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日本血吸虫虫卵及相关抗原的研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-23页
    1.1 血吸虫病概述第14页
    1.2 血吸虫病实验诊断方法研究概况第14-18页
        1.2.1 检测虫卵方法第14-15页
        1.2.2 检测抗体方法第15-17页
        1.2.3 检测抗原方法第17页
        1.2.4 检测DNA方法第17-18页
    1.3 血吸虫病诊断用抗原研究概况第18-22页
        1.3.1 虫体抗原第18-19页
        1.3.2 组分抗原第19-20页
        1.3.3 重组抗原第20-22页
        1.3.4 其他抗原第22页
    1.4 目的和意义第22-23页
第二章 日本血吸虫沉积虫卵提取方法和间接血凝试验第23-33页
    2.1 引言第23页
    2.2 实验材料第23-25页
        2.2.1 生物材料第23-24页
        2.2.2 仪器设备第24页
        2.2.3 酶和试剂第24页
        2.2.4 试剂配方第24-25页
    2.3 实验方法第25-27页
        2.3.1 兔人工感染血吸虫尾蚴第25页
        2.3.2 肝脏虫卵计数第25页
        2.3.3 两种提取虫卵方法比较第25-26页
        2.3.4 制备虫卵可溶性抗原第26页
        2.3.5 虫卵可溶性抗原包被浓度确定第26页
        2.3.6 检测SEA灵敏度第26页
        2.3.7 检测SEA敏感性和检出率第26页
        2.3.8 SAS软件统计分析第26页
        2.3.9 间接血凝诊断试剂建立第26-27页
    2.4 结果第27-31页
        2.4.1 不同参数下NaOH消蚀法提取虫卵效果第27-28页
        2.4.2 提取虫卵两种方法的比较第28-29页
        2.4.3 消蚀法提取虫卵制备SEA用于检测血吸虫病第29-30页
        2.4.4 虫卵抗原检测的敏感性以及检出率第30页
        2.4.5 基于SEA的间接血凝实验第30-31页
        2.4.6 IHA检测鼠和兔阴阳性血清结果第31页
    2.5 讨论第31-33页
第三章 沉积虫卵主要抗原成分分析第33-53页
    3.1 引言第33页
    3.2 实验材料第33-36页
        3.2.1 生物材料第33-34页
        3.2.2 仪器设备第34页
        3.2.3 主要试剂第34页
        3.2.4 试剂配方第34-36页
    3.3 实验方法第36-42页
        3.3.1 技术路线第36-37页
        3.3.2 虫卵可溶性抗原提取第37页
        3.3.3 日本血吸虫阳性血清IgG纯化第37-38页
        3.3.4 免疫亲和层析柱的制备及SEA的亲和层析第38-39页
        3.3.5 SEA组分的SDS-PAGE银染第39-40页
        3.3.6 Dot-blot鉴定免疫亲和层析后的SEA组分第40页
        3.3.7 LC-MS鉴定SEA亲和层析组分中的蛋白第40-41页
        3.3.8 SEA亲和层析组分蛋白的生物信息学分析第41页
        3.3.9 SEA亲和层析组分中糖蛋白分析第41-42页
    3.4 结果第42-51页
        3.4.1 日本血吸虫阳性血清IgG纯化第42页
        3.4.2 SDS-PAGE银染鉴定SEA亲和层析组分第42-43页
        3.4.3 Dot-blot鉴定SEA亲和层析组分抗原性第43-44页
        3.4.4 LC-MS鉴定SEA亲和层析组分中蛋白第44页
        3.4.5 SEA亲和层析组分生物信息学分析第44-47页
        3.4.6 SEA亲和层析组分糖蛋白分析第47-49页
        3.4.7 SEA亲和层析组分N-端糖基化预测第49-51页
    3.5 讨论第51-53页
第四章 日本血吸虫P40的克隆表达及其作为早期诊断抗原的研究第53-71页
    4.1 引言第53页
    4.2 实验材料第53-55页
        4.2.1 生物材料第53页
        4.2.2 仪器设备第53-54页
        4.2.3 酶和试剂第54页
        4.2.4 试剂配方第54-55页
    4.3 实验方法第55-61页
        4.3.1 SjP40基因克隆及其相关生物信息学分析第55-58页
        4.3.2 重组质粒pET-28a(+)-SjP40的构建与鉴定第58-59页
        4.3.3 rSjP40的表达与纯化第59-60页
        4.3.4 Western Blotting分析rSjP40免疫原性第60页
        4.3.5 rSjP40免疫应答分析第60-61页
        4.3.6 评估rSjP40作为诊断抗原的应用价值第61页
    4.4 实验结果第61-69页
        4.4.1 SjP40的克隆及生物信息学分析第61-65页
        4.4.2 重组表达质粒pET-28a(+)-SjP40鉴定第65-66页
        4.4.3 重组表达质粒pET-28a(+)-SjP40诱导表达第66页
        4.4.4 重组表达质粒pET-28a(+)-SjP40纯化第66-67页
        4.4.5 Western Blot检测rSjP40免疫原性第67页
        4.4.6 rSjP40诱导BALB/c鼠体内的特异性抗体检测第67-68页
        4.4.7 rSjP40作为诊断抗原的应用价值第68-69页
    4.5 讨论第69-71页
第五章 全文结论第71-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-81页
作者简历第81页

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