摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-23页 |
2.1 主要试剂 | 第12-13页 |
2.2 主要仪器与设备 | 第13-14页 |
2.3 主要试剂的配制 | 第14-15页 |
2.3.1 PBS缓冲液 | 第14页 |
2.3.2 细胞培养液的制备 | 第14页 |
2.3.3 阿糖胞苷溶液的制备 | 第14页 |
2.3.4 0.4%台盼蓝溶液的配制 | 第14-15页 |
2.3.5 4%多聚甲醛的配制 | 第15页 |
2.3.6 DAB显色工作液 | 第15页 |
2.3.7 5 mg/ml四噻唑兰(MTT)溶液配制 | 第15页 |
2.3.8 不同浓度醋酸铅溶液的配制 | 第15页 |
2.3.9 0.1% DEPC水 | 第15页 |
2.4 实验方法 | 第15-23页 |
2.4.1 新生大鼠皮质神经细胞的原代培养 | 第15-16页 |
2.4.2 免疫组化鉴定大鼠大脑皮质神经细胞 | 第16-17页 |
2.4.3 MTT筛选醋酸铅的适宜作用浓度 | 第17-18页 |
2.4.4 铅致原代培养大鼠皮质神经细胞氧化应激反应 | 第18-20页 |
2.4.5 QRT-PCR检测JWA mRNA在细胞中的表达水平 | 第20-22页 |
2.4.6 统计学分析 | 第22-23页 |
第3章 结果 | 第23-34页 |
3.1 原代培养大鼠皮质神经细胞的形态学观察 | 第23-24页 |
3.2 大鼠皮质神经细胞的免疫组织化学鉴定 | 第24-25页 |
3.3 MTT检测各染铅组皮质神经细胞的存活情况 | 第25-26页 |
3.4 铅暴露对大鼠皮质神经细胞内SOD、MDA、CAT及GSH的影响 | 第26-31页 |
3.4.1 铅暴露对大鼠皮质神经细胞内SOD活力的影响 | 第26-27页 |
3.4.2 铅暴露对大鼠皮质神经细胞内MDA含量的影响 | 第27-28页 |
3.4.3 铅暴露对大脑皮质神经细胞内CAT活力的影响 | 第28-29页 |
3.4.4 铅暴露对大脑皮质神经细胞内GSH含量的影响 | 第29-30页 |
3.4.5 各氧化应激指标与铅剂量的相关性分析 | 第30-31页 |
3.5 铅暴露对大鼠皮质神经细胞JWA mRNA表达的影响 | 第31-33页 |
3.6 JWA mRNA表达水平与氧化应激损伤的相关性分析 | 第33-34页 |
第4章 讨论 | 第34-40页 |
4.1 新生大鼠皮质神经细胞培养及铅损伤模型的建立 | 第34-36页 |
4.1.1 神经细胞取材部位和取材时间的选择 | 第34-35页 |
4.1.2 神经细胞培养基的选择分析 | 第35页 |
4.1.3 影响皮质神经元体外培养成活率的多种因素 | 第35-36页 |
4.1.4 建立铅损伤模型及筛选醋酸铅的适宜作用浓度与作用时间 | 第36页 |
4.2 铅暴露对大鼠皮质神经细胞的氧化应激损伤 | 第36-38页 |
4.3 JWA基因在铅致氧化应激损伤的原代培养大鼠皮质神经细胞中的表达 | 第38-40页 |
第5章 结论与展望 | 第40-41页 |
5.1 结论 | 第40页 |
5.2 展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第46-47页 |
综述 | 第47-56页 |
参考文献 | 第53-56页 |