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调控miRNA的活性小分子的发现和作用机制研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 前言第12-35页
   ·miRNA及miRNA的生物学意义第12-19页
     ·miRNA的形成及作用机制第12-15页
     ·miRNA的生物学意义第15-17页
     ·组织特异性及肿瘤相关性miRNA第17-19页
   ·miRNA的调控第19-22页
     ·miRNA调控的研究方向第19-20页
     ·核酸对miRNA的调控第20-21页
     ·小分子对miRNA的调控第21-22页
   ·作为结构多样性化合物来源的有机光反应第22-23页
   ·目前已经报道的miRNA调控剂的筛选方法第23-27页
   ·论文立题依据第27-28页
 参考文献第28-35页
第二章 miRNA小分子调控剂筛选体系的构建第35-53页
 引言第35页
 结果与讨论第35-45页
   ·基于荧光素酶报告质粒的筛选体系的构建第35-38页
     ·荧光素酶报告质粒第36页
     ·靶序列的设计第36-37页
     ·细胞转染第37-38页
   ·通过荧光素酶报告质粒对miRNA调控剂的筛选第38-40页
   ·荧光素酶报告质粒筛选体系的验证第40-41页
   ·基于EGFP报告质粒的筛选体系的构建及该体系的初步验证第41-45页
 本章小结第45页
 实验部分第45-52页
     ·仪器与试剂第45-46页
     ·细胞培养第46页
     ·基于荧光素酶报告质粒的构建与提取第46-48页
     ·通过荧光素酶报告质粒对miRNA调控剂的筛选第48-49页
     ·荧光素酶报告质粒筛选体系的验证第49-50页
     ·基于EGFP报告质粒的构建、提取与初步验证第50-52页
 参考文献第52-53页
第三章 miRNA小分子调控剂的筛选第53-70页
 引言第53页
 结果与讨论第53-65页
   ·待筛选的小分子化合物第53-54页
   ·小分子的毒性测试第54页
   ·小分子对miR-21的活性研究第54-61页
     ·成胶因子类小分子对miR-21的活性研究第54-60页
     ·1,8萘二酸酐类小分子对miR-21的活性研究第60页
     ·光反应及水解产物对miR-21的活性研究第60-61页
   ·小分子对miR-214的活性研究第61-65页
     ·光反应及水解产物对miR-214的活性研究第61-63页
     ·可见光催化反应产物对miR-214的活性研究第63-65页
 本章小结第65-66页
 实验部分第66-68页
     ·仪器和试剂第66页
     ·MTT细胞活力测试第66-67页
     ·miRNA小分子调控剂的筛选第67-68页
 参考文献第68-70页
第四章 miRNA的广谱型激活剂分子的获取及其作用机制的研究第70-101页
 引言第70-71页
 结果与讨论第71-84页
   ·小分子的来源—萘醌与炔烃的光反应第71-74页
     ·2-甲氧基-1,4-萘醌和炔烃的光反应第71-72页
     ·1,4-萘醌和炔烃的光反应第72-74页
   ·光反应产物的毒活性研究第74-79页
     ·萘醌与炔烃的光反应产物的细胞毒性研究第74-76页
     ·萘醌与炔烃的光反应产物对miRNA的活性研究第76-79页
   ·2a-4作为miRNA广谱激活剂的作用机制第79-84页
     ·2a-4在miRNA形成过程中的影响第80-82页
     ·2a-4在miRNA发挥功能过程中的影响第82-84页
 本章小结第84页
 实验部分第84-99页
     ·仪器和试剂第84-86页
     ·光反应的一般步骤第86页
     ·MTT细胞活力测试第86页
     ·miRNA小分子调控剂的筛选第86-87页
     ·RNA提取、逆转录与RT-qPCR第87-89页
     ·蛋白印迹法(Western Blot)第89-90页
     ·免疫共沉淀法(Immunoprecipitation)第90页
     ·2-甲氧基-1,4-萘醌及萘醌与炔烃光反应的一般步骤和产物光谱数据第90-99页
 参考文献第99-101页
第五章 广谱激活剂结构类似物的合成及其毒活性评估第101-116页
 引言第101-102页
 结果与讨论第102-106页
   ·萘醌与取代苯基炔的光反应第102-104页
   ·萘醌与取代苯基炔光反应产物的毒性研究第104-105页
   ·萘醌与取代苯基炔光反应产物的活性研究第105-106页
 本章小结第106页
 实验部分第106-114页
     ·仪器和试剂第106-107页
     ·光反应的一般步骤第107页
     ·MTT细胞活力测试第107-108页
     ·miRNA小分子调控剂的筛选第108页
     ·萘醌与炔烃光反应的一般步骤和产物光谱分析数据第108-114页
 参考文献第114-116页
总结与展望第116-118页
附图第118-136页
博士期间已发表的论文第136-137页
致谢第137-138页

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