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草莓镶脉病毒RNA沉默抑制子功能分析

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 文献综述第11-20页
    1.1 草莓镶脉病毒第11-13页
        1.1.1 草莓镶脉病毒的生物学特性第11页
        1.1.2 草莓镶脉病毒的基因组特征及编码蛋白的功能第11-12页
        1.1.3 P6蛋白在CaMV各ORF翻译过程中的作用第12页
        1.1.4 植物病毒致病因子与寄主因子的互作第12-13页
    1.2 RNA沉默第13-20页
        1.2.1 RNA沉默机制第13-14页
        1.2.2 sRNA介导的抗病毒免疫第14-16页
        1.2.3 抗病毒RISCs概述第16页
        1.2.4 RNA沉默抑制子第16-20页
2 引言第20-21页
3 材料与方法第21-30页
    3.1 试验材料第21-22页
        3.1.1 SVBV带毒样本来源第21页
        3.1.2 植物材料第21页
        3.1.3 菌种、载体和质粒第21页
        3.1.4 酶和化学试剂第21页
        3.1.5 常用培养基和缓冲溶液第21页
        3.1.6 抗生素第21页
        3.1.7 实验仪器设备第21-22页
    3.2 试验方法第22-30页
        3.2.1 草莓叶片总DNA的提取第22页
        3.2.2 EasyPure? Plant RNA Kit提取RNA第22页
        3.2.3 cDNA的合成第22页
        3.2.4 PCR技术第22页
        3.2.5 PCR产物的克隆第22-23页
        3.2.6 重组质粒鉴定第23-24页
        3.2.7 农杆菌瞬时浸润方法第24页
        3.2.8 SDS-PAGE与Western印迹分析第24-25页
        3.2.9 植物表达载体的构建过程第25-27页
        3.2.10 瞬时浸润本氏烟的检测第27-28页
        3.2.11 酵母双杂交(Yest-two-Hybrid,Y2H)第28页
        3.2.12 双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC)第28-30页
4 结果与分析第30-42页
    4.1 P6蛋白是SVBV编码的唯一的沉默抑制子第30-31页
    4.2 P6蛋白能抑制单链GFP介导的沉默,而不能抑制双链GFP介导的沉默第31-36页
    4.3 P6蛋白核定位信号(NLS)影响沉默效应第36-38页
    4.4 瞬时表达的P6蛋白不能回复TRV介导的内源基因PDS的系统沉默第38-39页
    4.5 瞬时表达的P6蛋白不能抑制TRV介导的内源基因PDS的系统沉默第39-40页
    4.6 稳定表达的P6蛋白不能抑制TRV介导的内源基因PDS/Su的系统沉默第40-42页
5 讨论第42-44页
6 结论第44-45页
参考文献第45-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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