| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩写词 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-20页 |
| ·植物受镉毒害表现及抗性反应 | 第13-14页 |
| ·镉对植物的毒害作用 | 第13-14页 |
| ·植物对镉胁迫的抗性反应 | 第14页 |
| ·红树植物对镉等重金属污染的抗性的研究现状 | 第14-15页 |
| ·蛋白质组学及其在植物非生物胁迫研究中的应用 | 第15-18页 |
| ·蛋白质组学的相关技术 | 第15-17页 |
| ·双向凝胶电泳技术 | 第15-16页 |
| ·生物质谱技术 | 第16页 |
| ·生物信息学分析技术 | 第16-17页 |
| ·蛋白质组学在植物非生物胁迫研究中的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的、意义和技术路线 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第18-19页 |
| ·本研究的技术路线 | 第19-20页 |
| 2. 镉对秋茄体内抗氧化系统和抗坏血酸、谷胱甘肽及脯氨酸合成的影响 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·植物培养(营养液培养)及镉试验处理设计 | 第20页 |
| ·植物根系样品制备 | 第20页 |
| ·过氧化氢含量测定 | 第20页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第20-21页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第21-22页 |
| ·可溶性蛋白含量测定 | 第21页 |
| ·超氧化物歧化酶 | 第21页 |
| ·过氧化氢酶 | 第21页 |
| ·愈创木酚过氧化物酶 | 第21页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶 | 第21-22页 |
| ·谷胱甘肽还原酶 | 第22页 |
| ·抗氧化剂:谷胱甘肽和抗坏血酸含量测定 | 第22页 |
| ·抗氧化剂的提取 | 第22页 |
| ·谷胱甘肽含量的测定 | 第22页 |
| ·抗坏血酸含量测定 | 第22页 |
| ·脯氨酸含量的测定 | 第22-23页 |
| ·数据处理 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-30页 |
| ·镉对秋茄幼苗过氧化氢和丙二醛含量的影响 | 第23-24页 |
| ·镉对秋茄幼苗抗氧化酶活性的影响 | 第24-30页 |
| ·镉对秋茄幼苗超氧化物歧化酶活性的影响 | 第24-25页 |
| ·镉胁迫对秋茄幼苗根系POD 活性的影响 | 第25-26页 |
| ·镉胁迫对秋茄根CAT 活性的影响 | 第26-27页 |
| ·镉胁迫对秋茄根APX 活性的影响 | 第27-28页 |
| ·镉胁迫对秋茄根GR 活性的影响 | 第28页 |
| ·镉胁迫对秋茄幼苗中谷胱甘肽和抗坏血酸含量的影响 | 第28-29页 |
| ·镉胁迫对秋茄幼苗根系脯氨酸含量的影响 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-33页 |
| 3. 镉胁迫下秋茄根系蛋白组样品制备方法优化 | 第33-46页 |
| ·仪器与设备 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·主要生化试剂 | 第33页 |
| ·试验材料培养及镉处理 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-39页 |
| ·秋茄根系蛋白提取 | 第33-35页 |
| ·提取方法一:三氯醋酸/丙酮沉淀法(TCA/acetone method) | 第33-34页 |
| ·提取方法二:酚抽法(Phe method) | 第34-35页 |
| ·秋茄根系蛋白的裂解 | 第35页 |
| ·秋茄根系蛋白含量的测定 | 第35-36页 |
| ·标准曲线制作 | 第35-36页 |
| ·秋茄根系样品蛋白含量测定 | 第36页 |
| ·双向电泳分析 | 第36-38页 |
| ·IEF | 第36-37页 |
| ·胶条平衡 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE | 第37-38页 |
| ·染色 | 第38页 |
| ·考马斯亮兰染色法(CBB-R250) | 第38页 |
| ·胶体考马斯亮蓝染色法(CBB-G250) | 第38页 |
| ·图象扫描及软件分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·不同蛋白质提取方法的2-DE 图谱比较 | 第39页 |
| ·蛋白上样量的确定 | 第39-40页 |
| ·IEF 电泳 | 第40-41页 |
| ·IPG 胶条pH 范围的选择 | 第40-41页 |
| ·IEF 参数的优化 | 第41页 |
| ·不同染色方法的比较 | 第41-42页 |
| ·秋茄根系总蛋白分离的重复性及其效果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·秋茄根系蛋白样品的制备 | 第43-44页 |
| ·IPG 胶条的pH 范围选择和双向电泳参数的分析 | 第44页 |
| ·蛋白质染色方法 | 第44-46页 |
| 4. 不同浓度镉胁迫下秋茄根部差异蛋白质组学的研究 | 第46-76页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-48页 |
| ·蛋白提取 | 第46页 |
| ·双向电泳 | 第46页 |
| ·凝胶染色 | 第46页 |
| ·凝胶扫描及图像分析 | 第46页 |
| ·胶内酶解 | 第46-47页 |
| ·质谱鉴定及数据库检索 | 第47页 |
| ·Western blot 验证 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-67页 |
| ·不同浓度镉胁迫下秋茄根部的差异蛋白质组分析 | 第48-52页 |
| ·镉胁迫下秋茄根系差异表达蛋白的质谱鉴定 | 第52-64页 |
| ·镉胁迫下秋茄根系差异表达蛋白的功能分类 | 第64-65页 |
| ·镉胁迫下秋茄根系差异蛋白质的细胞内定位 | 第65-66页 |
| ·Western blot 分析 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-76页 |
| ·能量与物质代谢相关蛋白 | 第67-68页 |
| ·蛋白质代谢相关的蛋白:蛋白折叠,蛋白质合成,蛋白降解等 | 第68-70页 |
| ·氨基酸转运及代谢相关的蛋白 | 第70-72页 |
| ·与解毒及抗氧化作用相关的蛋白 | 第72-73页 |
| ·与信号转导相关的蛋白 | 第73-74页 |
| ·其他蛋白 | 第74-76页 |
| 5. 结论 | 第76-78页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| ·展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第90页 |