| 摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·研究背景与意义 | 第9页 |
| ·绿僵菌的研究现状 | 第9-11页 |
| ·绿僵菌的生物学特征 | 第9-10页 |
| ·绿僵菌的致病机理 | 第10-11页 |
| ·附着胞的研究进展 | 第11-15页 |
| ·附着胞的形态及结构 | 第12-13页 |
| ·附着胞的主要功能 | 第13-14页 |
| ·附着胞形成的信号转导机制 | 第14-15页 |
| ·立题依据和研究目标 | 第15-16页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17页 |
| ·本研究创新之处 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-37页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·所用菌株和昆虫 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要溶液配制 | 第19-20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20-21页 |
| ·Magas1 全长cDNA 基因的克隆及相关序列分析 | 第21-24页 |
| ·Magas1 全长cDNA 的克隆 | 第21-24页 |
| ·Magas1 基因cDNA 序列的分析 | 第24页 |
| ·Magas1 基因组DNA 及启动子序列的分析 | 第24页 |
| ·Magas1 基因表达谱分析 | 第24-28页 |
| ·绿僵菌CQMa102 腐生及寄生各个时期样品制备 | 第24-26页 |
| ·绿僵菌CQMa102 腐生及寄生各个时期RNA 的提取 | 第26页 |
| ·半定量RT-PCR. | 第26-28页 |
| ·Magas1 基因表达定位分析 | 第28-32页 |
| ·Pbar-EX -EGFP 载体的构建 | 第28-31页 |
| ·Magas1-EGFP 初步载体的构建. | 第31页 |
| ·Magas1-EGFP 农杆菌融合表达载体的构建 | 第31页 |
| ·Magas1-EGFP 农杆菌融合表达载体转化绿僵菌 | 第31-32页 |
| ·筛选Magas1-EGFP 绿僵菌转化菌株. | 第32页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察Magas1-EGFP 的表达定位 | 第32页 |
| ·Magas1 基因敲除突变菌株的筛选 | 第32-34页 |
| ·Magas1 基因敲除载体的构建 | 第32-34页 |
| ·Magas1 基因敲除载体转化绿僵菌 | 第34页 |
| ·筛选Magas1 绿僵菌突变株 | 第34页 |
| ·Magas1 基因功能的研究. | 第34-37页 |
| ·1/4SDAY 培养基上生长速度观察 | 第35页 |
| ·各种培养基上菌落的形态特征 | 第35页 |
| ·1/4SDAY 培养基上产孢量的测定 | 第35页 |
| ·萌发率及附着胞形成率的测定 | 第35页 |
| ·膨胀压测定 | 第35-36页 |
| ·毒力测试 | 第36页 |
| ·数据处理 | 第36-37页 |
| 3 结果和分析 | 第37-51页 |
| ·Magas1 基因cDNA 全长的克隆及序列分析 | 第37-39页 |
| ·Magas1 基因cDNA 全长的克隆 | 第37页 |
| ·Magas1 基因cDNA 全长的序列分析 | 第37-39页 |
| ·Magas1 基因表达时期分析 | 第39-42页 |
| ·腐生及寄生各个时期RNA 的提取 | 第39-41页 |
| ·半定量RT-PCR 分析表达时期 | 第41-42页 |
| ·Magas1 基因表达定位分析 | 第42-43页 |
| ·Magas1 启动子、Magas1 基因及EGFP 基因的扩增 | 第42页 |
| ·Magas1-EGFP 融合表达载体的验证. | 第42-43页 |
| ·Magas1-EGFP 转化菌株的筛选. | 第43页 |
| ·荧光观察Magas1-EGFP 转化菌株的表达定位 | 第43页 |
| ·Magas1 敲除突变株的筛选 | 第43-46页 |
| ·Magas1 基因敲除载体左臂及右臂的扩增 | 第43-44页 |
| ·Magas1 基因敲除载体的验证 | 第44-45页 |
| ·筛选Magas1 基因敲除突变株 | 第45-46页 |
| ·Magas1 的基因功能研究 | 第46-51页 |
| ·1/4SDAY 培养基上生长速度观察. | 第46页 |
| ·各种培养基上菌落的形态特征 | 第46-48页 |
| ·1/4SDAY 培养基上产孢量测定 | 第48页 |
| ·萌发率及附着胞形成率的测定 | 第48-49页 |
| ·膨胀压测定 | 第49-50页 |
| ·毒力测试 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·筛选cDNA 文库的方法获取Magas1 基因的cDNA 全长. | 第51-52页 |
| ·Magas1 表达时期及表达定位分析 | 第52页 |
| ·Magas1 的功能分析 | 第52-55页 |
| 5 结论与后续工作建议 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录. | 第65-66页 |
| A. 本文中用到的引物 | 第65-66页 |
| B. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第66页 |
