致谢 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语 | 第10-14页 |
1. 前言 | 第14-18页 |
2. 主要仪器设备、材料和试剂 | 第18-24页 |
2.1 主要仪器设备和耗材 | 第18-19页 |
2.2 动物、细胞及其培养液 | 第19页 |
2.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.4 试剂配制 | 第20-24页 |
2.4.1 解剖缓冲液 | 第20-21页 |
2.4.2 细胞培养液 | 第21页 |
2.4.3 电刺激系统相关溶液 | 第21-22页 |
2.4.4 细胞消化液 | 第22页 |
2.4.5 细胞冻存液 | 第22页 |
2.4.6 逆转录反应液 | 第22-23页 |
2.4.7 PCR反应体系 | 第23-24页 |
3. 实验方法 | 第24-38页 |
3.1 电刺激系统 | 第24-25页 |
3.1.1 趋电迁移小室的制备 | 第24-25页 |
3.1.2 电刺激装置的构建 | 第25页 |
3.2 饲养层细胞的提取、培养和处理 | 第25-27页 |
3.2.1 饲养层细胞的提取和培养 | 第25-26页 |
3.2.2 饲养层细胞的处理 | 第26-27页 |
3.3 人胚胎干细胞H9株系的培养与传代 | 第27页 |
3.3.1 人胚胎干细胞H9株系的培养 | 第27页 |
3.3.2 人胚胎干细胞H9株系的传代 | 第27页 |
3.4 人胚胎干细胞H9株系的电刺激准备与分组 | 第27-28页 |
3.4.1 电刺激准备 | 第27-28页 |
3.4.2 实验分组 | 第28页 |
3.5 细胞迁移实验的实时影像记录以及细胞迁移的统计分析 | 第28-30页 |
3.5.1 细胞迁移实验的实时影像记录 | 第28-29页 |
3.5.2 细胞迁移的统计与分析 | 第29-30页 |
3.6 人胚胎干细胞H9株系总RNA的提取 | 第30-31页 |
3.7 microRNA芯片分析 | 第31-33页 |
3.7.1 microRNA标记 | 第31页 |
3.7.2 芯片的杂交 | 第31-32页 |
3.7.3 芯片的扫描和分析 | 第32-33页 |
3.8 生物信息学分析 | 第33页 |
3.9 qRT-PCR检测表达量的变化 | 第33-37页 |
3.10 统计学分析 | 第37-38页 |
4. 实验结果 | 第38-49页 |
4.1 外源直流电场指导人胚胎干细胞H9株系进行正极定向迁移 | 第38-40页 |
4.2 直流电场刺激致部分入胚胎肝细胞H9株系差异表达的microRNAs | 第40-42页 |
4.3. hsa-miR-920和hsa-miR-4321靶基因的预测和鉴定 | 第42-45页 |
4.4. hsa-miR-920和hsa-miR-4321的功能分析和信号通路分析 | 第45-46页 |
4.5 非差异表达的microRNAs的功能分析 | 第46-49页 |
5. 讨论 | 第49-52页 |
6. 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
综述 | 第59-75页 |
参考文献 | 第69-75页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第75页 |