中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 引言 | 第12-18页 |
1.1 细胞凋亡 | 第12-15页 |
1.1.1 细胞凋亡与心力衰竭 | 第12-13页 |
1.1.2 细胞凋亡的调控 | 第13-14页 |
1.1.3 细胞凋亡的检测方法 | 第14页 |
1.1.4 心肌能量代谢与细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.2 SCAD在心血管疾病中的研究现状 | 第15-16页 |
1.3 PPARα的研究现状及其与心肌细胞凋亡的关系 | 第16页 |
1.4 AMPK的研究现状及其与心肌细胞凋亡的关系 | 第16-17页 |
1.5 结语 | 第17页 |
1.6 研究思路 | 第17-18页 |
第二章 心肌细胞凋亡模型中SCAD的变化 | 第18-32页 |
2.1 前言 | 第18页 |
2.2 实验材料 | 第18-21页 |
2.2.1 实验动物 | 第18页 |
2.2.2 主要药物与试剂 | 第18-20页 |
2.2.3 主要实验仪器和器材 | 第20-21页 |
2.2.4 主要试剂配置 | 第21页 |
2.3 实验方法 | 第21-28页 |
2.3.1 心肌细胞原代培养 | 第21-22页 |
2.3.2 心肌细胞存活率检测 | 第22-23页 |
2.3.3 心肌细胞总RNA提取和Real-time PCR | 第23-26页 |
2.3.4 心肌细胞总蛋白提取和Western blot分析 | 第26-28页 |
2.3.5 实验分组 | 第28页 |
2.3.6 统计学分析 | 第28页 |
2.4 实验结果 | 第28-30页 |
2.4.1 tBHP对心肌细胞存活率的影响 | 第28-29页 |
2.4.2 心肌细胞凋亡模型中SCAD的mRNA以及蛋白的表达变化 | 第29-30页 |
2.5 讨论 | 第30-32页 |
第三章 SCAD在tBHP诱导心肌细胞凋亡中的作用 | 第32-48页 |
3.1 前言 | 第32页 |
3.2 实验材料 | 第32-35页 |
3.2.1 实验动物 | 第32页 |
3.2.2 主要药物与试剂 | 第32-34页 |
3.2.3 主要实验仪器和器材 | 第34-35页 |
3.2.4 主要试剂配置 | 第35页 |
3.3 实验方法 | 第35-43页 |
3.3.1 心肌细胞原代培养 | 第35-36页 |
3.3.2 心肌细胞总RNA提取和Real-time PCR | 第36页 |
3.3.3 心肌细胞总蛋白提取和Western blot分析 | 第36页 |
3.3.4 心肌细胞SCAD酶活性检测 | 第36-37页 |
3.3.5 心肌细胞游离脂肪酸含量检测 | 第37-39页 |
3.3.6 心肌细胞ATP含量的检测 | 第39-40页 |
3.3.7 心肌细胞存活率检测 | 第40页 |
3.3.8 Hoechst 33258荧光染色检测 | 第40-41页 |
3.3.9 Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第41-42页 |
3.3.10 SiRNA干扰 | 第42-43页 |
3.3.11 实验分组 | 第43页 |
3.3.12 统计学分析 | 第43页 |
3.4 结果 | 第43-47页 |
3.4.1 siRNA-1186敲低SCAD基因对心肌细胞SCAD表达和能量代谢的影响 | 第43-45页 |
3.4.2 siRNA-1186敲低SCAD基因对心肌细胞凋亡的影响 | 第45-47页 |
3.5 讨论 | 第47-48页 |
第四章 PPARα对心肌细胞凋亡的影响 | 第48-63页 |
4.1 前言 | 第48-49页 |
4.2 实验材料 | 第49-52页 |
4.2.1 实验动物 | 第49页 |
4.2.2 主要药物与试剂 | 第49-50页 |
4.2.3 主要实验仪器和器材 | 第50-51页 |
4.2.4 主要试剂配置 | 第51-52页 |
4.3 实验方法 | 第52-54页 |
4.3.1 心肌细胞原代培养 | 第52页 |
4.3.2 心肌细胞总RNA提取和Real-time PCR | 第52页 |
4.3.3 心肌细胞总蛋白提取和Western blot分析 | 第52页 |
4.3.4 心肌细胞SCAD酶活性检测 | 第52页 |
4.3.5 心肌细胞游离脂肪酸含量检测 | 第52-53页 |
4.3.6 心肌细胞ATP含量检测 | 第53页 |
4.3.7 心肌细胞存活率检测 | 第53页 |
4.3.8 Hoechst 33258荧光染色检测 | 第53页 |
4.3.9 Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第53页 |
4.3.10 SiRNA干扰 | 第53页 |
4.3.11 实验分组 | 第53-54页 |
4.3.12 统计学分析 | 第54页 |
4.4 结果 | 第54-61页 |
4.4.1 非诺贝特对tBHP刺激后心肌细胞凋亡的影响 | 第54-57页 |
4.4.2 非诺贝特对siRNA-1186敲低SCAD基因后心肌细胞凋亡的影响 | 第57-61页 |
4.5 讨论 | 第61-63页 |
第五章 AMPK对心肌细胞凋亡的影响 | 第63-72页 |
5.1 前言 | 第63页 |
5.2 实验材料 | 第63-67页 |
5.2.1 实验动物 | 第63-64页 |
5.2.2 主要药物与试剂 | 第64-65页 |
5.2.3 主要实验仪器和器材 | 第65-66页 |
5.2.4 主要试剂配置 | 第66-67页 |
5.3 实验方法 | 第67-68页 |
5.3.1 心肌细胞原代培养 | 第67页 |
5.3.2 心肌细胞总RNA提取和Real-time PCR | 第67页 |
5.3.3 心肌细胞总蛋白提取和Western blot分析 | 第67页 |
5.3.4 心肌细胞SCAD酶活性检测 | 第67页 |
5.3.5 心肌细胞游离脂肪酸含量检测 | 第67页 |
5.3.6 心肌细胞ATP含量检测 | 第67页 |
5.3.7 心肌细胞细胞存活率的检测 | 第67页 |
5.3.8 Hoechst 33258荧光染色检测 | 第67-68页 |
5.3.9 Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第68页 |
5.3.10 实验分组 | 第68页 |
5.3.11 统计学分析 | 第68页 |
5.4 结果 | 第68-71页 |
5.4.1 AICAR对tBHP刺激心肌细胞p-AMPKα、PPARα和SCAD的表达以及能量代谢的影响 | 第68-69页 |
5.4.2 AICAR对tBHP刺激心肌细胞凋亡的影响 | 第69-71页 |
5.5 讨论 | 第71-72页 |
总结与展望 | 第72-73页 |
总结与创新 | 第72页 |
不足与展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
附录一 英文缩略词表 | 第80-82页 |
附录二 在硕士研究生期间完成的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |