| 前言 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词 | 第11-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-26页 |
| 1.1 中枢神经系统损伤及修复的研究现状 | 第16-19页 |
| 1.1.1 中枢神经系统损伤后的病理机制 | 第16-18页 |
| 1.1.2 促进CNS损伤修复的主要措施 | 第18-19页 |
| 1.2 沉默PTEN激活PI3K/AKT/MTOR信号通路对受损中枢神经系统的治疗意义和作用 | 第19-22页 |
| 1.2.1 PTEN蛋白的结构和功能 | 第19-20页 |
| 1.2.2 PI3K/AKT/MTOR信号通路的结构和功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 沉默PTEN激活m TOR信号通路对受损中枢神经系统的影响 | 第21-22页 |
| 1.3 慢病毒在中枢神经系统中的应用 | 第22-26页 |
| 1.3.1 慢病毒包装系统的组成部分 | 第22-23页 |
| 1.3.2 用于构建慢病毒载体的RNA的选择 | 第23-24页 |
| 1.3.3 慢病毒载体系统调节的RNA沉默在CNS疾病中的应用 | 第24-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-44页 |
| 2.1 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验试剂 | 第26-28页 |
| 2.3 实验细胞与实验动物 | 第28页 |
| 2.4 实验试剂配制 | 第28-30页 |
| 2.5 实验方法 | 第30-44页 |
| 2.5.1 PTEN microRNA引物设计 | 第30-31页 |
| 2.5.2 microRNA上、下游引物互相退火及PCR产物回收 | 第31页 |
| 2.5.3 重组T载体构建及目的片段的获得 | 第31-33页 |
| 2.5.4 慢病毒载体骨架的获得 | 第33页 |
| 2.5.5 目的片段与载体骨架的连接 | 第33-34页 |
| 2.5.6 质粒提取步骤 | 第34-35页 |
| 2.5.7 质粒转染PC12细胞 | 第35页 |
| 2.5.8 细胞培养方法 | 第35-37页 |
| 2.5.9 慢病毒颗粒的包装 | 第37-38页 |
| 2.5.10 慢病毒颗粒滴度测定 | 第38页 |
| 2.5.11 慢病毒沉默效率基因水平检测 | 第38-40页 |
| 2.5.12 动物模型制备 | 第40-42页 |
| 2.5.13 免疫组织化学染色 | 第42-43页 |
| 2.5.14 荧光染色 | 第43页 |
| 2.5.15 图像处理与统计分析 | 第43-44页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第44-52页 |
| 3.1 重组慢病毒载体的构建及鉴定 | 第44-47页 |
| 3.1.1 重组T载体的构建 | 第44页 |
| 3.1.2 重组T载体的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.1.3 慢病毒载体骨架的获得 | 第45页 |
| 3.1.4 目的片段与载体骨架的连接 | 第45页 |
| 3.1.5 重组慢病组载体的鉴定 | 第45-47页 |
| 3.2 慢病毒包装及滴度测定 | 第47-48页 |
| 3.2.1 三质粒转染 293T后细胞转染效率检测 | 第47-48页 |
| 3.2.2 病毒滴度测定 | 第48页 |
| 3.3 慢病毒颗粒沉默效率基因水平检测 | 第48-49页 |
| 3.4 大鼠脊髓注射病毒后免疫组织化学染色 | 第49-52页 |
| 第4章 讨论 | 第52-56页 |
| 第5章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 作者简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
