摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
文献综述 | 第14-26页 |
第一章 Collagen XV研究进展 | 第14-23页 |
1.1 Collagens家族结构和分类 | 第14-18页 |
1.1.1 纤维状胶原 | 第16页 |
1.1.2 网络形成的胶原 | 第16-17页 |
1.1.3 含间断三维螺旋的纤维相关胶原(FACITs) | 第17页 |
1.1.4 含间断三维螺旋的膜相关胶原(MACITs) | 第17页 |
1.1.5 锚定胶原纤维 | 第17页 |
1.1.6 片段形成胶原 | 第17-18页 |
1.1.7 多螺旋域胶原(MULTIPLEXIN) | 第18页 |
1.2 Collagens在脂代谢中的作用 | 第18-21页 |
1.2.1 胶原对脂肪细胞分化的调控 | 第18-19页 |
1.2.2 胶原对脂肪合成和分解代谢的调节 | 第19-20页 |
1.2.3 胶原沉积对肥胖等代谢疾病的影响 | 第20-21页 |
1.3 Col XV的结构与功能 | 第21-23页 |
1.3.1 Col XV的结构、分布和表达模式 | 第21-22页 |
1.3.2 Col XV的生理功能 | 第22-23页 |
第二章 脂肪细胞分化研究进展 | 第23-26页 |
2.1 体内脂肪组织的发育 | 第23页 |
2.2 脂肪细胞的成脂分化 | 第23-26页 |
2.2.1 脂肪细胞分化的转录调节 | 第24-25页 |
2.2.2 ECM对脂肪细胞分化的影响 | 第25-26页 |
试验研究 | 第26-61页 |
前言 | 第26-27页 |
第三章 Col XV促进脂肪细胞分化和抑制脂解 | 第27-41页 |
3.1 材料 | 第27-28页 |
3.1.1 细胞 | 第27-28页 |
3.1.2 主要试剂及设备仪器 | 第28页 |
3.2 方法 | 第28-31页 |
3.2.1 脂肪细胞复苏、培养及冻存 | 第28页 |
3.2.2 细胞诱导分化 | 第28页 |
3.2.3 油红O染色 | 第28-29页 |
3.2.4 Bodipy染色 | 第29页 |
3.2.5 质粒提取 | 第29页 |
3.2.6 质粒载体转染 | 第29页 |
3.2.7 细胞总RNA提取 | 第29页 |
3.2.8 反转录及实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
3.2.9 细胞总蛋白提取 | 第30页 |
3.2.10 Western bloting检测 | 第30-31页 |
3.2.11 数据统计及分析 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-38页 |
3.3.1 Col XV在脂肪细胞和脂肪组织中的表达规律 | 第31-32页 |
3.3.2 Col XV促进脂肪细胞分化 | 第32-35页 |
3.3.3 Col XV对脂肪细胞代谢的影响 | 第35-36页 |
3.3.4 Col XV通过cAMP/PKA调节脂肪细胞分化和脂代谢 | 第36-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
3.5 小结 | 第40-41页 |
第四章 Col XV通过CREB负转录调控脂肪细胞分化和脂代谢 | 第41-52页 |
4.1 材料 | 第41页 |
4.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞 | 第41页 |
4.1.2 主要试剂设备仪器 | 第41页 |
4.2 方法 | 第41-45页 |
4.2.1 试剂盒法提取DNA | 第41页 |
4.2.2 PCR扩增 | 第41-42页 |
4.2.3 胶回收 | 第42页 |
4.2.4 双酶切产物的连接 | 第42-43页 |
4.2.5 质粒转化 | 第43页 |
4.2.6 荧光素酶报告质粒定点突变 | 第43-44页 |
4.2.7 细胞复苏、培养及冻存 | 第44页 |
4.2.8 质粒载体提取与转染 | 第44-45页 |
4.2.9 细胞总RNA提取 | 第45页 |
4.2.10 反转录及实时定量PCR | 第45页 |
4.2.11 细胞总蛋白提取 | 第45页 |
4.2.12 Western bloting检测 | 第45页 |
4.2.13 Dual-Luciferase? 双萤光素酶报告分析 | 第45页 |
4.2.14 数据统计及分析 | 第45页 |
4.3 结果与分析 | 第45-50页 |
4.3.1 Col XV启动子上荧光素酶报告载体的构建 | 第45-47页 |
4.3.2 Col XV启动子上转录因子CREB的结合与鉴定 | 第47-48页 |
4.3.3 Col XV通过CREB负转录调控脂肪细胞分化和脂代谢 | 第48-50页 |
4.4 讨论 | 第50-51页 |
4.5 小结 | 第51-52页 |
第五章 Col XV通过DNA甲基化调节脂肪细胞分化和脂代谢 | 第52-61页 |
5.1 材料 | 第53页 |
5.1.1 实验动物、菌株、质粒及细胞 | 第53页 |
5.1.2 主要试剂和设备仪器 | 第53页 |
5.2 方法 | 第53-55页 |
5.2.1 试剂盒法提取小鼠基因组DNA | 第53页 |
5.2.2 BSP方法检测基因的DNA甲基化水平 | 第53-54页 |
5.2.3 Real-time PCR | 第54页 |
5.2.4 数据统计及分析 | 第54-55页 |
5.3 结果与分析 | 第55-59页 |
5.3.1 脂肪细胞分化中Col XV DNA甲基化水平变化 | 第55-57页 |
5.3.2 Col XV对DNA甲基化转移酶表达的影响 | 第57页 |
5.3.3 Col XV通过抑制DNA甲基化调节脂肪细胞分化和脂代谢 | 第57-59页 |
5.4 讨论 | 第59-60页 |
5.5 小结 | 第60-61页 |
结论、创新点以及进一步研究内容 | 第61-62页 |
1 结论 | 第61页 |
2 创新点 | 第61页 |
3 进一步研究内容 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简介 | 第75页 |