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抗Luman募集因子N端蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
文献综述第10页
第一章 LRF 蛋白和单克隆抗体的研究进展第10-21页
   ·内质网应激及其作用机制第10-16页
     ·内质网的结构与功能第10页
     ·内质网应激的产生第10-11页
     ·未折叠蛋白反应第11-16页
   ·LRF 蛋白的研究进展第16-17页
     ·LRF 在 UPR 中的作用第16页
     ·LRF 在动物生殖中的作用第16页
     ·LRF 在机体中的表达第16-17页
     ·LRF 与治疗单纯胞疹病毒感染第17页
   ·单克隆抗体技术的研究进展第17-21页
     ·单克隆抗体技术的研究第17-18页
     ·单克隆抗体的特性第18-19页
     ·单克隆抗体的应用第19-21页
第二章 LRF-N 原核表达载体的构建以及蛋白的表达和纯化第21-28页
   ·材料与方法第21-24页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·载体及菌株第22页
     ·试验方法第22-24页
   ·结果与分析第24-27页
     ·LRF-N 原核表达载体构建第24-25页
     ·GST-LRF-N 蛋白的可溶性分析第25-26页
     ·GST-LRF-N 蛋白的纯化第26-27页
   ·讨论第27页
     ·LRF-N 蛋白原核表达载体的构建第27页
     ·GST-LRF-N 重组蛋白纯化第27页
   ·结论第27-28页
第三章 小鼠免疫及 ELISA 条件筛选第28-34页
   ·材料与方法第28-29页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器设备第28页
     ·实验动物第28页
     ·试验方法第28-29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·经免小鼠血清抗体效价的检测第29-30页
     ·酶标二抗工作浓度的选择第30页
     ·ELISA 抗原包被浓度、血清最佳稀释倍数检测第30-31页
     ·封闭液的选择第31页
     ·酶标二抗孵育时间的选择第31页
     ·底物作用时间优化第31-32页
     ·间接 ELISA 检测方法的确立第32页
   ·讨论第32-33页
   ·结论第33-34页
第四章 抗 GST-LRF-N 蛋白的单克隆杂交瘤株的建立第34-43页
   ·材料和方法第34-38页
     ·主要试剂第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·实验动物及细胞第35页
     ·试验方法第35-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·SP2/0 骨髓瘤细胞的准备第38页
     ·饲养细胞的准备第38-39页
     ·细胞融合第39页
     ·融合细胞的形态观察第39-40页
     ·单克隆细胞株的筛选第40页
     ·细胞株分泌单抗特异性测定第40-41页
   ·讨论第41-42页
     ·融合细胞前的准备第41-42页
     ·细胞融合第42页
     ·阳性单克隆细胞株的筛选第42页
   ·结论第42-43页
第五章 抗 LRF-N 蛋白的单克隆抗体的制备及鉴定第43-54页
   ·材料和方法第43-48页
     ·主要试剂第43页
     ·主要仪器设备第43-44页
     ·试验动物及细胞第44页
     ·试验方法第44-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·复苏与冻存第48页
     ·腹水中抗体含量的测定第48页
     ·杂交瘤细胞上清和腹水单抗效价的测定第48-49页
     ·单抗亚型的检测第49页
     ·单抗特异性检测第49-50页
     ·单抗亲和常数的测定第50-51页
     ·融合细胞的核型分析第51-52页
     ·单克隆抗体的初步应用第52页
   ·讨论第52-53页
     ·杂交瘤细胞特性分析第52-53页
     ·McAb 的亲和力第53页
     ·单抗特异性的检测第53页
     ·单克隆抗体亚型第53页
   ·结论第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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