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小鼠裸卵的体外培养和发育潜力的探讨

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略词表第12-13页
文献综述第13-23页
 1 小鼠卵母细胞的成熟第13-16页
   ·卵母细胞发育成熟概述第13-14页
   ·小鼠裸卵发育成熟第14-16页
     ·小鼠裸卵发育成熟研究背景第14-15页
     ·小鼠裸卵发育成熟研究进展第15页
     ·小鼠裸卵发育成熟研究意义第15-16页
 2 小鼠卵母细胞的减数分裂调控第16-23页
   ·减数分裂的阻滞和恢复第16-17页
   ·小鼠卵母细胞减数分裂调控相关因素第17-22页
     ·cAMP与减数分裂调控第17-18页
     ·MPF与减数分裂调控第18-19页
     ·MAPK与减数分裂调控第19-20页
     ·间隙连接与减数分裂调控第20-21页
     ·参与减数分裂调控的基因第21-22页
   ·减数分裂研究相关意义第22-23页
引言第23-25页
1 材料与方法第25-37页
   ·试验材料第25-29页
     ·试验动物第25页
     ·试验主要仪器和设备第25页
     ·试验主要耗材第25-26页
     ·试验主要试剂及溶剂的配置第26-29页
       ·双抗第26页
       ·体外操作液(DPBS+0.1% PVA)第26页
       ·卵母细胞体外成熟液(Sage,ART-1600)第26页
       ·细胞松弛素B(Cytochalasin B,Sigma,C-6762)第26页
       ·脱卵丘液第26页
       ·无钙CZB第26-27页
       ·SrCl2第27页
       ·孤雌激活液第27页
       ·HTF的配制(获能液、体外受精液)第27页
       ·胚胎培养液(Vitrolife,Sweden)第27页
       ·固定液第27页
       ·DPBS/PVP第27页
       ·破膜液第27-28页
       ·封闭液第28页
       ·α-tubulin免疫荧光染色抗体的配制第28页
       ·cdx2免疫荧光染色抗体的配制第28页
       ·4,6-二脒基2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)第28页
       ·Forskolin(Sigma,F6886)的配制第28页
       ·PD166285(Sigma,PZ0116)的配制第28页
       ·甘油(Glycerol)第28页
       ·指甲油、凡士林第28-29页
   ·试验方法第29-35页
     ·卵母细胞的获取与体外成熟第29页
     ·成熟卵母细胞染色体凝集测定(α-tubulin免疫荧光染色)第29-30页
       ·染色步骤第29页
       ·载玻片的准备第29-30页
     ·成熟卵母细胞孤雌激活(PA)第30页
     ·成熟卵母细胞体外受精第30-31页
       ·卵母细胞获能第30页
       ·精子获能第30页
       ·精子计数第30-31页
       ·体外受精第31页
       ·胚胎培养第31页
     ·囊胚计数(cdx2免疫荧光染色)第31-32页
     ·RNA的提取与反转录第32-34页
       ·RNA的提取第32-33页
       ·反转录第33-34页
     ·小鼠QPT-PCR引物序列表第34页
     ·实时荧光定量PCR(Real-time PCR)第34-35页
     ·数据统计与分析第35页
   ·试验设计第35-37页
     ·forskolin添加方式对小鼠裸卵功能性成熟的影响第35-36页
     ·forskolin、PD166285联合作用对小鼠裸卵功能性成熟的影响第36-37页
2 结果第37-48页
   ·裸卵体外成熟状况第37-38页
   ·不同forskolin添加方式对裸卵成熟效率的影响第38-39页
   ·forskolin添加对成熟裸卵染色体凝集的影响第39-40页
   ·forskolin添加对成熟裸卵孤雌激活、体外受精的影响第40-41页
   ·forskolin、PD166285联合培养对裸卵成熟效率的影响第41-42页
   ·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵孤雌激活的影响第42-43页
   ·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵体外受精的影响第43-45页
   ·forskolin、PD166285联合培养对成熟裸卵染色体凝集的影响第45页
   ·forskolin、PD166285联合培养对所获囊胚质量的影响第45-47页
   ·forskolin、PD166285联合培养对减数分裂相关基因的影响第47-48页
3 讨论第48-52页
4 小结第52-53页
参考文献第53-62页
致谢第62-64页
个人简历第64页

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