| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第10-24页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 汞、铜、锌的污染及其残留检测技术 | 第12-13页 |
| ·汞污染及其危害 | 第12页 |
| ·铜污染及其危害 | 第12页 |
| ·锌污染及其危害 | 第12-13页 |
| ·重金属的残留检测技术 | 第13页 |
| 2 基因工程抗体 | 第13-17页 |
| ·基因工程抗体简介 | 第13-14页 |
| ·基因工程抗体的表达 | 第14-16页 |
| ·利用双分子荧光互补技术研究V_H与V_L的相互作用 | 第16页 |
| ·基因工程抗体在重金属残留检测中的应用 | 第16-17页 |
| 3 重组抗体的三维建模及重要氨基酸残基的鉴别 | 第17-20页 |
| ·重组抗体的三维建模 | 第17-19页 |
| ·抗体CDR区中关键氨基酸残基的鉴别 | 第19-20页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第20页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 下篇 研究内容 | 第24-85页 |
| 第二章 抗重金属汞、铜、锌单抗可变区的克隆及鉴定 | 第25-47页 |
| 1 引言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| ·总RNA的提取 | 第35页 |
| ·内参基因扩增反转录的第一链cDNA | 第35-36页 |
| ·通过RT-PCR扩增各单抗的V_H、V_L | 第36-37页 |
| ·各可变区序列克隆入pGM-T载体并测序 | 第37-38页 |
| ·测序序列的鉴定及分析 | 第38-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 第三章 抗重金属汞、铜、锌单抗可变区序列的真核表达及初步鉴定 | 第47-63页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-55页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-59页 |
| ·表达载体pBudCE4.1-3G4G5、pBudCE4.1-9D11、pBudCE4.1-2E8E3的构建 | 第55-56页 |
| ·报告载体pBudCE4.1-CMV-EGFP的构建 | 第56页 |
| ·报告载体pBudCE4.1-EF-EGFP的构建 | 第56页 |
| ·真核细胞转染体系的优化 | 第56-59页 |
| ·间接ELISA法测定表达产物的活性 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第四章 重组表达抗体VH与VL相互作用的探讨 | 第63-73页 |
| 1 引言 | 第63-65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-68页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-70页 |
| ·通过PCR扩增各片段 | 第68-69页 |
| ·双酶切及测序鉴定构建的pBudCE4.1-V_HCEYFP-V_LNEYFP质粒 | 第69页 |
| ·荧光表达结果 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70页 |
| 5 结论 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第五章 抗重金属汞、铜、锌单抗重组抗体的三维结构模拟 | 第73-85页 |
| 1 引言 | 第74页 |
| 2 材料与方法 | 第74-75页 |
| ·实验材料 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-82页 |
| ·汞抗体3G4G5的三维模拟 | 第75-77页 |
| ·铜抗体9D11的三维模拟 | 第77-79页 |
| ·锌抗体2E8E3的模拟 | 第79-81页 |
| ·抗原互补决定区与关键氨基酸残基的预测 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-83页 |
| 5 结论 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第六章 全文总结、创新点及后续展望 | 第85-87页 |
| 1 全文总结 | 第85页 |
| 2 创新点 | 第85-86页 |
| 3 存在的问题 | 第86页 |
| 4 研究展望 | 第86-87页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
