用酶和试剂第82-83页
        4.1.5 引物第83页
    4.2 方法第83-86页
        4.2.1 植物材料获得方法第83页
        4.2.2 核酸分子操作方法第83-84页
        4.2.3 生物信息学分析第84页
        4.2.4 转录激活实验分析第84-85页
        4.2.5 亚细胞定位分析第85-86页
        4.2.6 原核表达分析第86页
        4.2.7 基因的启动子克隆及分析第86页
        4.2.8 基因过表达分析第86页
    4.3 结果与分析第86-96页
        4.3.1 SmAREB1基因的克隆和生物信息学分析第86-90页
        4.3.2 SmAREB1基因在丹参中的表达特性第90-91页
        4.3.3 SmAREB1基因的亚细胞定位分析第91页
        4.3.4 SmAREB1转录因子的转录激活活性验证第91-92页
        4.3.5 SmAREB1基因的原核表达分析第92-93页
        4.3.6 SmAREB1基因启动子的序列分析及活性分析第93-95页
        4.3.7 SmAREB1基因的过表达分析第95-96页
    4.4 讨论与小结第96-98页
        4.4.1 SmAREB1是典型的bZIP转录因子第96-97页
        4.4.2 SmAREB1可能参与对ABA和非生物胁迫响应第97页
        4.4.3 SmAREB1促进了丹参酚酸类物质合成的积累第97-98页
第五章 丹参SmSnRK2.3/2.6 蛋白与SmAREB1蛋白互作关系的分析第98-104页
    5.1 材料第98-99页
        5.1.1 植物材料第98页
        5.1.2 菌株和载体第98页
        5.1.3 主要设备第98页
        5.1.4 常用酶和试剂第98-99页
        5.1.5 引物第99页
    5.2 实验方法第99-101页
        5.2.1 烟草植株的获得第99页
        5.2.2 酵母双杂交(Y2H)实验分析第99-100页
        5.2.3 双分子荧光互补(BiFC)分析第100-101页
    5.3 结果和分析第101-102页
        5.3.1 Y2H实验结果第101页
        5.3.2 BiFc实验第101-102页
    5.4 讨论与小结第102-104页
第六章 结论与讨论第104-107页
创新点第107页
研究展望第107-108页
参考文献第108-118页
附录第118-121页
致谢第121-123页
作者简介第123页

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