英文缩写一览表 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第1章 综述 | 第11-19页 |
1.1 结核分枝杆菌与结核病 | 第11页 |
1.2 结核分枝杆菌分枝菌酸 | 第11-12页 |
1.3 结核分枝杆菌MCE家族蛋白的功能 | 第12-14页 |
1.4 IL-6 | 第14页 |
1.5 MCP-1 | 第14-15页 |
1.6 MCPIP | 第15页 |
1.7 内质网压力 | 第15-16页 |
1.8 细胞凋亡 | 第16-19页 |
第2章 前言 | 第19-21页 |
第3章 实验材料与方法 | 第21-37页 |
3.1 实验材料 | 第21-24页 |
3.1.1 实验用菌株,载体和细胞 | 第21页 |
3.1.2 实验用培养基及培养条件 | 第21-22页 |
3.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
3.1.4 主要实验仪器 | 第23-24页 |
3.2 实验方法 | 第24-37页 |
3.2.1 结核分枝杆菌rv0177基因的扩增 | 第24-25页 |
3.2.2 PCR产物的回收 | 第25页 |
3.2.3 目的基因与T载体的连接 | 第25页 |
3.2.4 质粒的提取 | 第25页 |
3.2.5 pNIT_rv0177和pGEX-6P-2_rv0177重组质粒的构建 | 第25-26页 |
3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
3.2.7 大肠杆菌的转化 | 第26-27页 |
3.2.8 耻垢分枝杆菌感受态细胞的制备及电转化 | 第27-28页 |
3.2.9 Rv0177蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第28-29页 |
3.2.10 Western blotting验证Rv0177蛋白的表达 | 第29-30页 |
3.2.11 Rv0177蛋白在耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位 | 第30页 |
3.2.12 重组菌生长曲线的测定 | 第30页 |
3.2.13 重组菌在低pH和氧化压力条件下的生长 | 第30页 |
3.2.14 重组菌生物膜形态观察 | 第30-31页 |
3.2.15 重组菌滑动能力的检测 | 第31页 |
3.2.16 重组菌透射电镜观察 | 第31页 |
3.2.17 重组菌脂肪酸的提取 | 第31页 |
3.2.18 重组菌细胞壁糖肽脂类成份的提取 | 第31-32页 |
3.2.19 重组菌侵染巨噬细胞 | 第32-37页 |
第4章 结果与分析 | 第37-53页 |
4.1 RV0177基因的PCR扩增和重组耻垢分枝杆菌MS_RV0177的阳性克隆筛选 | 第37-38页 |
4.2 PGEX-6P-2_RV0177重组质粒的构建和RV0177蛋白在BL21中成功表达 | 第38-39页 |
4.3 RV0177蛋白在耻垢分枝杆菌MS_RV0177中成功表达 | 第39-40页 |
4.4 RV0177蛋白定位在重组菌MS_RV0177的细胞壁上 | 第40页 |
4.5 RV0177的过表达对重组菌MS_RV0177的生长没有影响 | 第40-41页 |
4.6 RV0177蛋白对重组菌生物膜的形成有一定的影响 | 第41-42页 |
4.7 RV0177蛋白增强了重组菌MS_RV0177的滑动能力 | 第42页 |
4.8 RV0177蛋白改变了重组菌MS_RV0177细胞壁的结构 | 第42-43页 |
4.9 重组菌MS_RV0177细胞壁的通透性降低 | 第43-44页 |
4.10 RV0177蛋白赋予了重组菌MS_RV0177在酸性和氧化压力条件下一定的生长耐受性 | 第44-45页 |
4.11 过表达RV0177蛋白并没有显著性改变细菌脂肪酸的成份和细胞壁糖肽脂类成份 | 第45-47页 |
4.12 MS_RV0177在小鼠RAW264.7 和人类THP-1 细胞中存活敏感,细胞入侵能力没有变化 | 第47-48页 |
4.13 RV0177蛋白改变小鼠RAW264.7 细胞中细胞因子的表达 | 第48-49页 |
4.14 MS_RV0177的入侵导致小鼠RAW264.7 细胞的死亡 | 第49页 |
4.15 RV0177蛋白诱导小鼠RAW264.7 细胞中MCPIP和CHOP的表达 | 第49-50页 |
4.16 JNK信号路径在MS_RV0177与小鼠RAW264.7 细胞的互作中扮演着重要角色 | 第50-51页 |
4.17 RV0177蛋白促进了小鼠RAW264.7 细胞的细胞凋亡 | 第51-53页 |
第5章 结论与展望 | 第53-57页 |
5.1 实验结论 | 第53页 |
5.2 讨论与分析 | 第53-55页 |
5.3 展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
在学期间所发表的文章 | 第67页 |