| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 甜菜夜蛾 | 第9-10页 |
| 1.1.1 甜菜夜蛾危害情况 | 第9页 |
| 1.1.2 甜菜夜蛾防治现状 | 第9-10页 |
| 1.2 几丁质脱乙酰酶（CDA） | 第10-11页 |
| 1.2.1 几丁质 | 第10页 |
| 1.2.2 几丁质脱乙酰酶 | 第10页 |
| 1.2.3 几丁质脱乙酰酶的结构及功能 | 第10-11页 |
| 1.3 RNAi | 第11-13页 |
| 1.3.1 RNAi作用机理 | 第12-13页 |
| 1.3.2 RNAi在昆虫研究中的应用 | 第13页 |
| 1.4 选题依据及目的意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-29页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第14页 |
| 2.1.2 菌株、载体、酶及试剂盒 | 第14页 |
| 2.1.3 试剂及溶液 | 第14-15页 |
| 2.2 方法 | 第15-29页 |
| 2.2.1 secda1 基因的获得 | 第15-16页 |
| 2.2.1.1 中肠组织的提取 | 第15页 |
| 2.2.1.2 中肠总RNA的提取 | 第15页 |
| 2.2.1.3 cDNA的合成 | 第15页 |
| 2.2.1.4 E.coli感受态细胞的制备 | 第15-16页 |
| 2.2.1.5 利用PCR技术获得secda1 基因片段 | 第16页 |
| 2.2.2 RACE获得secda1 全长基因 | 第16-18页 |
| 2.2.3 SeCDA1 重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第18-20页 |
| 2.2.4 重组SeCDA1 蛋白的表达、纯化及特异抗体制备 | 第20-21页 |
| 2.2.5 SeCDA1 重组蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第21-22页 |
| 2.2.6 SeCDA1 重组蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第22-24页 |
| 2.2.7 重组SeCDA1 蛋白活性测定 | 第24-26页 |
| 2.2.8 secda1 基因转录水平表达分析 | 第26-27页 |
| 2.2.9 secda1 基因翻译水平表达分析 | 第27页 |
| 2.2.10 secda1 基因的RNAi研究 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 secda1 基因片段的获得 | 第29页 |
| 3.2 RACE获得secda1 全长基因 | 第29-30页 |
| 3.3 几丁质脱乙酰酶secda1 序列分析 | 第30-31页 |
| 3.4 系统进化树的构建 | 第31-32页 |
| 3.5 secda1 基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-33页 |
| 3.5.1 原核重组表达载体的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.5.2 原核重组蛋白的表达 | 第33页 |
| 3.6 secda1 基因在毕赤酵母中的表达 | 第33-35页 |
| 3.6.1 毕赤酵母重组表达载体（pPIC9K-secda1）的构建 | 第33-34页 |
| 3.6.2 重组酵母的PCR鉴定 | 第34页 |
| 3.6.3 重组毕赤酵母表达SeCDA1 蛋白 | 第34-35页 |
| 3.7 secda1 基因在昆虫细胞中的表达 | 第35-36页 |
| 3.7.1 重组转座载体（pFastBac-secda1）的构建及鉴定 | 第35页 |
| 3.7.2 重组Bacmid-secda1 的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.7.3 BTI-Tn-5B1-4（HighFive）细胞表达重组SeCDA1 蛋白 | 第36页 |
| 3.8 重组SeCDA1 蛋白的活性测定 | 第36-37页 |
| 3.9 secda1 在甜菜夜蛾中的组织定位 | 第37页 |
| 3.9.1 secda1 基因在转录水平上的表达情况 | 第37页 |
| 3.9.2 secda1 基因在翻译水平上的表达情况 | 第37页 |
| 3.10 secda1 基因的RNAi研究 | 第37-39页 |
| 3.10.1 RNAi质粒模板的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.10.2 dsRNA合成 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 全文结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
