中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 前言 | 第12-35页 |
·miRNA及miRNA的生物学意义 | 第12-19页 |
·miRNA的形成及作用机制 | 第12-15页 |
·miRNA的生物学意义 | 第15-17页 |
·组织特异性及肿瘤相关性miRNA | 第17-19页 |
·miRNA的调控 | 第19-22页 |
·miRNA调控的研究方向 | 第19-20页 |
·核酸对miRNA的调控 | 第20-21页 |
·小分子对miRNA的调控 | 第21-22页 |
·作为结构多样性化合物来源的有机光反应 | 第22-23页 |
·目前已经报道的miRNA调控剂的筛选方法 | 第23-27页 |
·论文立题依据 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-35页 |
第二章 miRNA小分子调控剂筛选体系的构建 | 第35-53页 |
引言 | 第35页 |
结果与讨论 | 第35-45页 |
·基于荧光素酶报告质粒的筛选体系的构建 | 第35-38页 |
·荧光素酶报告质粒 | 第36页 |
·靶序列的设计 | 第36-37页 |
·细胞转染 | 第37-38页 |
·通过荧光素酶报告质粒对miRNA调控剂的筛选 | 第38-40页 |
·荧光素酶报告质粒筛选体系的验证 | 第40-41页 |
·基于EGFP报告质粒的筛选体系的构建及该体系的初步验证 | 第41-45页 |
本章小结 | 第45页 |
实验部分 | 第45-52页 |
·仪器与试剂 | 第45-46页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·基于荧光素酶报告质粒的构建与提取 | 第46-48页 |
·通过荧光素酶报告质粒对miRNA调控剂的筛选 | 第48-49页 |
·荧光素酶报告质粒筛选体系的验证 | 第49-50页 |
·基于EGFP报告质粒的构建、提取与初步验证 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-53页 |
第三章 miRNA小分子调控剂的筛选 | 第53-70页 |
引言 | 第53页 |
结果与讨论 | 第53-65页 |
·待筛选的小分子化合物 | 第53-54页 |
·小分子的毒性测试 | 第54页 |
·小分子对miR-21的活性研究 | 第54-61页 |
·成胶因子类小分子对miR-21的活性研究 | 第54-60页 |
·1,8萘二酸酐类小分子对miR-21的活性研究 | 第60页 |
·光反应及水解产物对miR-21的活性研究 | 第60-61页 |
·小分子对miR-214的活性研究 | 第61-65页 |
·光反应及水解产物对miR-214的活性研究 | 第61-63页 |
·可见光催化反应产物对miR-214的活性研究 | 第63-65页 |
本章小结 | 第65-66页 |
实验部分 | 第66-68页 |
·仪器和试剂 | 第66页 |
·MTT细胞活力测试 | 第66-67页 |
·miRNA小分子调控剂的筛选 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第四章 miRNA的广谱型激活剂分子的获取及其作用机制的研究 | 第70-101页 |
引言 | 第70-71页 |
结果与讨论 | 第71-84页 |
·小分子的来源—萘醌与炔烃的光反应 | 第71-74页 |
·2-甲氧基-1,4-萘醌和炔烃的光反应 | 第71-72页 |
·1,4-萘醌和炔烃的光反应 | 第72-74页 |
·光反应产物的毒活性研究 | 第74-79页 |
·萘醌与炔烃的光反应产物的细胞毒性研究 | 第74-76页 |
·萘醌与炔烃的光反应产物对miRNA的活性研究 | 第76-79页 |
·2a-4作为miRNA广谱激活剂的作用机制 | 第79-84页 |
·2a-4在miRNA形成过程中的影响 | 第80-82页 |
·2a-4在miRNA发挥功能过程中的影响 | 第82-84页 |
本章小结 | 第84页 |
实验部分 | 第84-99页 |
·仪器和试剂 | 第84-86页 |
·光反应的一般步骤 | 第86页 |
·MTT细胞活力测试 | 第86页 |
·miRNA小分子调控剂的筛选 | 第86-87页 |
·RNA提取、逆转录与RT-qPCR | 第87-89页 |
·蛋白印迹法(Western Blot) | 第89-90页 |
·免疫共沉淀法(Immunoprecipitation) | 第90页 |
·2-甲氧基-1,4-萘醌及萘醌与炔烃光反应的一般步骤和产物光谱数据 | 第90-99页 |
参考文献 | 第99-101页 |
第五章 广谱激活剂结构类似物的合成及其毒活性评估 | 第101-116页 |
引言 | 第101-102页 |
结果与讨论 | 第102-106页 |
·萘醌与取代苯基炔的光反应 | 第102-104页 |
·萘醌与取代苯基炔光反应产物的毒性研究 | 第104-105页 |
·萘醌与取代苯基炔光反应产物的活性研究 | 第105-106页 |
本章小结 | 第106页 |
实验部分 | 第106-114页 |
·仪器和试剂 | 第106-107页 |
·光反应的一般步骤 | 第107页 |
·MTT细胞活力测试 | 第107-108页 |
·miRNA小分子调控剂的筛选 | 第108页 |
·萘醌与炔烃光反应的一般步骤和产物光谱分析数据 | 第108-114页 |
参考文献 | 第114-116页 |
总结与展望 | 第116-118页 |
附图 | 第118-136页 |
博士期间已发表的论文 | 第136-137页 |
致谢 | 第137-138页 |