摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-15页 |
1.1 文献综述 | 第9-13页 |
1.1.1 三色堇花色及花斑研究进展 | 第9-11页 |
1.1.2 酪氨酸脱羧酶基因研究进展 | 第11-13页 |
1.1.3 辅助色素的研究 | 第13页 |
1.2 研究目的与意义 | 第13-14页 |
1.3 研究内容 | 第14页 |
1.4 研究的技术路线 | 第14-15页 |
2 材料与方法 | 第15-30页 |
2.1 实验材料与试剂耗材 | 第15-17页 |
2.1.1 植物材料 | 第15页 |
2.1.2 试剂药品及试剂盒 | 第15-16页 |
2.1.3 实验仪器设备 | 第16页 |
2.1.4 菌种与质粒 | 第16页 |
2.1.5 植物组织培养基 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-30页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2.2 酪氨酸脱羧酶基因的全长克隆 | 第18-19页 |
2.2.3 VwTYDC基因的生物信息学分析 | 第19页 |
2.2.4 三色堇中VwTYDC基因的荧光定量表达 | 第19-21页 |
2.2.5 三色堇中酪胺含量的测定 | 第21-22页 |
2.2.6 花色素吸收峰的变化 | 第22-23页 |
2.2.7 酪胺处理烟草后花色素含量的测定 | 第23页 |
2.2.8 表达载体的构建及鉴定 | 第23-28页 |
2.2.9 农杆菌介导转化烟草 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-53页 |
3.1 三色堇RNA的提取 | 第30页 |
3.2 酪氨酸脱羧酶基因cDNA的全长克隆 | 第30-31页 |
3.3 VwTYDC基因的生物信息学分析 | 第31-43页 |
3.3.1 VwTYDC基因核酸序列分析 | 第31页 |
3.3.2 VwTYDC基因氨基酸序列分析 | 第31-34页 |
3.3.3 VwTYDC基因编码的氨基酸序列理化性质分析 | 第34页 |
3.3.4 VwTYDC基因编码蛋白质一级结构分析 | 第34-36页 |
3.3.5 VwTYDC基因蛋白质二级结构分析预测 | 第36页 |
3.3.6 VwTYDC基因蛋白质三级结构分析预测 | 第36-37页 |
3.3.7 VwTYDC蛋白质亚细胞定位预测 | 第37页 |
3.3.8 VwTYDC激酶磷酸化修饰位点分析 | 第37-38页 |
3.3.9 VwTYDC蛋白质功能与类别预测 | 第38-41页 |
3.3.10 VwTYDC编码氨基酸序列聚类分析 | 第41-43页 |
3.3.11 VwTYDC基因的蛋白结构域分析 | 第43页 |
3.4 不同器官和花期中酪氨酸脱羧酶的表达量 | 第43-45页 |
3.5 酪胺在三色堇花瓣中的含量分析 | 第45-46页 |
3.5.1 酪胺标准曲线的建立 | 第45-46页 |
3.5.2 酪胺含量的差异性分析 | 第46页 |
3.6 酪胺对花色素吸收特性及相关基因表达量的影响 | 第46-52页 |
3.6.1 酪胺对三色堇花色素吸收特性的影响 | 第46-49页 |
3.6.2 酪胺对烟草花色素吸收特性的影响 | 第49-50页 |
3.6.3 酪胺对烟草花色素相关合成基因的影响 | 第50-52页 |
3.7 植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
4 结论 | 第53-54页 |
5 讨论 | 第54-57页 |
5.1 VwTYDC基因的生物信息学特性 | 第54页 |
5.2 VwTYDC基因的表达量与酪胺含量的差异性分析 | 第54页 |
5.3 酪胺可能作为辅助色素影响花色素的吸收特性 | 第54-55页 |
5.4 酪胺可能影响花色素合成结构基因的表达 | 第55-57页 |
6 展望 | 第57-58页 |
附录 | 第58-60页 |
缩略语 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
攻读硕士期间科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |