| 本文中主要名词汇总 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-37页 |
| 一、螺原体(spiroplasma)的研究概况 | 第13-14页 |
| 1. 螺原体的基本生物学特性 | 第13页 |
| 2. 国内外螺原体的研究 | 第13-14页 |
| ·我国螺原体资源 | 第13-14页 |
| ·螺原体的致病性 | 第14页 |
| ·螺原体全基因组测序 | 第14页 |
| 二、细胞骨架的研究进展 | 第14-21页 |
| 1. 细菌细胞骨架研究概况 | 第14-16页 |
| 2. 螺原体细胞骨架的结构与组成 | 第16-19页 |
| 3. 细胞骨架与螺原体的形态及运动 | 第19-20页 |
| 4. 原核细胞骨架相关基因的克隆表达 | 第20-21页 |
| 三、螺原体的遗传操作系统 | 第21-28页 |
| 1. 随机插入突变 | 第22-23页 |
| 2. 同源重组突变 | 第23-26页 |
| 3. 可诱导的启动子系统 | 第26页 |
| 4. 转化方法 | 第26-27页 |
| 5. 转化后培养方法 | 第27页 |
| 6. 突变株验证方法 | 第27-28页 |
| 四、本研究的主要内容、目的及意义 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-37页 |
| 第一章 蜜蜂螺原体CH-1细胞骨架相关基因mreB1-mreB5、fib的生物信息学分析与克隆表达 | 第37-71页 |
| 第一节 蜜蜂螺原体CH-1 mreB1-mreB5、加序列的生物信息学分析 | 第37-55页 |
| 前言 | 第37-40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-51页 |
| ·MreB和Fib的理化性质分析 | 第41页 |
| ·MreB和Fib的亲疏水性分析 | 第41-45页 |
| ·信号肽功能域分析 | 第45页 |
| ·MreB、Fib蛋白的二级结构、三级结构预测分析 | 第45-47页 |
| ·MreB、Fib蛋白氨基酸的亲缘关系 | 第47-51页 |
| 3 小结与讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第二节 蜜蜂螺原体CH-1 mreB基因的克隆与表达 | 第55-71页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-61页 |
| ·培养基与试剂 | 第56页 |
| ·菌株与质粒 | 第56-57页 |
| ·螺原体CH-1基因组DNA的提取 | 第57页 |
| ·螺原体CH-1细胞骨架相关基因mreB的扩增 | 第57-58页 |
| ·构建重组表达载体pETmreB1-pETmreB5 | 第58-59页 |
| ·重组质粒pETmreB1-pETmreB5在大肠杆菌中的原核表达 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白MreB1-MreB5的纯化 | 第60-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-66页 |
| ·螺原体CH-1基因组DNA和质粒pET-28a的提取 | 第61-64页 |
| ·重组表达载体pETmreB1-pETmreB5的构建及验证 | 第64页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第64-66页 |
| 3. 小结与讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 第二章 螺原体CH-1细胞骨架相关基因mreB、fib在螺原体二种不同形态时的表达量差异 | 第71-87页 |
| 前言 | 第71-74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-77页 |
| ·菌株和试剂 | 第74-75页 |
| ·暗视野显微镜及透射电镜下观察螺原体CH-1的螺旋和非螺旋形态 | 第75页 |
| ·设计real-time PCR所用引物 | 第75页 |
| ·螺原体总RNA的提取 | 第75-76页 |
| ·RNA浓度的测定 | 第76页 |
| ·反转录反应 | 第76页 |
| ·Real-time PCR | 第76-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-82页 |
| ·螺原体CH-1的形态变化 | 第77-79页 |
| ·暗视野显微镜观察 | 第77-78页 |
| ·电子显微镜观察 | 第78-79页 |
| ·基因mreB、fib在螺原体CH-1二种不同形态时的表达量差异 | 第79-82页 |
| 3. 讨论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 一、本文主要研究结果 | 第87-88页 |
| 二、本文的主要创新点 | 第88页 |
| 三、尚待解决的问题 | 第88-89页 |
| 附录 | 第89-91页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
