英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-36页 |
·斜纹夜蛾及其防治 | 第15-17页 |
·农林害虫斜纹夜蛾 | 第15-16页 |
·斜纹夜蛾的防治 | 第16-17页 |
·杆状病毒概述 | 第17-20页 |
·杆状病毒的分类 | 第17页 |
·杆状病毒的形态和结构 | 第17-18页 |
·杆状病毒的生活周期 | 第18-20页 |
·杆状病毒基因组研究 | 第20-26页 |
·杆状病毒基因组结构 | 第20-21页 |
·杆状病毒基因组 DNA 的复制机构 | 第21-25页 |
·杆状病毒复制原点 | 第21-23页 |
·与病毒 DNA 复制相关保守基因 | 第23-25页 |
·基因组的重组 | 第25-26页 |
·杆状病毒的基因研究 | 第26-29页 |
·杆状病毒的基因结构 | 第26-27页 |
·启动子基序 | 第26-27页 |
·非翻译区 | 第27页 |
·开放阅读框(ORFs) | 第27页 |
·杆状病毒基因及其功能 | 第27-29页 |
·杆状病毒的应用研究 | 第29-32页 |
·杆状病毒可作为载体表达系统 | 第29-30页 |
·杆状病毒可作为生物杀虫剂 | 第30-31页 |
·杆状病毒可用于基因治疗 | 第31页 |
·杆状病毒可作为表面展示系统 | 第31-32页 |
·杆状病毒表达系统的不足和展望 | 第32页 |
·研究目的与研究内容 | 第32-36页 |
·研究目的及意义 | 第32-33页 |
·研究内容 | 第33-35页 |
·技术路线 | 第35-36页 |
2 材料与方法 | 第36-53页 |
·材料 | 第36-43页 |
·昆虫、病毒株和细胞系 | 第36页 |
·质粒载体和受体菌 | 第36页 |
·酶和主要试剂 | 第36页 |
·常用试剂配制 | 第36-41页 |
·PCR 引物 | 第41页 |
·主要仪器设备 | 第41-43页 |
·方法 | 第43-53页 |
·生物信息学分析 | 第43页 |
·生物软件资源 | 第43页 |
·生物信息学网络资源 | 第43页 |
·序列比对和同源性分析 | 第43页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第43-44页 |
·基因片段的 PCR 扩增 | 第44页 |
·PCR 产物的回收 | 第44页 |
·连接反应 | 第44-45页 |
·感受态细胞的制备(CaCl2 法) | 第45页 |
·重组质粒的转化 | 第45页 |
·重组质粒的筛选(快速细胞破碎法) | 第45页 |
·碱裂解法少量制备质粒 DNA | 第45-46页 |
·酶切鉴定反应 | 第46页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第46页 |
·表达产物存在形式的检测 | 第46页 |
·SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第46-47页 |
·重组蛋白的大量诱导表达 | 第47页 |
·包涵体蛋白样品的处理 | 第47页 |
·融合蛋白的纯化 | 第47-48页 |
·Ni 柱的再生 | 第48页 |
·蛋白浓度的测定(Bradford 法) | 第48页 |
·融合蛋白的质谱鉴定 | 第48页 |
·多克隆抗体的制备 | 第48-49页 |
·多克隆抗体效价的测定(ELlSA 法) | 第49页 |
·各时相总 RNA 的提取和反转录 | 第49页 |
·Realtime PCR 和标准曲线制作 | 第49-50页 |
·昆虫细胞的传代与培养 | 第50页 |
·细胞的冻存 | 第50页 |
·细胞的复苏 | 第50页 |
·脂质体介导的功能质粒在昆虫细胞系中的转染与瞬时表达 | 第50-51页 |
·萤光素酶标记的启动子活性分析 | 第51页 |
·细胞总 DNA 的抽提及定量 | 第51页 |
·总蛋白质的提取及定量 | 第51-52页 |
·Western Blot 检测 | 第52页 |
·免疫荧光细胞化学 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-94页 |
·同源重复区(hrs)功能分析 | 第53-64页 |
·hrs 生物信息学分析 | 第53-58页 |
·hrs 功能质粒的构建 | 第58-60页 |
·hrs 复制功能分析 | 第60-61页 |
·hrs 增强功能分析 | 第61-62页 |
·64bp 回文序列功能分析 | 第62-63页 |
·hrs 特征结构与复制增强效率的相互关系 | 第63-64页 |
·ORF63 生物信息学分析 | 第64-73页 |
·序列分析 | 第64-65页 |
·保守结构域分析 | 第65页 |
·同源性分析 | 第65-67页 |
·信号肽分析 | 第67-68页 |
·GP63 的跨膜结构域分析 | 第68-69页 |
·疏水性分析 | 第69-70页 |
·功能结构域分析 | 第70页 |
·磷酸化、糖基化位点预测 | 第70-71页 |
·二级结构分析 | 第71页 |
·卷曲螺旋分析 | 第71-73页 |
·ORF63 启动子活性与转录时相分析 | 第73-80页 |
·启动子特征基序分析 | 第73页 |
·功能质粒的构建 | 第73-74页 |
·启动子活性分析 | 第74-75页 |
·ORF63 在细胞中转录时相分析 | 第75-78页 |
·ORF63 在宿主中转录时相分析 | 第78-80页 |
·ORF63 原核表达与抗体制备 | 第80-85页 |
·ORF63 重组质粒构建 | 第80-81页 |
·ORF63 原核表达 | 第81页 |
·ORF63 融合蛋白的纯化 | 第81-83页 |
·ORF63 融合蛋白的质谱鉴定 | 第83页 |
·ORF63 蛋白质浓度测定 | 第83-84页 |
·多克隆抗体制备及效价检测 | 第84-85页 |
·ORF63 表达时相与亚细胞定分析 | 第85-94页 |
·ORF63 在宿主中表达时相分析 | 第85-86页 |
·ORF63 在细胞中表达时相分析 | 第86页 |
·ORF63 亚细胞定位分析 | 第86-88页 |
·ORF6、ORF57 和 ORF146 等亚细胞定位分析 | 第88-94页 |
4 讨论 | 第94-98页 |
·杆状病毒基因组 DNA 复制原点分析 | 第94-95页 |
·ORF63 转录时相分析 | 第95-96页 |
·ORF63 表达时相分析 | 第96页 |
·ORF63 亚细胞定位分析 | 第96-98页 |
5 结论 | 第98-100页 |
6 参考文献 | 第100-111页 |
7 致谢 | 第111-112页 |
8 攻读学位期间发表的主要论文 | 第112页 |