| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| 1.1 间质干细胞 | 第14-17页 |
| 1.1.1 间质干细胞生物学特性及应用 | 第14-16页 |
| 1.1.2 间质干细胞的恶性转化 | 第16-17页 |
| 1.1.3 表观遗传调控与间质干细胞恶性转化 | 第17页 |
| 1.2 miRNA | 第17-21页 |
| 1.2.1 microRNA的生物学特性与功能 | 第17-19页 |
| 1.2.2 mi RNA与肿瘤 | 第19页 |
| 1.2.3 mi R-374 | 第19-21页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第21-24页 |
| 2.1 研究目的 | 第21页 |
| 2.2 研究方法 | 第21-22页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第22-23页 |
| 2.3.1 技术路线 1 | 第22页 |
| 2.3.2 技术路线 2 | 第22-23页 |
| 2.4 研究意义 | 第23-24页 |
| 第三章 rBM-MSC恶性转化中差异表达的mi RNAs | 第24-31页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第24-25页 |
| 3.1.1 主要材料、试剂 | 第24页 |
| 3.1.2 主要仪器、耗材 | 第24-25页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第25页 |
| 3.2 方法 | 第25-26页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 3.2.2 RNA提取 | 第25页 |
| 3.2.3 逆转录PCR | 第25-26页 |
| 3.2.4 荧光定量RT-PCR | 第26页 |
| 3.2.5 数据处理与统计 | 第26页 |
| 3.3 结果 | 第26-28页 |
| 3.3.1 rBM-MSC与其转化肿瘤细胞株K3间差异miRNAs的筛选 | 第26-27页 |
| 3.3.2 rBM-MSC与其转化肿瘤细胞株K3间差异miRNAs的验证 | 第27-28页 |
| 3.4 讨论 | 第28-31页 |
| 第四章 miR-374在rBM-MSC恶性转化中的作用 | 第31-40页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
| 4.1.1 主要材料、试剂 | 第31页 |
| 4.1.2 主要仪器、耗材 | 第31-32页 |
| 4.2 方法 | 第32-33页 |
| 4.2.1 rBM-MSC, K3细胞转染模型构建 | 第32页 |
| 4.2.2 总RNA提取 | 第32页 |
| 4.2.3 逆转录PCR | 第32页 |
| 4.2.4 荧光定量RT-PCR | 第32页 |
| 4.2.5 生长曲线 | 第32页 |
| 4.2.6 克隆形成实验 | 第32页 |
| 4.2.7 流式检测细胞周期 | 第32-33页 |
| 4.2.8 Transwell迁移实验 | 第33页 |
| 4.2.9 细胞免疫荧光 | 第33页 |
| 4.2.10 数据处理与统计 | 第33页 |
| 4.3 结果 | 第33-38页 |
| 4.3.1 MiR-374模拟物明显上调rBM-MSC中内源性mi R-374的表达 | 第33-34页 |
| 4.3.2 MiR-374高表达促进rBM-MSC的增殖 | 第34-35页 |
| 4.3.3 MiR-374高表达促进rBM-MSC的迁移 | 第35-36页 |
| 4.3.4 MiR-374抑制物明显抑制K3中内源性miR-374的表达 | 第36页 |
| 4.3.5 MiR-374低表达抑制K3的增殖 | 第36-37页 |
| 4.3.6 MiR-374低表达抑制K3的迁移 | 第37-38页 |
| 4.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第五章 MiR-374通过调控wnt5a参与rBM-MSC的恶性转化 | 第40-48页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第40-41页 |
| 5.1.1 主要材料、试剂 | 第40-41页 |
| 5.1.2 主要仪器、耗材 | 第41页 |
| 5.2 方法 | 第41-43页 |
| 5.2.1 MiR-374靶基因预测 | 第41页 |
| 5.2.2 双荧光素酶报告基因分析 | 第41页 |
| 5.2.3 Western-blot | 第41-42页 |
| 5.2.4 RNA提取 | 第42页 |
| 5.2.5 逆转录PCR | 第42页 |
| 5.2.6 定量RT-PCR | 第42-43页 |
| 5.2.7 数据处理与统计 | 第43页 |
| 5.3 结果 | 第43-46页 |
| 5.3.1 Wnt5a是mi R-374的直接靶点 | 第43-44页 |
| 5.3.2 MiR-374负向调控wnt5a表达 | 第44-45页 |
| 5.3.3 MiR-374可以调控钙信号通路 | 第45-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-48页 |
| 结论及展望 | 第48-49页 |
| 一 结论 | 第48页 |
| 二 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文与参加的会议 | 第58页 |
