摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-33页 |
1.1 犬乳腺肿瘤 | 第14-23页 |
1.1.1 犬乳腺组织形态学 | 第14页 |
1.1.2 犬乳腺肿瘤发病率 | 第14-15页 |
1.1.3 犬乳腺肿瘤发生的风险因素 | 第15-16页 |
1.1.4 犬乳腺肿瘤作为人类乳腺癌研究的模型 | 第16-17页 |
1.1.5 犬乳腺肿瘤的病理学分类和分级 | 第17-20页 |
1.1.6 犬乳腺肿瘤的诊断和治疗 | 第20-22页 |
1.1.7 犬乳腺肿瘤治疗研究的进展 | 第22-23页 |
1.2 Wnt信号通路的研究 | 第23-26页 |
1.2.1 Wnt信号通路概述 | 第23页 |
1.2.2 WNT配体、FZD受体、及WNT拮抗因子 | 第23-25页 |
1.2.3 β-连环蛋白及其降解复合物 | 第25页 |
1.2.4 TCF/LEF转录因子 | 第25-26页 |
1.2.5 Wnt信号通路的靶基因 | 第26页 |
1.3 信号通路研究的技术 | 第26-31页 |
1.3.1 荧光定量PCR的应用 | 第26-27页 |
1.3.2 RT~2 Profiler PCR Array技术 | 第27-29页 |
1.3.3 免疫组织化学 | 第29-30页 |
1.3.4 免疫印迹法 | 第30-31页 |
1.4 犬Wnt信号通路的研究进展 | 第31-32页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第32页 |
1.6 技术路线 | 第32-33页 |
第二章 犬乳腺肿瘤组织的病理学分类和分级评估 | 第33-46页 |
2.1 实验材料与设备 | 第33-34页 |
2.1.1 实验动物及组织样本来源 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂及耗材 | 第33-34页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-36页 |
2.2.1 HE切片制作 | 第34-35页 |
2.2.2 HE切片分类、分级评定 | 第35-36页 |
2.2.3 病例术后的预后调查 | 第36页 |
2.2.4 统计分析 | 第36页 |
2.3 结果 | 第36-44页 |
2.3.1 临床病理学资料 | 第36-37页 |
2.3.2 组织病理学分类及分级结果 | 第37-42页 |
2.3.3 组织病理学分类和分级与生存时间的关系 | 第42-44页 |
2.4 讨论 | 第44-46页 |
第三章 犬乳腺肿瘤组织Wnt信号通路相关因子的基因表达检测 | 第46-64页 |
3.1 实验材料与设备 | 第46-48页 |
3.1.1 实验动物与组织样本来源 | 第46页 |
3.1.2 主要试剂及耗材 | 第46-48页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-52页 |
3.2.1 组织总RNA提取 | 第48-49页 |
3.2.2 总RNA浓度测定及纯度评估 | 第49页 |
3.2.3 cDNA第一链合成 | 第49-50页 |
3.2.4 RT~2 Profiler PCR Array实验 | 第50-51页 |
3.2.5 RT~2 Profiler PCR Array结果分析 | 第51-52页 |
3.3 结果 | 第52-61页 |
3.3.1 不同组织病理学分级的犬乳腺肿瘤组间Wnt通路相关基因表达的变化 | 第53-57页 |
3.3.2 不同CMT亚型分组间Wnt通路相关基因表达的变化 | 第57-61页 |
3.4 讨论 | 第61-64页 |
第四章 犬乳腺肿瘤组织Wnt信号通路相关因子的蛋白表达分析 | 第64-84页 |
4.1 实验材料和设备 | 第64-67页 |
4.1.1 组织样本来源 | 第64页 |
4.1.2 主要试剂 | 第64-66页 |
4.1.3 主要实验设备 | 第66-67页 |
4.2 实验方法 | 第67-71页 |
4.2.1 免疫组化染色流程 | 第67-68页 |
4.2.2 免疫组化结果判定 | 第68页 |
4.2.3 病例预后调查 | 第68页 |
4.2.4 组织蛋白提取 | 第68-69页 |
4.2.5 SDS-PAGE | 第69页 |
4.2.6 免疫印迹(Western blotting) | 第69-70页 |
4.2.7 β-连环蛋白第3外显子点突变检测 | 第70-71页 |
4.3 实验结果 | 第71-81页 |
4.3.1 β-连环蛋白在犬乳腺肿瘤组织中的亚细胞定位 | 第71-75页 |
4.3.2 细胞周期素D1在犬乳腺肿瘤组织中的亚细胞定位 | 第75-78页 |
4.3.3 β-连环蛋白和细胞周期素D1表达的相关性 | 第78页 |
4.3.4 β-连环蛋白和细胞周期素D1表达与术后生存期的关系 | 第78-79页 |
4.3.5 免疫印迹结果分析 | 第79-81页 |
4.3.6 β-连环蛋白第3外显子测序结果 | 第81页 |
4.4 讨论 | 第81-84页 |
第五章 结论和创新点 | 第84-86页 |
5.1 结论 | 第84页 |
5.2 创新点 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
附录 | 第102-106页 |
作者简历 | 第106页 |