摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
1 生长素和生长素结合蛋白ABP1 | 第12-14页 |
·生长素结合蛋白ABP1的结构与性质 | 第12-13页 |
·生长素结合蛋白ABP1的分布及亚细胞定位 | 第13-14页 |
·生长素结合蛋白ABP1作用的分子机制 | 第14页 |
2 植物细胞的膜泡运输 | 第14-16页 |
·参与植物细胞膜泡运输的蛋白家族 | 第15页 |
·分泌载体膜蛋白SCAMP2 | 第15-16页 |
·ABP1与细胞膜泡运输 | 第16页 |
3 小分子G蛋白ROP | 第16-19页 |
·ROP蛋白的结构和分类 | 第17页 |
·ROP蛋白的信号转导途径 | 第17-18页 |
·ROP2与细胞膜泡运输 | 第18-19页 |
第二章 AtROP2基因cDNA的克隆 | 第19-33页 |
1 材料与试剂 | 第19页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·酶与试剂盒 | 第19页 |
·试剂 | 第19页 |
2 实验方法 | 第19-26页 |
·拟南芥总RNA的提取 | 第19-20页 |
·反转录RT-PCR | 第20页 |
·引物设计 | 第20-21页 |
·AtROP2基因的克隆 | 第21-23页 |
·CA-ROP2、DN-ROP2基因的克隆 | 第23-26页 |
3 结果与分析 | 第26-33页 |
·拟南芥总RNA提取 | 第26页 |
·AtROP2、CA-ROP2和DN-ROP2基因的扩增以及检测 | 第26-29页 |
·AtROP2、CA-ROP2和DN-ROP2基因的序列分析 | 第29-33页 |
第三章 转化载体的构建 | 第33-38页 |
1 材料与试剂 | 第33页 |
·菌株与质粒 | 第33页 |
·酶与试剂盒 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
·pWM101-OX-ROP2过表达载体的构建 | 第33-35页 |
·pWM101-CA-ROP2组成型激活载体和pWM101-DN-ROP2显性抑制载体的构建 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-38页 |
·载体构建流程 | 第36页 |
·目的片段扩增结果 | 第36-37页 |
·菌落PCR检测 | 第37页 |
·双酶切检测 | 第37-38页 |
第四章 BY-2细胞的转化 | 第38-50页 |
1 材料与试剂 | 第38页 |
·植物材料 | 第38页 |
·菌株 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-41页 |
·根癌农杆菌LBA4404的转化 | 第38页 |
·农杆菌的菌落PCR检测 | 第38-39页 |
·烟草悬浮细胞系BY-2的培养 | 第39页 |
·烟草悬浮细胞系BY-2的活体转化与抗性筛选 | 第39-40页 |
·转基因BY-2细胞的显微观察 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-48页 |
·BY-2细胞悬浮培养 | 第41页 |
·三种载体转化S-A细胞系的抗性筛选 | 第41-42页 |
·三种载体转化S-anti细胞系的抗性筛选 | 第42-43页 |
·转基因细胞的分子检测 | 第43-44页 |
·外源生长素、雌二醇处理条件的摸索 | 第44-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结果与结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录1 | 第56-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
作者简介 | 第61页 |