中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
1.1 问题的提出与研究意义 | 第10-11页 |
1.2 国内外研究现状 | 第11-17页 |
1.2.1 OA的主要发病症状及机理 | 第11-13页 |
1.2.2 滑膜的功能及在OA发病过程中的变化 | 第13-14页 |
1.2.3 细胞因子与OA | 第14-15页 |
1.2.4 OA常见的临床治疗途径 | 第15-17页 |
1.3 本文研究目的和研究内容 | 第17页 |
1.3.1 研究目的 | 第17页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第17页 |
1.4 本文创新点 | 第17-18页 |
2 人成纤维样滑膜细胞的体外培养及鉴定 | 第18-26页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 实验材料 | 第18-20页 |
2.2.1 细胞实验 | 第18页 |
2.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第18-19页 |
2.2.3 主要试剂及配制方法 | 第19-20页 |
2.3 相关实验方法 | 第20-23页 |
2.3.1 FLSs的体外分离与原代培养 | 第20-22页 |
2.3.2 成纤维滑膜细胞鉴定 | 第22-23页 |
2.4 实验结果 | 第23-24页 |
2.4.1 成纤维样滑膜细胞(FLSs)体外分离及培养 | 第23页 |
2.4.2 成纤维样滑膜细胞的鉴定 | 第23-24页 |
2.5 讨论 | 第24-25页 |
2.6 小结 | 第25-26页 |
3 淫羊藿苷对OA滑膜细胞活性和增殖的影响 | 第26-37页 |
3.1 引言 | 第26页 |
3.2 实验材料 | 第26-28页 |
3.2.1 实验细胞 | 第26页 |
3.2.2 淫羊藿苷(Icariin) | 第26页 |
3.2.3 主要仪器设备及耗材 | 第26-27页 |
3.2.4 主要试剂及配制方法 | 第27-28页 |
3.3 相相关试验方法 | 第28-30页 |
3.3.1 OA滑膜细胞的培养 | 第28页 |
3.3.2 MTS法测定各浓度Icariin处理OA滑膜细胞后细胞生存率 | 第28-29页 |
3.3.3 流式细胞术检测淫羊藿苷对细胞周期的影响 | 第29页 |
3.3.4 EdU检测淫羊藿苷对细胞增殖的影响 | 第29-30页 |
3.4 实验结果 | 第30-35页 |
3.4.1 淫羊藿苷对OA滑膜细胞活力的影响 | 第30-31页 |
3.4.2 淫羊藿苷对OA滑膜细胞周期的影响 | 第31-33页 |
3.4.3 淫羊藿苷对OA滑膜细胞增殖的影响 | 第33-35页 |
3.5 讨论 | 第35-36页 |
3.6 小结 | 第36-37页 |
4 淫羊藿苷处理细胞后对MMP14、GRP78和IL-1Β 表达的影响 | 第37-53页 |
4.1 引言 | 第37-38页 |
4.2 实验材料 | 第38-41页 |
4.2.1 实验细胞 | 第38页 |
4.2.2 实验材料与仪器 | 第38-39页 |
4.2.3 相关试剂的配制 | 第39-41页 |
4.3 相关试验方法 | 第41-47页 |
4.3.1 细胞培养 | 第41页 |
4.3.2 药物处理 | 第41页 |
4.3.3 细胞总RNA提取,定量和反转录 | 第41-43页 |
4.3.4 Real-time PCR法检测细胞中MMP14和GRP78基因表达 | 第43-44页 |
4.3.5 Western blot法检测细胞中MMP14和GRP78蛋白的表达 | 第44-47页 |
4.3.6 免疫荧光法检测细胞中MMP14和IL-1β 的表达 | 第47页 |
4.4 实验结果 | 第47-51页 |
4.4.1 淫羊藿苷处理细胞后对MMP14和GRP78基因表达的影响 | 第47-48页 |
4.4.2 淫羊藿苷处理细胞后对MMP14和GRP78蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
4.4.3 免疫荧光检测细胞中MMP14和IL-1β 的表达 | 第49-51页 |
4.5 讨论 | 第51页 |
4.6 本章小结 | 第51-53页 |
5 淫羊藿苷对细胞迁移的影响 | 第53-56页 |
5.1 引引言 | 第53页 |
5.2 实验材料与试剂 | 第53-54页 |
5.2.1 实验细胞 | 第53页 |
5.2.2 实验材料与仪器 | 第53-54页 |
5.3 实验方法 | 第54页 |
5.3.1 细胞培养 | 第54页 |
5.3.2 实验步骤 | 第54页 |
5.4 实验结果 | 第54-55页 |
5.5 讨论 | 第55页 |
5.6 本章小结 | 第55-56页 |
6 结论与展望 | 第56-58页 |
6.1 本研究的主要结论 | 第56页 |
6.2 后期研究的展望 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |