| 附件 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-28页 |
| 1.1 果实蝇概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 果实蝇的发生与危害 | 第15页 |
| 1.1.2 果实蝇的防治 | 第15-16页 |
| 1.2 昆虫不育技术 | 第16-18页 |
| 1.2.1 昆虫不育技术的原理 | 第16页 |
| 1.2.2 昆虫不育技术的应用 | 第16-18页 |
| 1.2.3 不育雄虫释放 | 第18页 |
| 1.3 遗传性别品系研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 可视标记品系 | 第18页 |
| 1.3.2 雌虫条件致死品系 | 第18-19页 |
| 1.3.3 遗传性别品系的应用及缺陷 | 第19-20页 |
| 1.4 转基因性别分离品系 | 第20-24页 |
| 1.4.1 精子荧光标记品系 | 第20-21页 |
| 1.4.2 雌性特异致死品系 | 第21-23页 |
| 1.4.3 雌性特异胚胎致死品系 | 第23-24页 |
| 1.4.4 转基因性别分离品系的应用 | 第24页 |
| 1.5 转基因昆虫品系的修正 | 第24-26页 |
| 1.5.1 转基因昆虫品系的潜在风险 | 第24-25页 |
| 1.5.2 phi C31整合酶位点特异重组系统 | 第25-26页 |
| 1.6 研究思路 | 第26-28页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第26-27页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 桔小实蝇原生殖细胞基因Bdvasa的表达和启动子克隆 | 第28-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-36页 |
| 2.1.1 供试虫源 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.3 总RNA提取和第一链c DNA合成 | 第30-31页 |
| 2.1.4 基因组DNA提取 | 第31-32页 |
| 2.1.5 实时荧光定量RT-q PCR检测Bdvasa和Bdsry α 的表达量 | 第32-33页 |
| 2.1.6 反向PCR模板制备 | 第33-34页 |
| 2.1.7 反向PCR克隆Bdvasa启动子序列 | 第34-36页 |
| 2.1.8 启动子序列分析 | 第36页 |
| 2.2 结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.2.1 桔小实蝇Bdvasa和Bdsry α 的时空表达谱 | 第36-37页 |
| 2.2.2 桔小实蝇Bdvasa上游启动子序列分析 | 第37-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-43页 |
| 2.3.1 桔小实蝇Bdvasa和Bdsry α 基因表达和功能 | 第41页 |
| 2.3.2 桔小实蝇Bdvasa启动子及其在遗传控制中的应用 | 第41-43页 |
| 第三章 桔小实蝇Bdcp-1 基因的克隆、表达及功能研究 | 第43-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-50页 |
| 3.1.1 供试虫源 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂和设备 | 第44-45页 |
| 3.1.3 引物设计 | 第45页 |
| 3.1.4 简并引物扩增桔小实蝇Bdcp-1 片段 | 第45-46页 |
| 3.1.5 RACE扩增桔小实蝇Bdcp-15’和 3’序列 | 第46页 |
| 3.1.6 序列分析和进化树构建 | 第46页 |
| 3.1.7 实时荧光定量RT-q PCR检测桔小实蝇Bdcp-1 的表达量 | 第46-47页 |
| 3.1.8 双链RNA合成与纯化 | 第47-49页 |
| 3.1.9 雌虫腹部双链RNA的注射及沉默效率检测 | 第49页 |
| 3.1.10桔小实蝇Bdcp-1 功能验证 | 第49-50页 |
| 3.2 结果与分析 | 第50-58页 |
| 3.2.1 桔小实蝇Bdcp-1 的克隆和序列分析 | 第50-51页 |
| 3.2.2 桔小实蝇Bdcp-1 序列比对和进化树分析 | 第51-53页 |
| 3.2.3 桔小实蝇Bdcp-1 的时空表达谱 | 第53-54页 |
| 3.2.4 紫外线照射对桔小实蝇Bdcp-1 表达量的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.5 桔小实蝇Bdcp-1 功能验证结果 | 第55-58页 |
| 3.3 讨论 | 第58-60页 |
| 3.3.1 桔小实蝇Bdcp-1 的克隆和序列分析 | 第58页 |
| 3.3.2 桔小实蝇Bdcp-1 的表达和功能 | 第58-60页 |
| 第四章 桔小实蝇性别决定基因Bdtra和Bdtra-2 的表达及功能研究 | 第60-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-65页 |
| 4.1.1 供试虫源 | 第61页 |
| 4.1.2 主要试剂和设备 | 第61页 |
| 4.1.3 引物设计 | 第61-63页 |
| 4.1.4 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 基因组和c DNA结构分析 | 第63页 |
| 4.1.5 半定量RT-PCR分析Bdtra和Bdtra-2 的表达 | 第63-64页 |
| 4.1.6 双链RNA的合成与纯化 | 第64页 |
| 4.1.7 桔小实蝇胚胎RNAi | 第64页 |
| 4.1.8 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 功能验证 | 第64-65页 |
| 4.2 结果与分析 | 第65-72页 |
| 4.2.1 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 的基因结构和剪接体类型 | 第65-67页 |
| 4.2.2 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 的表达分析 | 第67-68页 |
| 4.2.3 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 的功能验证 | 第68-70页 |
| 4.2.4 RNAi雄虫生殖力测试 | 第70-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-74页 |
| 4.3.1 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 基因结构和表达模式 | 第72-73页 |
| 4.3.2 桔小实蝇Bdtra和Bdtra-2 的功能及其应用展望 | 第73-74页 |
| 第五章 桔小实蝇雌性特异胚胎致死的遗传性别品系载体构建 | 第74-85页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-79页 |
| 5.1.1 基础质粒 | 第74-75页 |
| 5.1.2 主要试剂和设备 | 第75页 |
| 5.1.3 引物设计 | 第75-76页 |
| 5.1.4 桔小实蝇Bdvasa驱动载体构建策略 | 第76-78页 |
| 5.1.5 桔小实蝇雌性特异致死效应载体构建策略 | 第78-79页 |
| 5.2 结果与分析 | 第79-84页 |
| 5.2.1 桔小实蝇Bdvasa驱动载体构建 | 第79-81页 |
| 5.2.2 桔小实蝇雌性特异致死效应载体构建 | 第81-84页 |
| 5.3 讨论 | 第84-85页 |
| 5.3.1 桔小实蝇Bdvasa驱动表达系统 | 第84页 |
| 5.3.2 桔小实蝇雌性特异致死系统 | 第84-85页 |
| 第六章 桔小实蝇精子荧光标记品系建立 | 第85-91页 |
| 6.1 材料与方法 | 第86-88页 |
| 6.1.1 供试虫源 | 第86页 |
| 6.1.2 主要材料和仪器设备 | 第86页 |
| 6.1.3 桔小实蝇胚胎显微注射 | 第86-87页 |
| 6.1.4 遗传转化个体荧光筛选 | 第87页 |
| 6.1.5 RT-PCR分析荧光蛋白基因的表达 | 第87-88页 |
| 6.2 结果与分析 | 第88-89页 |
| 6.2.1 荧光筛选结果 | 第88-89页 |
| 6.2.2 荧光蛋白外源基因的表达分析 | 第89页 |
| 6.3 讨论 | 第89-91页 |
| 第七章 全文结论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简历 | 第106-107页 |
