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ChIFN-γ调控烟草腺毛发育基因功能研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第11-13页
第一章 前言第13-25页
    1.1 干扰素研究进展第13-15页
        1.1.1 干扰素生物学活性第13-14页
        1.1.2 ChIFN-γ 的研究进展第14-15页
    1.2 植物表皮毛概述第15-23页
        1.2.1 烟草腺毛的发育第16-17页
        1.2.2 调控烟草腺毛发育的相关基因第17-18页
        1.2.3 拟南芥表皮毛的发育第18-19页
        1.2.4 调控拟南芥表皮毛发育的基因第19-21页
        1.2.5 ChIFN-γ 调控烟草抗虫机制第21-23页
    1.3 研究目的和意义第23-25页
第二章 候选基因的克隆第25-46页
    2.1 材料第25-30页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 菌种和载体第25页
        2.1.3 主要化学试剂第25-26页
        2.1.4 试剂盒、酶制剂以及主要分子实验试剂第26页
        2.1.5 引物第26-27页
        2.1.6 主要实验仪器第27-28页
        2.1.7 储液、缓冲液和培养基第28-30页
    2.2 实验方法第30-38页
        2.2.1 烟草叶片总RNA的提取第30-31页
        2.2.2 RT-PCR扩增目的片断第31-32页
        2.2.3 目的DNA片段的胶回收纯化第32-33页
        2.2.4 目的片段与T载体连接第33-34页
        2.2.5 感受态大肠杆菌(E.coli DH5α)的制备和重组质粒的转化第34-35页
        2.2.6 重组质粒菌落PCR第35-36页
        2.2.7 质粒的提取第36-37页
        2.2.8 质粒PCR检测第37页
        2.2.9 序列分析第37-38页
    2.3 结果与分析第38-46页
        2.3.1 烟草叶片总RNA的提取第38页
        2.3.2 目的基因的RT-PCR扩增第38-39页
        2.3.3 质粒的重组与转化第39-41页
        2.3.4 序列分析第41-42页
        2.3.5 蛋白质结构域分析第42-43页
        2.3.6 聚类分析第43-46页
第三章 植物过表达载体构建和遗传转化拟南芥第46-72页
    3.1 材料第46-50页
        3.1.1 菌种和植物材料第46页
        3.1.2 载体第46页
        3.1.3 主要化学试剂第46-47页
        3.1.4 试剂盒、酶制剂以及主要分子实验试剂第47-48页
        3.1.5 主要实验仪器第48页
        3.1.6 引物序列第48页
        3.1.7 储液、缓冲液和培养基第48-50页
    3.2 实验方法第50-58页
        3.2.1 目的DNA片段的酶切引物扩增第50-51页
        3.2.2 目的DNA片断的酶切及其产物回收第51页
        3.2.3 载体的连接和转化第51-53页
        3.2.4 农杆菌感受态的制备和转化第53-54页
        3.2.5 拟南芥的培养第54-55页
        3.2.6 蘸花法浸染拟南芥第55-56页
        3.2.7 拟南芥基因组的提取第56-57页
        3.2.8 抗性植株PCR检测第57-58页
        3.2.9 抗性植株的GUS组织化学染色第58页
    3.3 结果与分析第58-68页
        3.3.1 E.coli DH5α 菌落PCR与质粒PCR验证第58-59页
        3.3.2 农杆菌LBA 4404菌落PCR与质粒PCR验证第59-60页
        3.3.3 蘸花法浸染拟南芥第60-61页
        3.3.4 抗性植株的筛选和鉴定第61-64页
        3.3.5 转基因拟南芥表皮毛数量性状观察第64-68页
    3.4 讨论第68-72页
第四章 总结与展望第72-74页
    4.1 总结第72-73页
    4.2 展望第73-74页
参考文献第74-83页
致谢第83页
在读期间参与科研项目第83页
在读期间发表文章第83-84页
附录第84-87页

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