| 个人简历 | 第3-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第17-39页 |
| 第一节 实验材料 | 第17-22页 |
| 1.1 实验细胞 | 第17页 |
| 1.2 常用试剂 | 第17-18页 |
| 1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 1.4 主要溶剂配制 | 第19-22页 |
| 第二节 实验方法 | 第22-39页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 RNA干扰 | 第23-24页 |
| 2.3 基因过表达 | 第24-25页 |
| 2.4 建立稳转细胞株 | 第25-26页 |
| 2.5 反转录PCR和实时荧光定量PCR | 第26-29页 |
| 2.6 Transwell小室迁移实验 | 第29-30页 |
| 2.7 克隆形成实验 | 第30页 |
| 2.8 蛋白免疫印迹实验 | 第30-32页 |
| 2.9 免疫组化实验 | 第32-35页 |
| 2.10 组织苏木精-伊红染色 | 第35页 |
| 2.11 SRB法检测细胞活性 | 第35-36页 |
| 2.12 细胞周期检测 | 第36-37页 |
| 2.13 细胞凋亡检测 | 第37-38页 |
| 2.14 数据整理以及统计学分析 | 第38-39页 |
| 第二章 实验结果与分析 | 第39-60页 |
| 第一节 FOXD3抑制结肠癌细胞增殖 | 第39-45页 |
| 1.1 FOXD3在结肠癌细胞中低表达 | 第39-40页 |
| 1.2 SiRNA对FOXD3 mRNA和蛋白的抑制作用 | 第40-41页 |
| 1.3 沉默FOXD3促进细胞增殖 | 第41-44页 |
| 1.4 沉默FOXD3加快细胞周期 | 第44-45页 |
| 1.5 本节小结 | 第45页 |
| 第二节 FOXD3促进结肠癌细胞凋亡 | 第45-47页 |
| 2.1 沉默FOXD3抑制细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 2.2 沉默FOXD3抑制Caspase3切割 | 第46-47页 |
| 2.3 本节小结 | 第47页 |
| 第三节 FOXD3抑制结肠癌细胞转移 | 第47-50页 |
| 3.1 沉默FOXD3促进细胞迁移 | 第47-49页 |
| 3.2 沉默FOXD3活化EMT相关信号通路 | 第49-50页 |
| 3.3 本节小结 | 第50页 |
| 第四节 FOXD3抑制EGFR/Ras/Raf/MEK/ERK信号通路 | 第50-55页 |
| 4.1 沉默FOXD3活化EGFR/Ras/Raf/MEK/ERK信号通路 | 第50-51页 |
| 4.2 沉默FOXD3通过EGFR引起MAPK信号通路变化 | 第51-52页 |
| 4.3 细胞恢复实验证明FOXD3抑制MAPK信号通路 | 第52-54页 |
| 4.4 本节小结 | 第54-55页 |
| 第五节 小鼠皮下种植瘤和病人肿瘤组织中FOXD3低 表达 ，EGFR/Ras/Raf/MEK/ERK信号通路蛋白高表达 | 第55-60页 |
| 5.1 小鼠皮下种植瘤实验中抑制FOXD3能 够活化EGFR/Ras/Raf/MEK/ERK信号通路 | 第55-57页 |
| 5.2 病人肿瘤组织中FOXD3低表达，EGFR/Ras/Raf/MEK/ERK信号通路蛋白高表达 | 第57-58页 |
| 5.3 本节小结 | 第58-60页 |
| 第三章 总结与讨论 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 综述 | 第66-87页 |
| 第一节 RAS基因概述 | 第66-68页 |
| 第二节 RAS突变与肿瘤 | 第68-71页 |
| 第三节 RAS作为药物靶点的结构基础 | 第71-72页 |
| 第四节 RAS作为药物靶点的治疗策略 | 第72-80页 |
| 第五节 小结与展望 | 第80-82页 |
| 综述参考文献 | 第82-87页 |
| 附录 缩略语表 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 本课题获得以下国家自然科学基金资助 | 第91-92页 |
| 硕士期间发表SCI文 | 第92页 |
