| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-25页 |
| 1.1 生物表面活性剂 | 第11-12页 |
| 1.2 槐糖脂 | 第12-21页 |
| 1.2.1 槐糖脂的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 槐糖脂的产生菌 | 第13-14页 |
| 1.2.3 槐糖脂的性质 | 第14-15页 |
| 1.2.4 槐糖脂的合成途径 | 第15-18页 |
| 1.2.5 影响槐糖脂发酵的因素 | 第18-20页 |
| 1.2.6 槐糖脂的应用 | 第20-21页 |
| 1.3 细胞色素P450与烷烃利用 | 第21-23页 |
| 1.4 选题依据及研究内容 | 第23-25页 |
| 1.4.1 本文选题依据 | 第23页 |
| 1.4.2 本文研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 拟威克酵母对不同碳链烷烃的利用 | 第25-35页 |
| 引言 | 第25页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-29页 |
| 2.1.1 菌种 | 第25页 |
| 2.1.2 仪器和试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 拟威克酵母以烷烃为碳源的发酵 | 第26页 |
| 2.1.4 发酵液中葡萄糖残余量的测定 | 第26-27页 |
| 2.1.5 发酵液中槐糖脂产量的测定 | 第27-28页 |
| 2.1.6 拟威克酵母以烷烃为碳源发酵后槐糖脂的HPLC-MS分析 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第29-34页 |
| 2.2.1 拟威克酵母以烷烃为碳源发酵后槐糖脂产量的测定 | 第29-31页 |
| 2.2.2 拟威克酵母以烷烃为碳源发酵后槐糖脂的HPLC-MS分析 | 第31-34页 |
| 2.3 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 不同碳链烷烃对拟威克酵母CYP450家族基因的诱导表达 | 第35-51页 |
| 引言 | 第35页 |
| 3.1 材料和方法 | 第35-41页 |
| 3.1.1 菌种 | 第35-36页 |
| 3.1.2 仪器和试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 拟威克酵母基因组中CYP450家族基因的查找 | 第36页 |
| 3.1.4 拟威克酵母的培养条件 | 第36-37页 |
| 3.1.5 拟威克酵母发酵液mRNA的提取 | 第37-38页 |
| 3.1.6 拟威克酵母cDNA的合成 | 第38页 |
| 3.1.7 荧光定量标准曲线的绘制 | 第38-41页 |
| 3.1.8 目的基因表达量的荧光定量分析 | 第41页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第41-50页 |
| 3.2.1 拟威克酵母CYP450家族基因的发现 | 第41-42页 |
| 3.2.2 拟威克酵母发酵液mRNA的提取 | 第42-44页 |
| 3.2.3 荧光定量的标准曲线 | 第44-45页 |
| 3.2.4 发酵培养基培养72h后CYP450的基因表达量 | 第45-46页 |
| 3.2.5 不含葡萄糖的发酵培养基培养72h后CYP450的基因表达量 | 第46-48页 |
| 3.2.6 葡萄糖饥饿处理4h再用烷烃诱导4h后CYP450的基因表达量 | 第48页 |
| 3.2.7 碳氮源饥饿处理4h再用烷烃诱导4h后CYP450的基因表达量 | 第48-50页 |
| 3.3 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 拟威克酵母CYP450家族基因的功能研究 | 第51-81页 |
| 引言 | 第51-52页 |
| 4.1 材料和方法 | 第52-67页 |
| 4.1.1 质粒和菌种 | 第52页 |
| 4.1.2 仪器和试剂 | 第52-53页 |
| 4.1.3 敲除盒的构建 | 第53-57页 |
| 4.1.4 敲除盒的拟威克酵母电转化 | 第57-58页 |
| 4.1.5 酵母基因组的小量提取 | 第58-59页 |
| 4.1.6 拟威克酵母敲除株的验证 | 第59页 |
| 4.1.7 拟威克酵母野生株和敲除株的槐糖脂发酵 | 第59页 |
| 4.1.8 拟威克酵母CYP52-E1和CYP51的原核异源表达 | 第59-63页 |
| 4.1.9 拟威克酵母CYP52-E1和CYP51的真核异源表达 | 第63-67页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第67-80页 |
| 4.2.1 敲除盒的构建 | 第67-68页 |
| 4.2.2 拟威克酵母敲除株的验证 | 第68-69页 |
| 4.2.3 拟威克酵母野生株和敲除株的槐糖脂产量分析 | 第69-70页 |
| 4.2.4 拟威克酵母野生株和敲除株的槐糖脂HPLC-MS分析 | 第70-71页 |
| 4.2.5 拟威克酵母野生株和敲除株CYP450基因的荧光定量分析 | 第71-72页 |
| 4.2.6 拟威克酵母CYP52-E1和CYP51的原核异源表达 | 第72-75页 |
| 4.2.7 拟威克酵母CYP52-E1和CYP51的真核异源表达 | 第75-79页 |
| 4.2.8 异源表达失败的重组菌中基因转录水平的检测 | 第79-80页 |
| 4.3 本章小结 | 第80-81页 |
| 论文的创新点与展望 | 第81-83页 |
| 论文的创新点 | 第81页 |
| 论文的展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 攻读学位期间发表或整理的学术论文及其他成果 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 附件 | 第95页 |
