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牙鲆原始生殖细胞的标记及其迁移机制的初步研究

致谢第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-27页
   ·鱼类原始生殖细胞的研究进展第12-20页
     ·原始生殖细胞的定义第12页
     ·鱼类原始生殖细胞的标记基因第12-13页
     ·鱼类原始生殖细胞的形成第13-14页
     ·鱼类原始生殖细胞的迁移第14-17页
       ·鱼类原始生殖细胞的迁移方式第14-16页
       ·鱼类原始生殖细胞迁移的分子机制第16-17页
     ·鱼类原始生殖细胞的活体标记第17-18页
     ·鱼类原始生殖细胞的应用第18-20页
   ·PGCs相关基因的研究进展第20-25页
     ·nanos基因的研究进展第20-23页
       ·nanos基因的结构第20页
       ·nanos基因的功能第20-21页
       ·nanos基因的同源基因及表达第21-22页
       ·nanos3基因PGCs特异性表达的调控第22-23页
     ·sdf1、cxcr4基因研究进展第23-25页
       ·Sdf1、Cxcr4的结构和生物学功能第23-24页
       ·Cxcr4、Sdf1作用的机制第24-25页
   ·本研究的内容与目的第25-27页
第二章 牙鲆nanos3基因的表达及PGCs特异性调控序列的分析第27-65页
   ·材料与方法第27-41页
     ·实验材料与取样第27页
     ·实验仪器与试剂第27-28页
       ·试剂第27-28页
       ·仪器第28页
     ·总RNA的提取及cDNA的合成第28-29页
     ·nanos3基因cDNA全长的克隆第29-33页
       ·nanos3部分片段的扩增第29-30页
       ·SMATer 3'/5'RACE cDNA文库的合成第30-31页
       ·nanos3 3'UTR的扩增第31-32页
       ·nanos3 5'UTR的扩增第32-33页
     ·nanos3基因的序列分析及进化树构建第33页
     ·半定量RT-PCR研究nanos3在胚胎发育过程中的表达第33-34页
     ·整体原位杂交研究nanos3在胚胎发育过程中的表达第34-36页
       ·nanos3探针的制备第34-35页
       ·整体原位杂交第35-36页
     ·DAPI染色第36页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR相关质粒的构建第36-40页
       ·GFP-ypnanos3 3'UTR-pSP64质粒的构建第36-37页
       ·DsRed-ypnanos3 3'UTR-pSP64质粒的构建第37-38页
       ·牙鲆nanos3 3'UTR突变体质粒的构建第38-40页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR相关RNA的合成第40-41页
     ·显微注射第41页
   ·结果第41-57页
     ·牙鲆nanos3基因的克隆与系统发育分析第41-43页
     ·牙鲆nanos3基因在胚胎发育各个时期的表达图谱第43-48页
     ·牙鲆nanos3基因在胚胎发育不同时期细胞内的定位第48-49页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR生物信息学分析第49-50页
     ·构建的牙鲆nanos3 3'UTR相关质粒以及合成的RNA第50-52页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR具有PGC特异性调控序列第52-54页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR不同突变体驱动GFP在PGC中特异表达的结果第54-57页
   ·讨论第57-65页
     ·牙鲆nanos3序列特征分析第57-58页
     ·牙鲆nanos3在胚胎发育过程中的表达第58-59页
     ·牙鲆PGC的迁移模式第59-61页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR可以活体标记PGC第61-62页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR的PGC特异性调控片段第62页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR中的GCAC1、GCAC2位点可能是miR430结合位点第62-63页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR中的U-rich region1可能是Dnd蛋白结合位点第63-64页
     ·牙鲆nanos3 3'UTR中其它的PGC特异性调控序列第64-65页
第三章 牙鲆cxcr4、sdf1基因的表达及原始生殖细胞(PGC)迁移机制的初步研究第65-77页
   ·材料与方法第65-68页
     ·实验材料与取样第65页
     ·实验仪器与试剂第65页
       ·试剂第65页
       ·仪器第65页
     ·总RNA的提取及cDNA的合成第65页
     ·牙鲆sdf1基因cDNA的克隆第65-66页
     ·cxcr4基因cDNA的克隆第66-67页
     ·sdf1以及cxcr4基因的序列分析及进化树构建第67页
     ·整体原位杂交研究sdf1以及cxcr4在胚胎发育过程中的表达第67-68页
   ·结果第68-74页
     ·牙鲆sdf1、cxcr4基因的克隆以及系统发育分析第68-69页
     ·牙鲆胚胎发育过程中sdf1基因的表达情况第69-72页
     ·牙鲆胚胎发育过程中cxcr4基因的表达情况第72-74页
   ·讨论第74-77页
     ·牙鲆中cxcr4、sdf1与PGC的定位以及迁移相关第74-75页
     ·牙鲆中cxcr4、sdf1的表达与胚胎发育过程的相关性第75-77页
参考文献第77-82页
作者简历第82页

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