中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 草莓镶脉病毒 | 第11-13页 |
1.1.1 草莓镶脉病毒的生物学特性 | 第11页 |
1.1.2 草莓镶脉病毒的基因组特征及编码蛋白的功能 | 第11-12页 |
1.1.3 P6蛋白在CaMV各ORF翻译过程中的作用 | 第12页 |
1.1.4 植物病毒致病因子与寄主因子的互作 | 第12-13页 |
1.2 RNA沉默 | 第13-20页 |
1.2.1 RNA沉默机制 | 第13-14页 |
1.2.2 sRNA介导的抗病毒免疫 | 第14-16页 |
1.2.3 抗病毒RISCs概述 | 第16页 |
1.2.4 RNA沉默抑制子 | 第16-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-30页 |
3.1 试验材料 | 第21-22页 |
3.1.1 SVBV带毒样本来源 | 第21页 |
3.1.2 植物材料 | 第21页 |
3.1.3 菌种、载体和质粒 | 第21页 |
3.1.4 酶和化学试剂 | 第21页 |
3.1.5 常用培养基和缓冲溶液 | 第21页 |
3.1.6 抗生素 | 第21页 |
3.1.7 实验仪器设备 | 第21-22页 |
3.2 试验方法 | 第22-30页 |
3.2.1 草莓叶片总DNA的提取 | 第22页 |
3.2.2 EasyPure? Plant RNA Kit提取RNA | 第22页 |
3.2.3 cDNA的合成 | 第22页 |
3.2.4 PCR技术 | 第22页 |
3.2.5 PCR产物的克隆 | 第22-23页 |
3.2.6 重组质粒鉴定 | 第23-24页 |
3.2.7 农杆菌瞬时浸润方法 | 第24页 |
3.2.8 SDS-PAGE与Western印迹分析 | 第24-25页 |
3.2.9 植物表达载体的构建过程 | 第25-27页 |
3.2.10 瞬时浸润本氏烟的检测 | 第27-28页 |
3.2.11 酵母双杂交(Yest-two-Hybrid,Y2H) | 第28页 |
3.2.12 双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC) | 第28-30页 |
4 结果与分析 | 第30-42页 |
4.1 P6蛋白是SVBV编码的唯一的沉默抑制子 | 第30-31页 |
4.2 P6蛋白能抑制单链GFP介导的沉默,而不能抑制双链GFP介导的沉默 | 第31-36页 |
4.3 P6蛋白核定位信号(NLS)影响沉默效应 | 第36-38页 |
4.4 瞬时表达的P6蛋白不能回复TRV介导的内源基因PDS的系统沉默 | 第38-39页 |
4.5 瞬时表达的P6蛋白不能抑制TRV介导的内源基因PDS的系统沉默 | 第39-40页 |
4.6 稳定表达的P6蛋白不能抑制TRV介导的内源基因PDS/Su的系统沉默 | 第40-42页 |
5 讨论 | 第42-44页 |
6 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |