中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 rhIL-15的原核表达、纯化和鉴定 | 第16-60页 |
一、实验材料 | 第16-25页 |
1. 菌株 | 第16页 |
2. 质粒载体 | 第16-17页 |
3. 工具酶 | 第17-18页 |
4. 主要化学试剂 | 第18页 |
5. 其他材料 | 第18-19页 |
6. 主要仪器和设备 | 第19页 |
7. 主要溶液配方 | 第19-22页 |
8. 引物及合成hIL-15成熟蛋白编码基因的寡核苷酸片段 | 第22-25页 |
二、实验方法 | 第25-37页 |
1. 拼接PCR法合成hIL-15成熟蛋白的编码基因 | 第25-26页 |
2. 质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
3. DNA重组 | 第27-31页 |
4. 重组蛋白在E.coli中的表达和纯化 | 第31-35页 |
5. 重组蛋白理化性质及生物学活性测定 | 第35-37页 |
三、结果 | 第37-55页 |
1. 非融合表达载体pBV_(220)/hIL-15的构建 | 第37-42页 |
2. rhIL-15的诱导表达 | 第42-43页 |
3. rhIL-15的分离纯化 | 第43-48页 |
4. rhIL-15的理化性质鉴定 | 第48-55页 |
四、讨论 | 第55-60页 |
第二部分 抗rhIL-15单克隆抗体的制备 | 第60-67页 |
一、材料 | 第60-61页 |
1. 实验动物 | 第60页 |
2. 主要试剂及抗体 | 第60页 |
3. 溶液配制 | 第60-61页 |
二、方法 | 第61-64页 |
1. 抗原的制备 | 第61页 |
2. 免疫小鼠 | 第61页 |
3. 单克隆抗体的制备 | 第61-62页 |
4. 抗体的鉴定 | 第62-63页 |
5. 腹水的制备 | 第63页 |
6. 抗体纯化 | 第63-64页 |
7. 抗体亚型测定 | 第64页 |
三、结果 | 第64-66页 |
1. 抗rhIL-15单克隆抗体的制备 | 第64页 |
2. 单克隆抗体的鉴定 | 第64-66页 |
四、讨论 | 第66-67页 |
第三部分 rhIL-15的急性毒性和抗肿瘤作用研究 | 第67-109页 |
一、实验材料 | 第67-68页 |
1. 细胞株 | 第67页 |
2. 实验动物 | 第67页 |
3. 主要药品和试剂 | 第67页 |
4. 主要仪器和设备 | 第67-68页 |
5. 培养基的配制 | 第68页 |
6. 主要溶液配制 | 第68页 |
二、实验方法 | 第68-78页 |
(一) 组织学实验方法 | 第68-69页 |
(二) 免疫学实验方法 | 第69-70页 |
(三) rhIL-15急性毒性实验方法 | 第70-71页 |
(四) rhIL-15体内药效学实验方法 | 第71-78页 |
三、结果 | 第78-105页 |
(一) rhIL-15急性毒性实验 | 第78页 |
(二) rhIL-15体内药效学实验 | 第78-105页 |
四、讨论 | 第105-109页 |
(一) rhIL-15急性毒性 | 第105页 |
(二) rhIL-15体内药效学 | 第105-109页 |
小结 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-114页 |
综述 | 第114-124页 |
个人简历 | 第124-125页 |
致谢 | 第125页 |