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经MHC-Ⅱ通路的粉尘螨Ⅰ类变应原ProDer f 1疫苗设计及其免疫治疗效果评价

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
前言第16-20页
第一部分 粉尘螨Ⅰ类变应原 ProDer f 1 经 MHC-Ⅱ通路的载体构建表达与纯化第20-53页
 1. 研究内容第20页
 2. 材料与方法第20-31页
   ·质粒和引物第20-21页
   ·主要试剂第21-23页
   ·主要仪器设备第23-25页
   ·主要试剂配制第25-31页
 3. 实验方法第31-43页
   ·重组质粒的提取第31-32页
   ·pET-28a(+)-ProDer f 1 重组质粒的双酶切鉴定第32-33页
   ·pET28a(+)-DCP 载体的构建第33-35页
   ·pET28a(+)-DCP 菌落 PCR、筛选阳性菌及测序第35页
   ·pET28a(+)-DCP-IhC 载体的构建第35-37页
   ·pET28a(+)-DCP-ProDer f 1、pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f 1 的构建及酶切鉴定第37页
   ·ProDer f 1、DCP- ProDer f 1、DCP-IhC- ProDer f 1 蛋白的小量诱导表达第37-38页
   ·ProDer f 1、DCP-ProDer f 1、DCP-IhC-ProDer f 1 蛋白的SDS-PAGE 分析第38-39页
   ·ProDer f 1、DCP- ProDer f 1、DCP-IhC- ProDer f 1 蛋白的大量诱导表达第39-40页
   ·ProDer f 1、DCP- ProDer f 1、DCP-IhC- ProDer f 1 蛋白的纯化及鉴定第40-41页
   ·纯化产物的免疫印记(Western blot)分析第41页
   ·Bradford’s 法定量蛋白浓度第41-43页
 结果第43-51页
  1. 质粒 pET-28a(+)-ProDer f 1 的酶切鉴定第44-45页
  2. 质粒 pET28a(+)-DCP 及 pET28a(+)-DCP-IhC 的酶切及测序结果第45页
  3. 质粒 pET-28a(+)-DCP-ProDer f 1、 pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f 1酶切鉴定第45-46页
  4. ProDer f 1、DCP- ProDer f 1、DCP-IhC- ProDer f 1 蛋白的 SDS-PAGE分析第46-49页
  5. ProDer f 1、DCP-ProDer f 1 和 DCP-IhC-ProDer f 1 重组蛋白的纯化第49页
  6. 纯化产物的免疫印迹(Western blot)鉴定第49-50页
  7. 重组蛋白浓度测定第50-51页
 讨论第51-53页
第二部分 DCP-ProDer f 1、DCP-IhC-ProDer f 1 重组蛋白对哮喘小鼠免疫治疗的效果分析第53-68页
 1. 研究内容第53页
 2. 材料与方法第53-57页
   ·材料与试剂第53-55页
   ·实验方法第55-57页
 3. 统计学方法第57-58页
 结果第58-65页
  1. 各组小鼠症状和体征的改变第58页
  2. ELISA 法测定血清中特异性 IgE、IgG1和 IgG2a的含量第58-60页
  3. ELISA 法测定脾细胞培养上清液中抗原特异性 IL-4、IL-10、IL-17 和IFN-γ的含量第60-62页
  4. 肺组织切片 HE 染色第62-63页
  5. ELISA 法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中特异性细胞因子 IL-4、IL-10、IL-17 和 IFN-γ的含量第63-65页
 讨论第65-68页
结论第68-69页
参考文献第69-75页
综述第75-88页
 参考文献第82-88页
作者简介及读研期间主要科研成果第88-89页
致谢第89-90页

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