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镉胁迫下秋茄(Kandelia candel)根系蛋白质组变化及差异表达蛋白功能研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩写词第12-13页
1 文献综述第13-20页
   ·植物受镉毒害表现及抗性反应第13-14页
     ·镉对植物的毒害作用第13-14页
     ·植物对镉胁迫的抗性反应第14页
   ·红树植物对镉等重金属污染的抗性的研究现状第14-15页
   ·蛋白质组学及其在植物非生物胁迫研究中的应用第15-18页
     ·蛋白质组学的相关技术第15-17页
       ·双向凝胶电泳技术第15-16页
       ·生物质谱技术第16页
       ·生物信息学分析技术第16-17页
     ·蛋白质组学在植物非生物胁迫研究中的应用第17-18页
   ·本研究的目的、意义和技术路线第18-20页
     ·本研究的目的、意义第18-19页
     ·本研究的技术路线第19-20页
2. 镉对秋茄体内抗氧化系统和抗坏血酸、谷胱甘肽及脯氨酸合成的影响第20-33页
   ·材料与方法第20-23页
     ·试验材料第20页
     ·植物培养(营养液培养)及镉试验处理设计第20页
     ·植物根系样品制备第20页
     ·过氧化氢含量测定第20页
     ·丙二醛(MDA)含量的测定第20-21页
     ·抗氧化酶活性测定第21-22页
       ·可溶性蛋白含量测定第21页
       ·超氧化物歧化酶第21页
       ·过氧化氢酶第21页
       ·愈创木酚过氧化物酶第21页
       ·抗坏血酸过氧化物酶第21-22页
       ·谷胱甘肽还原酶第22页
     ·抗氧化剂:谷胱甘肽和抗坏血酸含量测定第22页
       ·抗氧化剂的提取第22页
       ·谷胱甘肽含量的测定第22页
       ·抗坏血酸含量测定第22页
     ·脯氨酸含量的测定第22-23页
     ·数据处理第23页
   ·结果与分析第23-30页
     ·镉对秋茄幼苗过氧化氢和丙二醛含量的影响第23-24页
     ·镉对秋茄幼苗抗氧化酶活性的影响第24-30页
       ·镉对秋茄幼苗超氧化物歧化酶活性的影响第24-25页
       ·镉胁迫对秋茄幼苗根系POD 活性的影响第25-26页
       ·镉胁迫对秋茄根CAT 活性的影响第26-27页
       ·镉胁迫对秋茄根APX 活性的影响第27-28页
       ·镉胁迫对秋茄根GR 活性的影响第28页
       ·镉胁迫对秋茄幼苗中谷胱甘肽和抗坏血酸含量的影响第28-29页
       ·镉胁迫对秋茄幼苗根系脯氨酸含量的影响第29-30页
   ·讨论第30-33页
3. 镉胁迫下秋茄根系蛋白组样品制备方法优化第33-46页
   ·仪器与设备第33页
     ·主要仪器设备第33页
     ·主要生化试剂第33页
   ·试验材料培养及镉处理第33页
   ·试验方法第33-39页
     ·秋茄根系蛋白提取第33-35页
       ·提取方法一:三氯醋酸/丙酮沉淀法(TCA/acetone method)第33-34页
       ·提取方法二:酚抽法(Phe method)第34-35页
     ·秋茄根系蛋白的裂解第35页
     ·秋茄根系蛋白含量的测定第35-36页
       ·标准曲线制作第35-36页
       ·秋茄根系样品蛋白含量测定第36页
     ·双向电泳分析第36-38页
       ·IEF第36-37页
       ·胶条平衡第37页
       ·SDS-PAGE第37-38页
     ·染色第38页
       ·考马斯亮兰染色法(CBB-R250)第38页
       ·胶体考马斯亮蓝染色法(CBB-G250)第38页
     ·图象扫描及软件分析第38-39页
   ·结果与分析第39-43页
     ·不同蛋白质提取方法的2-DE 图谱比较第39页
     ·蛋白上样量的确定第39-40页
     ·IEF 电泳第40-41页
       ·IPG 胶条pH 范围的选择第40-41页
       ·IEF 参数的优化第41页
     ·不同染色方法的比较第41-42页
     ·秋茄根系总蛋白分离的重复性及其效果第42-43页
   ·讨论第43-46页
     ·秋茄根系蛋白样品的制备第43-44页
     ·IPG 胶条的pH 范围选择和双向电泳参数的分析第44页
     ·蛋白质染色方法第44-46页
4. 不同浓度镉胁迫下秋茄根部差异蛋白质组学的研究第46-76页
   ·试验材料第46页
   ·试验方法第46-48页
     ·蛋白提取第46页
     ·双向电泳第46页
     ·凝胶染色第46页
     ·凝胶扫描及图像分析第46页
     ·胶内酶解第46-47页
     ·质谱鉴定及数据库检索第47页
     ·Western blot 验证第47-48页
   ·结果与分析第48-67页
     ·不同浓度镉胁迫下秋茄根部的差异蛋白质组分析第48-52页
     ·镉胁迫下秋茄根系差异表达蛋白的质谱鉴定第52-64页
     ·镉胁迫下秋茄根系差异表达蛋白的功能分类第64-65页
     ·镉胁迫下秋茄根系差异蛋白质的细胞内定位第65-66页
     ·Western blot 分析第66-67页
   ·讨论第67-76页
     ·能量与物质代谢相关蛋白第67-68页
     ·蛋白质代谢相关的蛋白:蛋白折叠,蛋白质合成,蛋白降解等第68-70页
     ·氨基酸转运及代谢相关的蛋白第70-72页
     ·与解毒及抗氧化作用相关的蛋白第72-73页
     ·与信号转导相关的蛋白第73-74页
     ·其他蛋白第74-76页
5. 结论第76-78页
   ·小结第76-77页
   ·展望第77-78页
参考文献第78-89页
致谢第89-90页
攻读学位期间发表的论文第90页

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