摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
文献综述 | 第13-23页 |
1 小鼠卵母细胞的成熟 | 第13-16页 |
·卵母细胞发育成熟概述 | 第13-14页 |
·小鼠裸卵发育成熟 | 第14-16页 |
·小鼠裸卵发育成熟研究背景 | 第14-15页 |
·小鼠裸卵发育成熟研究进展 | 第15页 |
·小鼠裸卵发育成熟研究意义 | 第15-16页 |
2 小鼠卵母细胞的减数分裂调控 | 第16-23页 |
·减数分裂的阻滞和恢复 | 第16-17页 |
·小鼠卵母细胞减数分裂调控相关因素 | 第17-22页 |
·cAMP与减数分裂调控 | 第17-18页 |
·MPF与减数分裂调控 | 第18-19页 |
·MAPK与减数分裂调控 | 第19-20页 |
·间隙连接与减数分裂调控 | 第20-21页 |
·参与减数分裂调控的基因 | 第21-22页 |
·减数分裂研究相关意义 | 第22-23页 |
引言 | 第23-25页 |
1 材料与方法 | 第25-37页 |
·试验材料 | 第25-29页 |
·试验动物 | 第25页 |
·试验主要仪器和设备 | 第25页 |
·试验主要耗材 | 第25-26页 |
·试验主要试剂及溶剂的配置 | 第26-29页 |
·双抗 | 第26页 |
·体外操作液(DPBS+0.1% PVA) | 第26页 |
·卵母细胞体外成熟液(Sage,ART-1600) | 第26页 |
·细胞松弛素B(Cytochalasin B,Sigma,C-6762) | 第26页 |
·脱卵丘液 | 第26页 |
·无钙CZB | 第26-27页 |
·SrCl2 | 第27页 |
·孤雌激活液 | 第27页 |
·HTF的配制(获能液、体外受精液) | 第27页 |
·胚胎培养液(Vitrolife,Sweden) | 第27页 |
·固定液 | 第27页 |
·DPBS/PVP | 第27页 |
·破膜液 | 第27-28页 |
·封闭液 | 第28页 |
·α-tubulin免疫荧光染色抗体的配制 | 第28页 |
·cdx2免疫荧光染色抗体的配制 | 第28页 |
·4,6-二脒基2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI) | 第28页 |
·Forskolin(Sigma,F6886)的配制 | 第28页 |
·PD166285(Sigma,PZ0116)的配制 | 第28页 |
·甘油(Glycerol) | 第28页 |
·指甲油、凡士林 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-35页 |
·卵母细胞的获取与体外成熟 | 第29页 |
·成熟卵母细胞染色体凝集测定(α-tubulin免疫荧光染色) | 第29-30页 |
·染色步骤 | 第29页 |
·载玻片的准备 | 第29-30页 |
·成熟卵母细胞孤雌激活(PA) | 第30页 |
·成熟卵母细胞体外受精 | 第30-31页 |
·卵母细胞获能 | 第30页 |
·精子获能 | 第30页 |
·精子计数 | 第30-31页 |
·体外受精 | 第31页 |
·胚胎培养 | 第31页 |
·囊胚计数(cdx2免疫荧光染色) | 第31-32页 |
·RNA的提取与反转录 | 第32-34页 |
·RNA的提取 | 第32-33页 |
·反转录 | 第33-34页 |
·小鼠QPT-PCR引物序列表 | 第34页 |
·实时荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第34-35页 |
·数据统计与分析 | 第35页 |
·试验设计 | 第35-37页 |
·forskolin添加方式对小鼠裸卵功能性成熟的影响 | 第35-36页 |
·forskolin、PD166285联合作用对小鼠裸卵功能性成熟的影响 | 第36-37页 |
2 结果 | 第37-48页 |
·裸卵体外成熟状况 | 第37-38页 |
·不同forskolin添加方式对裸卵成熟效率的影响 | 第38-39页 |
·forskolin添加对成熟裸卵染色体凝集的影响 | 第39-40页 |
·forskolin添加对成熟裸卵孤雌激活、体外受精的影响 | 第40-41页 |
·forskolin、PD166285联合培养对裸卵成熟效率的影响 | 第41-42页 |
·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵孤雌激活的影响 | 第42-43页 |
·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵体外受精的影响 | 第43-45页 |
·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵染色体凝集的影响 | 第45页 |
·forskolin、PD166285联合培养对所获囊胚质量的影响 | 第45-47页 |
·forskolin、PD166285联合培养对减数分裂相关基因的影响 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-52页 |
4 小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
个人简历 | 第64页 |