摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1. 前言 | 第8-13页 |
·卤虫概述 | 第8-9页 |
·卤虫的分类及形态特征 | 第8页 |
·卤虫的发育过程 | 第8页 |
·卤虫的经济价值 | 第8-9页 |
·CDC20的结构特征 | 第9-10页 |
·CDC20的功能 | 第10-12页 |
·泛素化及APC/C复合物 | 第10-11页 |
·CDC20在细胞周期中的作用 | 第11-12页 |
·研究的目的及意义 | 第12-13页 |
2. 材料与方法 | 第13-32页 |
·材料 | 第13-18页 |
·卤虫的孵化及培养 | 第13页 |
·主要药品及试剂 | 第13-17页 |
·主要设备仪器 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-32页 |
·卤虫总RNA提取 | 第18页 |
·反转cDNA模板 | 第18-19页 |
·目的基因片段的扩增 | 第19-20页 |
·cDNA末端快速扩增(RACE) | 第20-22页 |
·PCR产物的回收纯化与克隆 | 第22-23页 |
·As-cdc20的生物信息学分析 | 第23-24页 |
·原位杂交 | 第24-26页 |
·实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
·As-CDC20原核表达 | 第27-30页 |
·As-CDC20大量诱导及纯化 | 第30页 |
·免疫印迹试验 | 第30-32页 |
3. 结果 | 第32-51页 |
·As-cdc20基因全长的克隆 | 第32-35页 |
·As-cdc20 EST片段的获得 | 第32页 |
·As-cdc20基因 3’端序列的获得 | 第32-33页 |
·As-cdc20基因 5’端序列的获得 | 第33-34页 |
·As-cdc20基因全长序列 | 第34-35页 |
·As-cdc20生物信息学分析 | 第35-38页 |
·CDC20分子进化分析 | 第38-41页 |
·As-cdc20表达模式 | 第41-45页 |
·As-cdc20的表达部位 | 第41-42页 |
·As-cdc20的表达水平 | 第42-45页 |
·扩增As-cdc20开放阅读框 | 第45-46页 |
·As-CDC20重组蛋白的纯化 | 第46-47页 |
·As-CDC20重组蛋白的诱导表达 | 第46页 |
·检测As-CDC20重组蛋白可溶性 | 第46-47页 |
·As-CDC20抗体特异性鉴定 | 第47-48页 |
·Western blot检测As-CDC20蛋白的表达 | 第48-51页 |
·As-CDC20在中国卤虫不同发育时期的表达 | 第48-49页 |
·As-CDC20在不同盐度刺激下的表达 | 第49-50页 |
·As-CDC20在低温刺激下的表达 | 第50-51页 |
4. 讨论 | 第51-54页 |
·中国卤虫As-cdc20基因的结构特点及进化 | 第51-52页 |
·As-CDC20在中国卤虫各发育阶段的表达部位 | 第52页 |
·As-CDC20在中国卤虫各发育时期的表达 | 第52-53页 |
·As-CDC20在低温及高盐刺激下的表达 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60页 |