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牛1型腺病毒感染性克隆的构建及拯救

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
文献综述第12-22页
    第一章 腺病毒的研究进展第12-22页
        1.1 腺病毒第12-13页
            1.1.1 腺病毒的结构特征第12-13页
            1.1.2 腺病毒的侵染过程第13页
            1.1.3 腺病毒的分类第13页
        1.2 牛腺病毒的研究第13-16页
            1.2.1 牛腺病毒的分离培养第13-14页
            1.2.2 牛腺病毒的致病性第14页
            1.2.3 牛1型腺病毒第14-16页
                1.2.3.1 BAdV1的形态特征第15页
                1.2.3.2 BAdV1基因组第15-16页
        1.3 腺病毒载体第16-22页
            1.3.1 人腺病毒载体第16-17页
            1.3.2 牛腺病毒载体第17-18页
            1.3.3 腺病毒载体构建方法第18-19页
            1.3.4 牛腺病毒包装系统第19页
            1.3.5 牛腺病毒载体的应用第19-20页
            1.3.6 牛腺病毒载体口服粘膜免疫第20-22页
试验研究第22-53页
    第二章 牛1型腺病毒感染性质粒的构建第22-42页
        2.1 材料第23页
            2.1.1 细胞、毒株、菌株及载体第23页
            2.1.2 试剂与仪器第23页
        2.2 方法第23-34页
            2.2.1 野生1型牛腺病毒(wt BAdV1)基因组的提取第23-24页
                2.2.1.1 扩增wt BAdV1第23页
                2.2.1.2 提取wt BAdV1基因组第23-24页
            2.2.2 p UC18-CcdB-Cm质粒的构建第24-27页
            2.2.3 穿梭质粒同源臂left arm及right arm的构建第27-30页
            2.2.4 pUC18-E1-E4质粒的构建第30-33页
            2.2.5 感染性质粒p UCBAdV1的构建第33-34页
        2.3 结果第34-40页
            2.3.1 wtBAdV1基因组的提取第34-35页
            2.3.2 质粒pUC18-CcdB-cm构建成功第35-36页
            2.3.3 穿梭质粒同源臂left arm及right arm的构建第36页
            2.3.4 成功构建质粒p UC18-E1-E4第36-38页
            2.3.5 成功构建感染性质粒p UCBAdV1质粒第38-40页
        2.4 讨论第40-41页
        2.5 小结第41-42页
    第三章 牛1型腺病毒在VIDO DT1上的拯救第42-53页
        3.1 材料第42页
            3.1.1 细胞、毒株第42页
            3.1.2 试剂与仪器第42页
        3.2 方法第42-46页
            3.2.1 BAdV1的拯救第42-44页
                3.2.1.1 p UCBAdV1转染VIDO DT1细胞第42-43页
                3.2.1.2 BAdV1在VIDO DT1细胞上的包装第43页
                3.2.1.3 包装出的病毒的传代第43页
                3.2.1.4 病毒的PCR鉴定第43-44页
            3.2.2 BAdV101病毒形态的观察第44页
                3.2.2.1 样品的制备第44页
                3.2.2.2 电镜的观察第44页
            3.2.3 血清中和试验第44-46页
                3.2.3.1 wt BAdV1的扩增及病毒滴度的测定第44-45页
                3.2.3.2 抗BAdV1兔血清的制备第45页
                3.2.3.3 检测兔血清anti-BAdV1中和抗体的效价第45-46页
                3.2.3.4 检测anti-BAdV1兔血清对BAdV101的中和作用第46页
            3.2.4 BAdV101增殖趋势的检测第46页
        3.3 结果第46-50页
            3.3.1 重组BAdV1的拯救第46-47页
                3.3.1.1 重组BAdV1在VIDO DT1上的包装第46页
                3.3.1.2 BAdV101在VIDO DT1上的传代第46-47页
                3.3.1.3 病毒PCR鉴定第47页
            3.3.2 BAdV101电镜观察第47-48页
            3.3.3 血清中和试验第48-49页
            3.3.4 检测BAdV101在VIDO DT1细胞上生长第49-50页
        3.4 讨论第50-51页
        3.5 小结第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-59页
附录1第59-60页
附录2第60-62页
附录3第62-65页
致谢第65-66页
作者简介第66页

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