| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号与缩略语说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 农药污染的微生物修复 | 第11-12页 |
| ·生物修复 | 第11页 |
| ·生物修复的分类 | 第11-12页 |
| 2 农药残留的微生物降解与降解农药的微生物种群 | 第12页 |
| 3 含氟农药的特点 | 第12-13页 |
| 4 苯甲酰脲类杀虫剂的作用机理 | 第13-14页 |
| 5 氟铃脲的的性质与应用 | 第14-17页 |
| ·氟铃脲致畸变研究 | 第15-16页 |
| ·工业合成路线 | 第16页 |
| ·微生物对苯甲酰脲类杀虫剂的降解作用 | 第16-17页 |
| 6 本研究的意义 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-23页 |
| 第一章 氟铃脲降解菌FLN-7的分离鉴定与生长特性研究 | 第23-35页 |
| 1 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·菌株、培养基与试剂 | 第23-24页 |
| ·降解菌株的富集与分离 | 第24页 |
| ·降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第24页 |
| ·降解菌株的16S rRNA基因序列的测定 | 第24-26页 |
| ·降解菌株系统发育地位的确定 | 第26页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第26页 |
| ·氟铃脲含量的测定 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-32页 |
| ·污染土壤中氟铃脲降解菌株的分离 | 第26-28页 |
| ·降解菌株FLN-7的菌落形态及生理生化特征 | 第28页 |
| ·降解菌株FLN-7的鉴定结果 | 第28-30页 |
| ·环境条件对降解菌株FLN-7生长的影响 | 第30-31页 |
| ·降解菌株FLN-7对抗生素的耐受性 | 第31-32页 |
| 3 本章小结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第二章 氟铃脲降解菌FLN-7降解特性的研究 | 第35-45页 |
| 1 材料与方法 | 第35-36页 |
| ·培养基与试剂 | 第35页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第35页 |
| ·菌株FLN-7对氟铃脲农药降解特性研究 | 第35-36页 |
| 2 结果与讨论 | 第36-43页 |
| ·培养时间对菌株FLN-7降解氟铃脲的影响 | 第36页 |
| ·农药起始浓度对菌株FLN-7降解氟铃脲的影响 | 第36-37页 |
| ·pH值对菌株FLN-7降解氟铃脲的影响 | 第37页 |
| ·外加营养物质对菌株FLN-7降解氟铃脲的影响 | 第37-38页 |
| ·菌株FLN-7对氟铃脲的降解途径 | 第38-41页 |
| ·菌株FLN-7的降解谱 | 第41-43页 |
| 3 本章小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
| 第三章 水解氟铃脲的酰胺酶基因antiH的克隆 | 第45-57页 |
| 1 材料与方法 | 第45-50页 |
| ·所用菌株和质粒 | 第45-46页 |
| ·酶、试剂和培养基配方 | 第46页 |
| ·鸟枪法构建基因文库示意图 | 第46-47页 |
| ·高效感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·总DNA提取 | 第48页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第48-49页 |
| ·总DNA部分酶切体系建立 | 第49页 |
| ·凝胶电泳回收酶切片段 | 第49页 |
| ·酶连体系 | 第49页 |
| ·转化和基因文库的构建 | 第49-50页 |
| ·基因序列分析 | 第50页 |
| ·阳性克隆降解氟铃脲的检测 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·菌株FLN-7总DNA提取和Sau3AI酶切 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆的获得 | 第51-52页 |
| ·阳性克隆测序和ORF分析 | 第52-53页 |
| ·核酸序列分析 | 第53-54页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第54-55页 |
| 3 本章小结 | 第55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第四章 酰胺酶AmiH在E.coli BL21(DE3)的表达 | 第57-65页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·试剂和培养基 | 第57页 |
| ·所用菌株和质粒 | 第57页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第57页 |
| ·酰胺水解酶基因PCR扩增 | 第57-58页 |
| ·表达载体的构建 | 第58页 |
| ·酰胺酶表达菌株构建和诱导表达 | 第58-59页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第59-60页 |
| ·AmiH对各种酰胺类化合物的降解作用 | 第60页 |
| 2 结果与方法 | 第60-62页 |
| ·amiH的PCR扩增 | 第61页 |
| ·AmiH在大肠杆菌中的表达 | 第61-62页 |
| ·酰胺酶AmiH对各种酰胺类化合物的降解作用 | 第62页 |
| 3 本章小节 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 创新点 | 第65-67页 |
| 全文总结 | 第67-69页 |
| 附录一 实验用培养基及分子生物学试剂 | 第69-71页 |
| 附录二 菌株FLN-7的16S rRNA基因序列 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |