附件 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-19页 |
1.1 病原 | 第12-14页 |
1.1.1 泰勒虫的分类 | 第12页 |
1.1.2 泰勒虫生活史 | 第12-13页 |
1.1.3 临床症状及病理机制 | 第13页 |
1.1.4 流行病学 | 第13-14页 |
1.2 诊断方法 | 第14-18页 |
1.2.1 基于核酸的分子生物学诊断方法 | 第14-16页 |
1.2.2 血清学检测方法 | 第16-18页 |
1.3 TuIP基因的研究进展 | 第18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 尤氏泰勒虫TuIP和Tu88蛋白特性研究 | 第19-22页 |
2.1 材料和方法 | 第19-20页 |
2.1.1 血清、试剂和实验用羊 | 第19页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.3 尤氏泰勒虫染虫血血涂片制备 | 第19页 |
2.1.4 间接免疫荧光试验 | 第19-20页 |
2.2 结果 | 第20-21页 |
2.3 讨论 | 第21-22页 |
第三章 羊泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条的制备 | 第22-31页 |
3.1 材料和仪器 | 第22页 |
3.1.1 血清与样品 | 第22页 |
3.1.2 试剂 | 第22页 |
3.1.3 仪器 | 第22页 |
3.2 实验方法 | 第22-25页 |
3.2.1 胶体金的制备 | 第22-23页 |
3.2.2 TuIP抗原最适标记量的确定 | 第23页 |
3.2.3 TuIP抗原最适标记胶体金pH值的确定 | 第23页 |
3.2.4 TuIP抗原-胶体金标记物制备 | 第23页 |
3.2.5 检测线和质控线最适包被浓度的确定 | 第23页 |
3.2.6 试纸条成品制备及结果判定标准 | 第23-24页 |
3.2.7 使用方法及结果判定 | 第24-25页 |
3.2.8 试纸条性能检定 | 第25页 |
3.3 结果与分析 | 第25-28页 |
3.3.1 胶体金标记TuIP的最适工作浓度的确定 | 第25-26页 |
3.3.2 检测线和质控线最适包被浓度的确定 | 第26页 |
3.3.3 敏感性试验 | 第26-27页 |
3.3.4 特异性试验 | 第27页 |
3.3.5 批内批间重复性试验 | 第27-28页 |
3.3.6 符合率试验(与间接ELISA检测结果比对) | 第28页 |
3.3.7 检测性能评价 | 第28页 |
3.3.8 保存期试验 | 第28页 |
3.4 讨论 | 第28-31页 |
第四章 尤氏泰勒虫实时荧光定量PCR方法的建立 | 第31-39页 |
4.1 材料 | 第31页 |
4.1.1 样品 | 第31页 |
4.1.2 主要试剂 | 第31页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第31页 |
4.2 方法 | 第31-35页 |
4.2.1 引物设计 | 第31-32页 |
4.2.2 尤氏泰勒虫基因组DNA的提取 | 第32页 |
4.2.3 阳性标准品的制备 | 第32-34页 |
4.2.4 尤氏泰勒虫实时荧光定量PCR反应 | 第34页 |
4.2.5 尤氏泰勒虫荧光定量PCR检测性能评价 | 第34页 |
4.2.6 野外样品的检测 | 第34-35页 |
4.3 结果 | 第35-38页 |
4.3.1 尤氏泰勒虫目的基因的扩增及鉴定结果 | 第35页 |
4.3.2 标准曲线的构建结果 | 第35-36页 |
4.3.3 敏感性 | 第36-37页 |
4.3.4 特异性 | 第37页 |
4.3.5 重复性 | 第37-38页 |
4.3.6 野外样品检测 | 第38页 |
4.4 讨论 | 第38-39页 |
第五章 全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简历 | 第47页 |